ubiquigent 60-0001-010说明书
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Ubiquitin [untagged]泛素[未标记]60-0001-01010 mg£250
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物种牛的
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来源红细胞
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数量10毫克
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贮存4°摄氏度
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公式粉末(从溶解在水中的蛋白质冻干);根据需要补水
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分子量〜8.6 kDa
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稳定在4°C冻干1年;-20°C复水6个月;根据需要等分
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蛋白质序列登记号:P62990.1。有关完整蛋白质序列的信息,请下载分析证书pdf。
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质量检查;活动E2-泛素硫酯负载试验:泛素的活性通过经由转硫基化反应将泛素加载到UBE2N E2酶的活性半胱氨酸上来验证。在T 0和T 10分钟这两个时间点比较了在30°C ATP存在下泛素,UBE1和UBE2N酶的孵育。确认了遍在蛋白/ UBE2N硫酯键对还原剂DTT的敏感性。
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泛素是高度保守的蛋白质,在泛素化途径中起关键作用。泛素仅在真核生物中发现,遍历整个序列均显示出很强的序列保守性(Wilkinson,1995)。遍在蛋白存在于所有细胞类型中,以游离形式存在,或通过其C端甘氨酸和ε之间的共价键与蛋白缀合-赖氨酸残基的氨基;被称为泛素化或泛素化的过程。泛素化是一种受多酶级联影响的重要细胞过程,该级联涉及三类酶,称为激活酶(E1s),结合酶(E2s)和蛋白质连接酶(E3s)。E1以ATP依赖的方式激活泛素,导致在泛素的羧基末端和E1酶之间形成硫酯键。然后在泛素的羧基末端和E2以及(在某些情况下)E3酶的特定半胱氨酸之间产生顺序的,瞬态的硫酯键(Bonifacino和Weissman,1998)。终,在泛素的甘氨酸羧基末端和ε之间形成一个异肽键-靶蛋白上的赖氨酸残基的氨基(单-泛素化)或另一泛素上的赖氨酸残基的氨基,导致泛素链的产生(多泛素化),其可以是Lys-6,Lys-11,Lys-27,Lys- 29,Lys-33,Lys-48或Lys-63连锁(Komander,2009)。泛素链本质上也可以是线性的,是通过一个泛素部分的活化甘氨酸残基与α缀合形成的-另一个泛素N末端的N-氨基。特定的泛素链类型采用不同的构象,这在其功能方面可能很重要。尽管已经确定了某些链类型的某些功能,但其中许多结构的作用仍有待充分阐明(Komander,2009)。关于Lys-48和Lys-63链的类型,已经确定了一些关键作用:Lys-48连接链将底物导向26S蛋白酶体介导的降解(Verma等,2004),而Lys-63连接链的作用包括的NF-的激活κB途径和DNA修复途径的步骤的介导(DiFiglia等,1997; Rahighi等,2009; Tokunaga等,2009)。有趣的是,构成多种类型的病理性包涵体的蛋白质可能被多泛素化,但是它们可能具有抗降解性。例如,多泛素化亨廷顿蛋白聚集在亨廷顿氏病患者的纹状体和皮层的神经元核内包涵体(NII)和营养不良的神经突上(DiFiglia 等,1997)。
参考:
Bonifacino JS,Weissman AM(1998)泛素和分泌和内吞途径中蛋白质命运的控制。Annu Rev Cell Dev Biol 14,19-57。
DiFiglia M,Sapp E,Chase KO,Davies SW,Bates GP,Vonsattel JP,Aronin N(1997)脑中神经元核内包涵体和营养不良性神经突的亨廷顿蛋白聚集。科学277,1990-3。
Komander D(2009)蛋白质泛素化的新兴复杂性。Biochem Soc Trans 37,937-53。
Rahighi S,池田F等人。(2009)NEMO对线性泛素链的特异性识别对于NF-κB激活很重要。细胞136,1098-109。
Tokunaga F,Sakata S等人。(2009)NEMO的线性多泛素化在NF-κB激活中的参与。Nat Cell Biol 11,123-32。
Verma R,Oania R,Graumann J,Deshaies RJ(2004)泛素链受体定义了泛素-蛋白酶体系统中的底物选择性层。电池118,第99-110页。
Wilkinson KD(1995)泛素化在蛋白水解和细胞调节中的作用。Ann Nu Rev Nutr 15,161-89。