Cell Technology ACT100 说明书

世界*实验材料供应商 Cell Technology上海金畔生物为其中国代理, Cell Technology在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, Cell Technology就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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Cell Technology公司是一家私有公司,公司致力为广大客户提供的生物检测产品和服务。Cell Technology的员工是公司zui重要的竞争优势。Cell Technology有助于我们产品的公司的不妥协的质量承诺以确保每个产品的搞品质。Cell Technology员工和技术的的多样性使得我们能以*的工艺解决当今复杂的商业挑战。

Cell Technology主要产品包括抗体和试剂,同时提供代谢试验,双传感器的检测,荧光酶检测,氧化应激检测的产品及服务。

 

 

ACT 1

Assay for CytoToxicity – A non-radioactive cytotoxicity assay for flow cytometry

细胞毒性测定 – 用于流式细胞术的非放射性细胞毒性测定法

产品代码:ACT100

 

产品描述

主要优点:

  • 没有放射性物质的要求。
  • 应用 – 流式细胞仪或荧光显微镜。
  • 检测细胞水平的细胞溶解活性。
  • 适用于多种类型的哺乳动物细胞系。

技术

测量CMC / ADCCzui常用的方法是放射性铬-51(51Cr)释放测定(2)。这种方法有几个缺点:由于严格的环境规定,昂贵,难以装载某些细胞类型,处理昂贵,并且具有51Cr自发释放的高背景。通过使用流式细胞术,现在可以消除对放射性物质的需求,并增加定量单细胞碱基上细胞溶解活性的能力。不同的研究小组已经证明,通过流式细胞术测量CMC / ADCC活性与传统的51Cr释放测定(3,4,5,6)具有很强的(95%)相关性。

 

测定原理

细胞追踪染料CFSE(7,8,9)被用于标记靶细胞群体。在测定完成其实验方案后,加入7AAD(活/死)(10,11)以测量细胞死亡。7AAD仅进入膜损伤的细胞并与DNA结合。

利用流式细胞术来门控靶细胞并测量7AAD阴性对照7AAD后细胞。%细胞毒性通过以下等式计算(参见下面的实验实施例):

7AAD正(右上象限)= R1 / 7AAD后(右上象限)= R1 + 7AAD负(右下象限)= R2 ×100 
ACT1

为了测试猪gd淋巴细胞的自然杀伤能力,将K562细胞染色并调整至终浓度为1×10 4细胞/100μl含有10%FBS的PRMI。以25:1,50:1和100:1的E / T比例加入gd淋巴细胞并将其调整至400μlRPMI的总体积,然后在无菌盖帽的facs管中在37℃温育4小时。温育后,将活的/死的染色剂直接加入到每个试管中,在冰上孵育15分钟并通过流式细胞术分析。