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oLAB (Anti-Oxidized LDL Autoantibodies) ELISA | BI-20032

 oLAB（抗氧化的LDL自身抗体）ELISA | BI-20032

 抗氧化的LDL自身抗体ELISA（oLAB）亮点：

  • 样本量小
  • 总孵育时间仅2小时15分钟
  • 包含2个控件
  • CE标记–在欧盟用于IVD

 

分析特征

  • 方法

    间接ELISA，HRP / TMB，12×8孔可分离试纸

  • 样品类型

    血清

  • 样品量

    50微升/孔

  • 测定时间

    1.5小时/ 30分钟/ 15分钟

  • 灵敏度

    48毫升/毫升

  • 标准范围

    0 – 1,200 mU / ml

  • 特异性

    抗氧化的LDL自身抗体

  •  

    中间运行（n = 5）：≤8％CV

    批量分析（n = 8）：≤4％CV

  • 采用

    CE标记–在欧盟用于IVD

产品详情

 

抗氧化的LDL自身抗体产品概述

抗氧化LDL自身抗体（oLAB）免疫分析是2小时15分钟的96孔间接ELISA，用于定量测定血清中的抗氧化LDL自身抗体。

抗氧化的LDL自身抗体的测定原理

抗oxldl抗体ELISA试剂盒是一种间接酶免疫法，用于定量测定血清样品中的抗氧化LDL自身抗体。

一步，将预先稀释的标准品/对照品/样品移入微量滴定条的孔中，并预先用氧化的LDL抗原包被。标准品/对照/样品中存在的抗氧化LDL自身抗体与孔中预包被的抗原结合。在去除所有非特异性未结合物质的洗涤步骤之后，将缀合物（单克隆抗人IgG-HRP）移入孔中，并与抗氧化的LDL自身抗体发生反应。
在另一个洗涤步骤之后，将底物（TMB，四甲基联苯胺）吸移到孔中。底物的酶催化颜色变化与样品中存在的抗氧化LDL自身抗体的数量成正比。使用标准酶标仪可以检测到这种颜色变化。直接从剂量响应曲线确定样品中抗氧化的LDL自身抗体的浓度。

抗氧化的LDL自身抗体典型标准曲线

下图显示了oxldl分析试剂盒的典型标准曲线。 

抗氧化的LDL自身抗体ELISA试剂盒组件     

内容

描述

数量

盘子

条带固定器中氧化的LDL预涂层微量滴定条，包装在带干燥剂的铝袋中

12 x 8测试

膨胀

未经涂层的微量滴定板，用于样品预处理

12 x 8孔

洗车场

浓缩洗涤缓冲液20倍，自然盖

1 x 50毫升

性病

标准1-6（0; 0.62; 1.25; 2.5; 5; 10μg/ ml），抗氧化LDL IgG抗体，白色帽盖，可以使用

6 x 500微升

CTRL键

对照品A和B，黄色瓶盖，准备使用，浓度请参见标签

2 x 500微升

ASYBUF

分析缓冲液，红色盖帽，准备使用

1 x 60毫升

康杰

结合物（单克隆抗人IgG-HRP），琥珀色帽，可以使用

1 x 13毫升

潜艇

基材（TMB解决方案），蓝盖，可以使用

1 x 13毫升

停

停止溶液，盖上白帽，准备使用

1 x 7毫升

 

储存说明： oLAB ELISA试剂盒中的所有试剂在4°C（2-8°C）的温度下均稳定，直到每种试剂标签上标明的有效期为止。

 

 

样品收集与储存

血清适合用于此oxldl分析试剂盒。我们建议对所有样品，标准品和质控品进行重复测量。列出的样品收集和储存条件旨在作为一般准则。

血清

在标准化的血清分离管（SST）中收集静脉血样。让样品在室温下凝结30分钟。根据试管制造商的使用说明离心分离。立即测定采集的样品，或等分试样并保存在-25°C或更低的温度下。脂血或溶血的样品可能会产生错误的结果。样品解冻不要超过四次。

