Avidity Avitag™ 用酶对Avitag 进行体外生物素化

 

Avidity Avitag™ 技术

Avidity 开发和销售用于连接分子的分子亲和工具。我们的 AviTag™ 技术使用来自大肠杆菌的生物素连接酶 (BirA) 在*的 15 个氨基酸肽标签上采用高度靶向的酶促偶联单一生物素。AviTag™ 序列是 GLNDIFEAQKIEWHE。面向链霉亲和素包被的表面,这为分子结合相互作用创造了理想的展示。Avidity 的 AviTag 技术的科学优势已经引起人们的注意。目前,AviTag 技术被制药公司使用,并被 30 多个国家的研究人员使用。

Avidity Avitag™ 技术-酶对 Avitag 进行体外生物素化

 

BIOTIN PROTIEN LIGASE
生物素-蛋白连接酶(EC 6.3.4.15)激活的生物素以形成生物素5'腺苷酸并且将生物素与生物素接受性的蛋白质。它还充当生物素操纵子阻遏物。该蛋白质由 birA 基因编码。

这种酶的其他名称包括:生物素连接酶;生物素操纵子阻遏蛋白;比拉; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶。

Avidity 销售纯化生物素连接酶

BirA 500 40ug 生物素连接酶 1 mg/ml

散装 BirA 300ug 生物素连接酶 3 mg/ml

联系 Avidity (877.333.6063) 获取更大订单生物素连接酶的报价。

Avitag'd 蛋白的体外标记方案: 在细菌提取物中
纯化 在哺乳动物提取物中 在细胞表面上 在 MHC 四聚体上

 

BirA500 – BirA500:BirA 生物素-蛋白质连接酶标准反应试剂盒,250.00 美元

 

 

BirA 生物素蛋白连接酶 (EC 6.3.4.15) 激活生物素以形成生物素 5'-腺苷酸,并将生物素转移到生物素接受蛋白(如 AviTag™ 肽)。它还充当生物素操纵子阻遏物。该蛋白质由 birA 基因编码。

请注意:我们强烈建议使用 AviTag™ 氨基酸序列而不是其他生物素化肽序列。BirA 酶以 2 倍于天然底物 (BCCP) 的反应速率对 AviTag™ 序列进行生物素化,并且与使用的其他肽序列相比,反应速率高出一个数量级或更多。与其他肽生物素化序列相比,AviTag™ 需要更少量的酶和更短的孵育时间,从而最大限度地减少与蛋白酶和蛋白质不稳定性相关的辅助问题。

 

 

产品信息

套件随附以下物品:

  • 两 (2) 瓶 20uL,每瓶 1mg/mL BirA 生物素-蛋白质连接酶(总共 40ug)
  • 两 (2) 个小瓶,每瓶 1.5mL BiomixA(0.5M 双辛缓冲溶液,pH 8.3)
  • 两 (2) 个小瓶,每瓶 1.5mL BiomixB(100mM ATP、100mM Mg(OAc)2、500uM d-生物素)
  • 两 (2) 个 1.5mL 小瓶,每个额外的 BIO-200(500uM d-生物素)

BirA 生物素-蛋白质连接酶 (EC 6.3.4.15) 通过 ATP 中间体(生物素 5'-腺苷酸)以高效且有针对性的方式将 d-生物素与生物素受体肽/蛋白质共价添加。酶促生物素化蛋白质的下游应用是多种多样的、重要的和强大的。生物素-亲和素/链霉亲和素相互作用经常被用于亲和层析或蛋白质固定在表面或底物上。通过抗生物素抗体或亲和素/链霉亲和素-报告酶偶联物(-HRP、-碱性磷酸酶)或荧光探针进行蛋白质检测成为可能。生物素化 MHC 分子的多聚体形式是免疫生物学中的常用工具。

当与我们的 AviTag™ 生物素受体肽氨基酸序列结合使用时,生物素化发生的速度是天然大肠杆菌 BCCP 底物的两倍,与其他肽序列的生物素化相比,其发生率高出一个数量级或更多。因此,与其他可用序列相比,AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育时间来完成生物素化。如果蛋白质不稳定性或蛋白酶活性是一个问题,这可能对下游的成功很重要。

我们的 BirA 酶是大肠杆菌野生型,由 birA 基因编码,并通过传统方法纯化至 99% 以上的纯度。这种酶的其他名称包括:生物素连接酶;生物素操纵子阻遏蛋白;比拉; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶;生物素-[乙酰辅酶A-羧化酶]连接酶;生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶;乙酰辅酶A全羧化酶合成酶;乙酰辅酶A全羧化酶合成酶;生物素:脱羧酶连接酶;生物素全酶合成酶;HCS。