PNA BIO INC致力于为基础研究和应用领域的实验室提供的研究产品和服务。
PNA Bio提供PNA（Peptide Nucleic Acid）产品，包括定制寡核苷酸，FISH探针，miRNA抑制剂，PNA钳夹探针和Fmoc单体。HPLC纯化后，它们与MS / MS数据一起提供> 95％的纯度。PNA产品由Panagene制造。
PNA Bio还提供工程化核酸酶服务，包括CRISPR / Cas9核酸酶（RGEN）合成，验证和Cas9蛋白以及敲除和敲入细胞系服务。
Cas9 Protein with NLS
含有NLS的Cas9蛋白
Cas9蛋白与指导RNA复合，为CRISPR / Cas9技术提供了优于质粒或mRNA转染的益处。大的好处是，您可以制备准备在体内工作的RNP复合物。Cas9蛋白寿命短（细胞半衰期约为24小时），因此可以大限度地减少脱靶效应和镶嵌现象。您还可以通过简单的切割试验轻松测试体外指导RNA的活性。此外，Cas9蛋白非常稳定，与mRNA相比，活性确认更容易。后，它在更广泛的生物体中是活跃的，例如线虫，昆虫，植物和非典型的模型系统，因为它不需要转录或翻译。
由PNA Bio提供的Cas9蛋白与NLS缀合，并且它是注射/转染准备形式。
Cy3-Cas9可以很容易地富集用CRISPR / Cas9复合物转染的细胞。
体外切割测定
将PCR产物与不同量的Cas9蛋白一起温育并在凝胶上运行。体外切割测定是检查sgRNA活性的简单方法。
转染RNP复合物
通过电穿孔（Neon）或脂质转染胺（LF2000）将sgRNA和不同量Cas9蛋白的RNP复合物转染到NIH3T3细胞中。
注射RNP复合物
对于小鼠胚胎注射，将60ng / ul Cas9蛋白的RNP复合物和两种sgRNA各15ng / ul注射到小鼠胚胎中。从幼仔准备尾部DNA并进行T7E1测定.Grey代表WT，绿色代表大的缺失（＃2,3,4,8），红色代表小/ del（＃5,6,7），蓝色代表纯合子小/ in（＃9,10）。
Cas9蛋白
· 来自化脓性链球菌的 Cas9蛋白与NLS
· 注射，转染准备好
· 通过体外切割测定，电穿孔（作为RNP复合物）和
每批次的小鼠胚胎注射验证活性
· 标准浓度（CP01，重组至1 mg / ml）：20 ug，50 ug或200 ug（50 ug x 4）
· 高浓度（CP02和CP03，重组至5 mg / ml）：250 ug（CP02）或1 mg（CP03,250 ug x 4）
· 包装：CP01为20 ug或50 ug，CP02 / CP03为250 ug
· 建议使用CP01进行显微注射，建议使用CP02 / CP03进行电穿孔
· 也可用：D10A Nickase（CN01）和D10A / H840A dCas9（CD01）蛋白
液体形式的Cas9蛋白
· 可用1 mg / ml或5 mg / ml
· CP04-100：1mg / ml（6μM），20μg×5管
· CP04-500：5mg / ml（30μM），100μg×5管
Nickase和dCas9蛋白
· D10A Cas9 Nickase蛋白与来自化脓性链球菌的 NLS （CN01和CN02）
· D10A / H840A Cas9裂解死蛋白与来自化脓性链球菌的 NLS （CD01和CD02）
· 以50μg大小提供，重构为1mg / ml（CN01 / CD01）或250μg大小，重构为5mg / ml（CN02 / CD02）。
Cy3-Cas9和Cy3-dCas9蛋白
· Cy3标记Cas9蛋白与NLS（CP06），以实现转染细胞的分选和可视化
· 通过共聚焦显微镜检测荧光
· 通过体外切割测定和细胞转染确认活性
· 可提供浓度为5 mg / ml的50 ug（CP06-50）或200 ug（CP06-200）
· 还可获得Cy3标记的dCas9蛋白（CD07）
通过电穿孔进入细胞，然后进行T7E1测定，证实Cy3-Cas9蛋白的活性。通过共聚焦显微镜确认荧光。
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产品 |
描述 |
可用尺寸 |
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CP01 |
含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; |
20微克（120 pmol / 6 uM x 20 ul） |
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CP02 |
含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; |
250微克（1530 pmol / 30 uM x 50 ul） |
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CP03 |
含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; |
1毫克（250微克x 4） |
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CP04-100 |
含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; |
100微克（20微克x 5） |
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CP04-500 |
含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; |
500微克（100微克x 5） |
|
CN01切口 |
用NLS准备Cas9 D10A Nickase蛋白质; 重组至1 mg / ml（6 uM） |
50微克 |
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CN02切口 |
用NLS准备Cas9 D10A Nickase蛋白质; 重组至5 mg / ml（30 uM） |
250微克 |
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CD01 |
含有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; |
50微克 |
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CD02 |
含有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; |
250微克 |
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CP06 |
Cy3标记的Cas9蛋白与NLS; |
50微克 |
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CD07 |
Cy3标记的Cas9死蛋白与NLS; |
50微克 |
Pnabio 部分产品列表
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货号 |
品名 |
规格 |
品牌 |
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CP01-20 |
Reconstitutes to 1 mg/ml, 120 pmol (6 uM x 20 ul) |
20 ug |
pnabio |
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CP01-50 |
Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul) |
50 ug |
pnabio |
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CP01-200 |
Reconstitutes to 1 mg/ml, 1200 pmol (6 uM x 200 ul) |
200 ug (50 ug x 4) |
pnabio |
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CP02 |
Reconstitutes to 5 mg/ml, 1530 pmol (30 uM x 50 ul) |
250 ug |
pnabio |
|
CP03 |
Reconstitutes to 5 mg/ml, 6000 pmol (30 uM x 50 ul x 4 tubes) |
1 mg (250 ug x 4) |
pnabio |
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CP04-100 |
Liquid form 1 mg/ml, 600 pmol (6 uM x 20 ul x 5 tubes) |
100 ug (20 ug x 5) |
pnabio |
|
CP04-500 |
Liquid form 5 mg/ml, 3000 pmol (30 uM x 20 ul x 5 tubes) |