试剂准备

洗涤缓冲液

1。

使WASHBUF浓缩液达到室温。缓冲液浓缩物中的晶体将在室温（18-26°C）下溶解。

2。

将WASHBUF浓缩液按1:20的比例稀释，例如50 ml WASHBUF + 950 ml蒸馏水或去离子水。进行测定时仅使用稀释的WASHBUF。

稀释的WASHBUF在4°C（2-8°C）下可以稳定长达一个月。 

样品制备

将样品置于室温并轻轻混合样品，以确保样品均匀。我们建议对所有样品进行重复测量。

抗氧化的LDL自身抗体测定方案

在开始测定之前，请阅读整个方案。

1。

使样品和试剂达到室温（18-24°C）。

2。

在协议表上标记STD / CTRL / SAMPLE（标准/对照/样品）的位置。

在预稀释板中

注意：所有STD / CTRL / SAMPLE（标准品/对照品/样品）都必须以1:55的终稀释度使用（预稀释度1：5 +稀释度1:11）。将随附的DILPLATE（未涂布的微量滴定板）用于1：5的预稀释步骤。

1。

移液200 µl ASYBUF（测定缓冲液）到未包被的微量滴定板的适当孔中。。

2。

将50 µl STD / CTRL / SAMPLE（标准品/对照品/样品）加入各自的孔中，混合均匀（= 1：5稀释）。

注意：预稀释的物质必须在15分钟内用于测定。

 

在预涂板中

1。

从铝袋中取出微量滴定条。将未使用的干燥剂带在4°C的铝袋中存放。胶条在标签上标明的有效期限之前都是稳定的。

2。

移取200 µl ASYBUF（测定缓冲液，红色盖帽）到每个孔中，包括空白。

3。

将20 µl 1：5的STD / CTRL / SAMPLE稀释液分别加入各孔中。轻轻旋转。

注意：必须在15分钟内完成将预稀释的STD / CTRL / SAMPLE转移到预涂的微量滴定条中。使用多通道移液器。

4。

盖紧板并在37°C下孵育1.5小时。

5，

用300 µl稀释的WASHBUF（洗涤缓冲液）吸取并洗涤孔4次。后一次洗涤后，用一块毛巾强力拍打板将剩余的WASHBUF取出。

6。

除空白外，向每个孔中加入100 µl CONJ（结合物，琥珀色帽）。

7。

盖紧并在室温（18-24°C）下孵育30分钟。

8。

抽吸并用300 µl稀释的WASHBUF洗涤孔4次。后一次洗涤后，用一块纸巾强力拍打板，以清除残留的WASHBUF。

9。

在每个孔中加入100 µl SUB（底物，蓝色盖）。

10。

在黑暗中于室温下孵育15分钟。

11。

在每个孔中加入50 µl STOP（终止溶液，白色盖）。轻轻旋转。
12

如果可用，立即在参考630 nm的450 nm处测量吸光度。

计算结果

从所有其他值中减去为空白获得的吸光度读数。使用能够生成四参数对数（4-PL）拟合的可商购软件从标准值构建标准曲线。或者，将标样在x轴上的浓度相对于每种标样在y轴上的平均吸光度作图，并通过图中的点绘制佳拟合曲线。除4-PL以外的曲线拟合算法尚未得到验证，用户需要对其进行评估。

从标准曲线获得样品浓度。光密度（OD）值超过标准范围高点的样品可以进一步稀释。计算样品的终浓度时，必须考虑使用1：5以外的样品稀释液。

套件随附的质量控制协议显示了每个套件终版本QC的结果。客户获得的光密度数据可能会受到各种影响，包括在整个保质期内正常降低信号强度。但是，只要浓度高的标准品的光密度为1.00或更高，并且CTRL的值在目标范围内（参见标签），这就不会影响结果的有效性

 

 

抗氧化的LDL自身抗体

氧化的低密度脂蛋白（oxLDL）被认为在动脉粥样硬化的发生和发展中起关键作用。oxLDL在巨噬细胞和平滑肌细胞中的积累会导致泡沫细胞形成，这是疾病的一步。可以将抗氧化修饰的LDL的自身抗体用作能始终反映体内发生的氧化过程的参数。实际上，已经在患有冠状动脉疾病的患者的血流中检测到针对oxLDL的自身抗体水平升高。此外，近的研究表明，针对oxLDL的自身抗体与颈动脉粥样硬化的进展之间存在相关性。在诸如先兆子痫和系统性红斑狼疮等各种疾病中，oLAB的血清浓度也有所增加。
oLAB的临床应用概述已经发布。

  • 心血管疾病

    • 动脉粥样硬化（Bornaun等人，2017; de Freitas等人，2018; Pawlak等人，2012; Shoji等人，2003; Stanek等人，2018）
    • 冠状动脉疾病（Faviou等，2005; Miller等，2003）
    • 心肌梗塞（Huang et al。，2013）
    • 中风（Ciancarelli et al。，2012）

  • 其他

    • 急性败血症（Al-Banna和Lehmann，2013年）
    • 先兆子痫（Arifin et al。，2017）