Abraxis544100使用方法
- 通用描述AbraMag DNA大小选择磁珠设计用于从剪切的DNA或类似样本中纯化出所需大小的DNA片段,用于下游应用,如 作为排序。碎片被可逆地结合在顺磁性粒子上,而剩余的引物、盐、酶和在反应中留下的游离核苷酸被冲走。这些珠子是为使用而设计的。 有磁选机架。
- 当使用核酸时,安全指南总是使用适当的防护设备(包括但不限于手套、实验室外套和安全玻璃)。 。有关进一步信息,请参阅安全数据表。
- 储存和稳定在交货时,存放在4°C,不要冻结磁珠溶液。不要在打印的过期日期后使用。
- Abramag DNA大小选择磁珠法使用一种简单、、基于磁性珠的方法从混合反应中纯化DNA片段,如下所示 gure
Figure 1. Schematic of the AbraMag® DNA Size Selection Magnetic Beads process.
- a.混合:将混合样品添加到已清洗的AbraMag磁珠中。
b.结合:在经过优化的缓冲器存在的情况下,具有理想大小的DNA片段与珠子结合。磁铁是用来 守住珠子。
.c.洗涤:底漆和/或其他不想要的试剂分两步洗掉
- 洗脱:然后将碎片洗脱并转移到一个新的管中。
.E.Downstr EAM应用:纯的,高质量的分离DNA片段可用于下游程序,如克隆和测序。
限制和预防措施样品表现的时候,在分子生物学级水或Tris/TE溶液之前,尺寸选择。如果需要一个简单的pcr清理(>100 bp),而不是大小se(>100 bp)。 使用Abramag聚合酶链反应清洁磁珠(PN 555030(5 ML),555035(60 ML),555040(450 ML)。
工作指令
A.提供的材料AbraMag DNA大小选择磁珠溶液
B.所需的额外材料和设备(不包括在产品中)
1.剪切DNA或其他样本
2.实验室级水
3.新制备的70%乙醇
4.分子级TE缓冲液pH 8.0(10 mm Tris,1mm EDTA pH 8.0)
5.一次性手套和其他防护设备
6.带一次性塑料过滤屏障的微型吸管
7.1.5mL无菌无核酸微离心管
8.4°C制冷机
9.磁性微离心管分离器,Solo(PN 472270),Multi-6(Pn 472260),微滴板侧拉(Pn 472235)或底拉(Pn 472236)或类似设备
10. Vortexer
C.为所需尺寸选择珠比
通过改变Abramag DNA大小选择磁珠与起始样品体积的比值,可以控制有利于50~400 bp的DNA片段的截留。图2 下面是凝胶电泳分析的大小选择根据增加的比率。例如,检查表1的比率。
图2.DNA梯状电泳的2%琼脂糖凝胶电泳显示珠液与样品比对片段大小排除的影响。100伏25分钟。
表1.示例珠比和由此产生的大小选择使用50公分的起始样本。
D.程序
将样品转移到1.5mL微离心管中进行纯化。用实验室级水将样品稀释至少50升.注意:要使用更大容量的开始样本,只需乘以 按预期比率计算(第6.C节)。例:100升样品x1.5=使用第6.D.2节中150升的珠子溶液。注:可以节省少量的起始产品用于凝胶分析。见第7.B节。
用~1秒脉冲旋转AbraMag DNA大小选择磁珠。确保解决方案*重新暂停。检查第6.C节以确定使用烟草的珠子溶液的数量 将珠子添加到所需的比例并添加到样品中。吸管上下混合。建议尝试与所需大小选择接近的比率范围,以便选择 模仿片段大小选择。
将样品/珠子混合物在室温下孵育5分钟。
将样品放在磁选机上,直到溶液清澈(~1分钟)。将管子留在分离器上,吸走并丢弃上清液,而不干扰有盖特的珠子。 对着磁铁。5.将管子放在分离器上,轻轻地加入200升新鲜配制的70%乙醇,而不将珠子从管子的侧面移开。坐30秒。吸出 把上清液扔掉。
6.重复步骤5进行第二次清洗。小心去除所有可吸入乙醇。
7.将管子从磁选机上取出,在室温下离开约3分钟,打开盖子,*蒸发任何残留的乙醇。
8.在样品中加入40升TE缓冲液、pH8.0或实验室级水。吸管上下混合。室温下孵育2-3分钟。将管子送回磁选机1米 降落伞。将试管留在分离器上,用吸管将洗脱液转移到新的微离心管中。洗脱液中含有大小选定的DNA片段。
7分析结果
A.产品回收可以使用带插层染料的荧光计、凝胶电泳分析和/或分光度计来确定。
确定凝胶电泳法可用于评价大小选择的效果,并可用于检查比例的优化。使用琼脂糖或凝胶,运行洗脱样本。 在科收回
D.8与分子量阶梯相比较,确保选择了所需的片段大小。