500 ug (100 ug x 5) |
pnabio |
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CN01 |
Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul) |
50 ug |
pnabio |
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CN02 |
Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul) |
250 ug |
pnabio |
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CD01 |
Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul) |
50 ug |
pnabio |
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CD02 |
Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul) |
250 ug |
pnabio |
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F1001 |
C-rich telomere probe, FAM labeled |
5 nmole |
pnabio |
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F1002 |
C-rich telomere probe, Cy3 labeled |
5 nmole |
pnabio |
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F1003 |
C-rich telomere probe, Cy5 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1004 |
C-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1005 |
G-rich telomere probe, FAM labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1006 |
G-rich telomere probe, Cy3 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1007 |
G-rich telomere probe, Cy5 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1008 |
G-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1009 |
C-rich telomere probe, FITC labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1010 |
G-rich telomere probe, FITC labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1013 |
C-rich telomere probe, Alexa Fluor 647 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1014 |
G-rich telomere probe, Alexa Fluor 647 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F1020 |
TelC probe for arthropods, Alexa Fluor 488 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F2001 |
C-rich telomere probe, Biotin labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F3001 |
Centromere probe, FAM labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F3002 |
Centromere probe, Cy3 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F3005 |
Centromere probe, Cy5 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F3004 |
Centromere probe, Alexa Fluor 488 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F3008 |
Centromere probe, Biotin labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F3003 |
Centromere probe, Cy3 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F3006 |
Centromere probe, FAM labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
F5001 |
CAG repeats, Cy3 labeled |
5 nmole |
pnabio |
|
G2001-3 |
A set of 4 PNA oligos against human globin, |
3 nmole |
pnabio |
|
G2001-10 |
A set of 4 PNA oligos against human globin |
10 nmole |
pnabio |
|
MP01-25 |
ggcaagtgttcttcgga |
25 nmole |
pnabio |
|
MP01-50 |
ggcaagtgttcttcgga |
50 nmole |
pnabio |
|
PP01-25 |
ggctcaaccctggacag |
25 nmole |
pnabio |
|
PP01-50 |
ggctcaaccctggacag |
50 nmole |
pnabio |
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RV01 |
Surrogate reporter vector with GFP for FACS |
5 ug |
pnabio |
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RV02 |
Surrogate reporter vector with GFP and H2KK for MACS |
5 ug |
pnabio |
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RV03 |
Surrogate reporter vector with GFP and Hygromycin-R |
5 ug |
pnabio |
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CV01 |
Cas9 co-transfection vector (CMV promoter) |
5 ug |
pnabio |
|
CV02 |
Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (CMV promoter) |
5 ug |
pnabio |
|
CV03 |
Cas9, RFP, puromycin R expression vector (CMV promoter) |
5 ug |
pnabio |
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CV11 |
Cas9 co-expression vector (EF1a promoter) |
5 ug |
pnabio |
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CV12 |
Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (EF1a promoter) |
5 ug |
pnabio |
|
CV13 |
Cas9, RFP, and Puromycin R expression vector (EF1a promoter) |
5 ug |
pnabio |
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