cosmobiousa GFK-PF201-0.25-EX说明书

PUREfrex 2.0

货号：

GFK-PF201-0.25-EX

$ 166.00

PUREfrex®  （由Gene Frontier Corporation制造）是一种大肠杆菌 重构的偶联转录/翻译系统，基于初由Ueda小组开发的PURE系统（Shimizu等，2001），后来商业化为PURESYSTEM®（Shimizu和Ueda， 2010年），由BioComber（日本东京）提供。PUREfrex®包含高度纯化的 大肠杆菌蛋白质，包括用于氨酰化，能量再生，转录和翻译的模块。与竞争的耦合转录/翻译系统相比，PUREfrex®的许多优点中包括降低的污染性蛋白酶，核酸酶和磷酸酶，β-半乳糖苷酶和LPS的水平。与基于细胞裂解物的系统相比，PUREfrex®的化学定义更加明确和模块化，可带来更高的产量，可重复性和灵活性。在未标记 PUREfrex®的蛋白质成分（与BioComber的PURESYSTEM®和New England Biolab的PURExpress®系统的六组氨酸标记成分相反）允许在目标蛋白质中添加任何所需的标签（包括His-tags），并随后通过快速简单地纯化一个固定的金属亲和色谱步骤。蛋白质产量可以达到600ng / ul。

PUREfrex®有两种形式：PUREfrex®2.0和PUREfrex®2.1。PUREfrex®2.1与PUREfrex®2.0相同，其附加功能使用户可以控制氧化还原条件。这对于需要特殊氧化还原条件以实现适当折叠，活性和溶解度的蛋白质很有用。此外，还提供补充产品来进一步增强适当的蛋白质折叠和二硫键形成（GroE Mix，DnaK Mix和DS Supplement  （将逐步淘汰并由Dsbc Set代替））。

通过利用Protein Express的 tRNA试剂的CloverDirect™系列进行定点蛋白质功能化，可以将PUREfrex®用于表达包含非天然氨基酸的  蛋白质。可用CloverDirect™UAG或CGGG氨酰基tRNA填充不同的非天然氨基酸，这些氨基酸赋予一系列功能，包括荧光标记，生物素标记，聚乙二醇化，化学交联和光调节。通过设计在用户定义位置具有UAG和/或CGGG密码子的蛋白质表达模板，可以实现特定非天然氨基酸的靶向掺入。

对于模板构建，我们建议使用Protein Express线性模板PCR试剂盒（有两种形式：仅His-tag或ProX-tag + His-tag）或Protein Express的表达质粒（pROX-FL92.1：ProX-tag + His-标签）或BioComber（pURE1-4：无标签）。ProX标签是特殊的N末端肽，设计用于掺入某些需要N末端定位（密码子9）和特定密码子背景（由AAC和TCT修饰）的大型非天然氨基酸。ProX标签的密码子9可以在UAG，CGGG或TTT（作为对照）之间变化。