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PhyNexus PTV 92-20-19说明书

C18 Mass Spectrometry PhyTip Columns

PhyNexus开发了一种自动化工艺，使用C18色谱柱和C4色谱柱对蛋白质/多肽进行脱盐或“清理” ，以简化样品制备，进行质谱分析（一次多96个）。当使用手动移液管进行反相纯化时，吸气溶液中的背压会给操作者带来不便，并导致结果不一致。PhyTip色谱柱具有与自动化相辅相成的一致性，易用性和可扩展性，可实现清理。凭借蛋白质结合的高容量和多功能性，PhyNexus C18色谱柱是开发流体MALDI或LC-MS工作流程的适选择。

由于PhyTip移液器吸头柱的床尺寸和容量增加，C18色谱柱与其他色谱柱相比，极性和非极性分子的选择性提高。这种较大的床尺寸将使捕获的平衡推动到增加量的捕获产物。当比较一些的C18的容量时，C18 PhyTip色谱柱的结合量是每毫升树脂蛋白质量的两倍多，同时具有相当的回收率和范围。

C18色谱柱比C4色谱柱更具疏水性，可提供出色的灵敏度和肽的结合。中等90Å和300Å孔均可用于肽和蛋白质片段的差异选择性。在C4和C18树脂之间进行选择时，主要区别在于C4由于其较短的长度和更接近极性二氧化硅基板而比C18稍微更具极性。因此，对于更多极性分子，C4树脂的选择性增加。

这些柱结合了多种蛋白质和多肽大小。结合能力高，较小或更极性的多肽损失较少。在普通的质谱兼容溶剂中回收样品。此外，凝胶过滤柱可用于进行快速且*自动化的96次缓冲液脱盐或缓冲液交换。

使用我们专有的双流色谱 C18提示   完整的抗体结合和高终浓度。C18 PhyTip色谱柱兼容大多数8,12和96通道自动化液体处理机器人，包括  Agilent Technologies，  Beckman Coulter，  Dynamic Devices，  Perkin Elmer，  Hamilton和  Tecan。

PhyNexus开发了一种自动化工艺，使用C18PhyTip®色谱柱对蛋白质/多肽进行脱盐或“清理”，用于质谱（MS）分析。PhyTip柱通过反相固相萃取（SPE）结合蛋白质/肽，其利用长碳链C18树脂基于其疏水性捕获和分离肽。

PhyTip色谱柱由C18树脂组成，通过两个薄的惰性玻璃料屏幕保留在移液器吸头上。根据下游分析，PhyTip色谱柱可以在5μL床中使用90Å或300Å孔隙树脂制成，并且可以处理高达200μL的溶液。PhyTip色谱柱通过双流色谱处理肽，这是一种由控制体积和流速的液体处理器执行的来回流动的系统过程。

因此，该方法可用于清除中小规模的肽样品（每次多96个），用于基质辅助激光解吸电离（MALDI）或电喷雾电离（ESI）质谱。自动化过程的一部分。

PhyNexus MEA个人净化系统的样品处理

1.样品制备成0.1％三氟y酸（TFA）浓度

2.用100μL100％乙腈（ACN）润湿4个循环

3.用100μL0.1％TFA平衡1个循环

4.用185μL样品捕获4个循环

5.用100μL0.1％TFA洗涤1个循环

6.用100μL70％ACN + 0.1％TFA洗脱4个循环

每个循环包括一次抽吸和一次排出，流速为1 mL / min。每个洗脱抽吸/排出步骤以4个增量进行，暂停5秒，而所有其他抽吸/排出步骤以8个增量进行，暂停30秒。该处理旨在模拟手动移液，同时补偿背压。密封洗脱板以防止挥发性洗脱缓冲液在处理期间蒸发，并且将溶液真空脱气以进一步确保空气不进入柱。

质谱PhyTip色谱柱可用于这些机器人系统。