AbraMag ®磁珠超顺磁性,非聚集的铁氧化物颗粒(或“微球”),用于样品制备,或用于捕获/纯化(SPRI ™:固相可逆固定)靶例如蛋白质,抗体, DNA / RNA(直接,或通过ChIP,RIP或CLIP),外泌体和大肠杆菌。AbraMag的设计可在手动和自动生物医学和研究应用中实现更快的结合动力学,高灵敏度和选择性。
比主要竞争对手更高的产量,纯度,质量和价值。
● 多重优势 – 超过传统方法(色谱柱,离心)。
● 的性能 – 我们设计它们以匹配或超越竞争对手。
● 的容量和产量 – 高结合能力,可快速有效地进行目标纯化。
● 的纯度 – 稳定的预先封闭的颗粒即使是复杂的样品也能提供清洁的净化。
● 可定制 – 提供定制珠子和连接服务。
磁选机
反-E。大肠杆菌磁珠(IMS)
即用型磁珠,25 mg / ml(2.5%)
具有游离胺或羧基的磁性颗粒,可使用简单的步骤(提供)与您的抗体或其他配体偶联。
胺 – PN 544080(2 ml),PN 544081(5 ml)
羧基 – PN 544085(2 ml),PN 544086(5 ml)。
Protein A / Protein G Magnetic Beads,5 mg / ml
Protein A Magnetic Beads – PN 544030(2 ml),PN 544031(5 ml)
蛋白A磁珠纯化试剂盒 – PN 555000(20个样品)
蛋白G磁珠 – PN 544040(2 ml),PN 544041(5 ml)
蛋白G磁珠纯化试剂盒 – PN 555010(20个样品)
抗IgG磁珠,5 mg / ml
抗小鼠IgG磁珠 – PN 544020(4 ml),PN 544021(20 ml)
抗兔IgG磁珠 – PN 544010(4 ml), PN 544011(20 ml)
抗人IgG磁珠 – PN 544060(4 ml),PN 544061(20 ml)
Streptavidin / Biotin Magnetic Beads,5 mg / ml
Streptavidin Magnetic Beads – PN 544050(2 ml),PN 544051(5 ml)
生物素磁珠 – PN 544000(2 ml),PN 544001(5 ml)
DNA / RNA纯化磁珠
新 DNA尺寸选择/ PCR纯化磁珠
AbraMag ® DNA尺寸选择和PCR纯化磁珠被设计成净化所需大小的DNA片段。
●为了替代AMPure ® XP / SPRIselect ®和血清弹匣 ™ Speedbeads ™的性能相当,但更好的价值(参见比较数据)。
●去除污染物:引物,引物二聚体,dNTP,盐等。
●尺寸截止范围> 50至> 800 bp(尺寸选择)或> 100bp(PCR纯化)
●处理时间短:无离心或过滤
●管或微孔板格式
●适合手动或自动过程
DNA大小选择Magnetic Beads PN 544100(5 ml),544103(60 ml),544106(450 ml)
PCR Clean-Up Magnetic Beads PN 555030(5 ml),555035( 60 ml),555040(450 ml)
DNA纯化磁珠,12毫克/毫升
AbraMag ® DNA纯化磁珠结合在高容量DNA(基因组,质粒等)。将它们插入您当前的磁珠DNA纯化方案中,以获得更高的产量,纯度和价值。珠子的表现始终优于竞争对手的珠子(参见比较数据)。
PN 544090(1ml)
基因组DNA纯化试剂盒,磁珠
的AbraMag ®基因组DNA磁性纯化试剂盒被设计为从不同的生物样品纯化的基因组DNA,得到DNA的高收率和低RNA,蛋白质,核酸酶,和其它细胞污染物。
PN 555020(100个样本)
mRNA纯化磁珠,为5mg / ml的
AbraMag ® mRNA纯化磁珠加上寡(dT)25,在高容量结合多聚腺苷酸化的mRNA和mRNA的洗脱基本上不含核糖体RNA。将珠子插入您当前的磁珠mRNA纯化方案中,以获得更高的产量,纯度和价值。
PN 544075(2ml)
mRNA纯化试剂盒,磁珠
的AbraMag ® mRNA的磁性纯化试剂盒被设计为从总RNA纯化的mRNA,使多聚腺苷酸化的信使RNA的高产量,同时留下核糖体RNA(rRNA基因)和其他RNA后面。
PN 555025(10个样本)
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