1包被缓冲液，
（1）碳酸盐缓冲液（PH9.6 +0.2 0.05M） 《激素酶免疫测定技术》石老师编著
Na2CO31.59g
NaHCO3 2.93g
加蒸馏水至1000ml。
（2）tris缓冲液（0.05mol/L）50ml 0.1mol/L
（Tris）溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后，加水稀释至100ml 《酶免疫测定技术》杨立国等编著
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各种pH值的Tris缓冲液的配制 |
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所需pH值（25℃） |
0.1mol/L HCl的体积 |
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7．1 |
45．7 |
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7．2 |
44．7 |
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7．3 |
43．4 |
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7．4 |
42．0 |
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7．5 |
40．3 |
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7．6 |
38．5 |
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7．7 |
36．6 |
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7．8 |
34．5 |
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7．9 |
32．0 |
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8．0 |
29．2 |
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8. 1 |
26.2 |
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8.2 |
22.9 |
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8.3 |
19.9 |
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8.4 |
17.2 |
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8.5 |
14.7 |
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8.6 |
12.4 |
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8.7 |
10.3 |
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8.8 |
8.5 |
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8.9 |
7.0 |
某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积（单位：ml）的0.1ml/L HCl混合，加水将体积调至100ml
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0.1mol/L盐酸的配置： 买来的浓盐酸是 12 mol/L的，以配制1L 0.1mol/L的盐酸为例： 先用量筒量取8.3 mL的浓盐酸倒入容量瓶，然后将溶液加蒸馏水稀释至体积为1 L，此时的溶液就是0.1mol/L的盐酸。
0.1mol/Ltris的配置：0.1 mol/L溶液为12.114 g/L 则 配制600mlTris缓冲液的方法： 三羟甲基氨基甲烷： 3.6g 浓盐酸： 2.09ml
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3）0.02mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4）
磷酸二氢钾 0.2g
磷酸氢二钠 2.90g
氯化钠 8g
加去离子水定容到1000ml。
2洗涤缓冲液（pH7.4 0.15mol/L） 《激素酶免疫测定技术》石老师编著
0.05%Tween-20 0.5ml
加在PBS缓冲液1000ml中。
PBS缓冲液：
KH2PO4 0.2g
Na2HPO4·12H2O 2.9g
NaCl 8.0g
KCl 0.2g
加蒸馏水至1000ml。
3测定缓冲液（Ph7.0 含0.87﹪NaCl 和0.1﹪BSA的0.1M磷酸缓冲液）用于标准孕酮，孕酮酶标物及奶样的稀释。 《激素酶免疫测定技术》石老师编著
Na2HPO4·12H2O 21.85g
NaH2PO4·2H2O 6.08g
NaCl 8.70g
BSA 1.00g
溶于1000mL蒸馏水中
4封闭缓冲液
牛血清白蛋白（BSA） 2% 2g
（或5%脱脂奶粉）加洗涤缓冲液100 ml。
0.05mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.6）+2.0%BSA
2.0gBSA加配好的0.05mol/L碳酸盐缓冲液溶解定量至100ml
5底物缓冲液（pH5.4）磷酸盐-柠檬酸缓冲液
0.2M Na2HPO4（无水28.4g/L，带12结晶水71.7g/L） 取25.7ml
0.1M 柠檬酸（无水19.2g/L，带1结晶水21.01g/L） 取24.3ml
加蒸馏水至100ml。
或
柠檬酸（C6H8O7·H2O） 0.47g
Na2HPO4·12H2O 2.00g
6（1） TMB（四甲基联苯胺）显色液（蓝色）
A液（3，3’，5，5’-四甲基联苯胺，TMB）:称取TMB20mg溶于10ml无水乙醇中，*溶解后，加双蒸水至100ml。
B液（0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸氢二钠缓冲液，pH5.0-5.4）:称取Na2HPO4·12H2O14.34g，柠檬酸1.87g溶于180ml双蒸水，加0.75%过氧化氢尿素1.28ml，定容至200ml，调pH至5.0-5.4。
将A液和B液按1：l混合后即成TMB-过氧化氢尿素应用液
或
TMB（2mg/ml水） 0.05ml
底物缓冲液 0.95ml
30% H2O2 0.001ml
总体积1ml。
（2）OPD（邻苯二胺）显色液（黄棕色）（现配避光）
OPD（干粉） 0.004g
底物缓冲液 10ml
30% H2O2 0.015ml
总体积10ml。
（3）TMBS底物液（用于显色） 《激素酶免疫测定技术》石老师编著
10mg四甲基联苯胺硫酸盐（TMBS）的二甲基亚砜溶液，用底物缓冲液配成0.2mg/ml的TMBS底物液。用前加H2O2溶液30﹪左右。
7 终止液 2mol/LH2SO4 用于终止反应
在178.3ml水中，逐滴加入浓硫酸（18M，约98%）21.7ml，边加边摇。（浓H2SO4：蒸馏水=1:9）