残留DNA提取试剂盒(碘化纳法)
残留DNA提取试剂盒遵照中国药典记载的碘化纳法,适用于疫苗和治疗用生物制品所含宿主细胞残余DNA的提 取。
残留DNA提取试剂盒可以提取样品中含有的极微量的DNA,回收率较高。
DNA的提取操作时间为60-90 min。
提取的DNA可以通过qPCR进行定量。
◆特点
● 遵照中国药典登载的碘化纳法
● 高回收率
● 单管操作(无需换管) ,耗时仅60-90 min
● 不需要苯酚和氯方等有机溶剂
● 兼容多种DNA *1 为使DNA检测方法与标准保持同步,中国药典(The Chinese Pharmacopoeia)宣布建立残留细胞 *1 DNA检测国家标准。碘化纳法将作为残留DNA提取方法,被新增至2020版的中国药典中。
◆原理 1. 使样品中的蛋白质和脂质溶于碘化纳和N-月桂基肌氨酸钠; 2. 异丙醇与糖原选择性地共沉淀DNA。
◆使用方法
方法1
应用实例 DNA spiking test(加标回收实验)
DNA Extractor™ Kit可以高产量提取残留DNA,甚至少量残留DNA。
上海金畔生物Ivy Fine Chemicals B48202现货
货号 | 品名 | 规格 | 品牌 |
B48202 | 100L Glycogen Solution;1 mL Detergent Combo Solution;25 mL Sodium Iodide Solution;30 mLWashing Buffer (No Ethanol)DNA提取器试剂盒 | kit | Ivy Fine Chemicals |
Ivy Fine Chemicals Corporation,
目录号B48202,50 次浸提,
4 ℃ 下可稳定储存 2 年
仅供实验室使用
溶液制备:
q 向清洗缓冲液中加入 70 mL 乙醇,
q 向碘化纳溶液中加入 50 L 糖原
q 向清洗缓冲液中加入 2 L 糖原
DNA 提取程序:
q 向 2 mL 微量离心管中加入 500 L 各样品或稀释液
q 向各试管中加入 20 L 清洁剂组合溶液,并轻轻涡旋
- 选项:如果高浓度的蛋白质干扰 DNA 提取和随后的 DNA 分析,每个样品用 20 L 蛋白酶 K (10 mg/mL) 在 60 C 消化 20 min,然后在 95 C 灭活酶 5 min
q 向各微量离心管中加入 500 L 碘化纳溶液,轻轻涡旋
q 在 50 ℃ 下孵育 10 min
q 加入 900 L 异丙醇并涡旋。
q 室温下孵育 30 min
q 以 12000 rpm 离心 15 min
q 轻轻倒出或吸取上清液
q 加入 1.8 mL 洗涤缓冲液(含乙醇)并涡旋
q 以 12000 rpm 离心 10 min
q 轻轻倒出或吸取上清液
q 风干 DNA
q 加入 20-60 L 水,轻轻涡旋溶解 DNA
q 纯化的 DNA 可通过 PCR、real time PCR、限制性内切酶切、DNA 测序、Picogreen 荧光染色进行分析
流程图: