expedeon 362-0030说明书
Lightning-Link® Rapid FluoProbes647H
快速FluoProbes647H抗体和蛋白质标记试剂盒
包 | 价钱 |
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多20ug时发生3个反应SKU:362-0030 | $ 329.00 |
1反应高达200ugSKU:362-0005 | $ 266.00 |
多200ug的3个反应SKU:362-0010 | $ 469.00 |
1反应高达2mgSKU:362-0015 | $ 801.00 |
所述Expedeon闪电链路®快速FluoProbes647H抗体标记试剂盒使抗体,蛋白质和肽,或任何其他生物分子与可用的胺基团的直接结合,与100%材料恢复FluoProbes647H。该试剂盒仅需30秒的动手时间,偶联物即可在20分钟内使用。该技术可从10ug扩展到1g甚至更大,并经过严格的质量控制测试,以确保始终如一的高质量和出色的批次间可重复性。
FluoProbes ® 647H是新一代的设计,标签生物分子荧光标记物之一。它在650nm处具有强吸收,在684nm处具有高荧光(消光系数2.5 x10 5 cm -1 M -1),并且量子产率高。
流式细胞术数据–快速FluoProbes647H
使用Expedeon RapidLightning-Link®试剂盒将小鼠抗人CD8与FluoProbes647H偶联。然后使用结合的抗体对人外周血淋巴细胞染色,然后用流式细胞仪进行分析。(蓝线–阴性对照;红线–阳性染色)。
如何轻松地偶联抗体
1.我应该使用哪个标签?
抗体标记的选择主要取决于应用程序:
免疫测定 | 标签 |
蛋白质印迹 |
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酶联免疫吸附 |
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免疫荧光 |
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免疫组织化学 |
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流式细胞仪 |
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请参阅此处的表格 , 了解Lightning-Link®荧光染料,蛋白质和tandems的吸收/发射波长。
2.Lightning-Link®和Lightning-Link®Rapid有什么区别?
我们的标准和快速 Lightning-Link® 试剂盒均可在整个过程中,通常在20到30秒的动手时间内生成结合物。但是,Lightning-Link®Rapid试剂盒的缀合和淬灭孵育时间较短,可以更快地生成缀合物。抗体的考虑与终偶联物的高质量*相同。
3.我可以使用Lightning-Link®标签什么?
Lightning-Link®技术的工作原理是将目标上的游离胺基作为目标。它可用于标记抗体,肽,蛋白质和任何其他具有游离胺基的分子。
有关标记抗体以外的分子的建议,请 联系我们的技术支持团队。
4.我的抗体需要多少纯度?
您的抗体必须纯化,因为其他带有游离胺基的分子会干扰反应,导致偶联物质量较差。
应该选择合适的纯化方法:
- 亲和纯化 –这是优选方法,因为它总是会产生仅包含目标抗体的纯化样品。
- 血清蛋白A或G的纯化 –这将产生血清中所有IgG的纯化样品。您将获得纯化的IgG馏分,但是该馏分中只有一小部分是目标IgG。尽管需要调整偶联物的稀释度,但该IgG馏分仍会用我们的试剂盒标记。
- 组织培养上清液或腹水的蛋白A或G纯化 –这种方法将产生与亲和纯化等效的纯化抗体。
其他纯化方法,例如离子交换色谱法和硫酸铵沉淀法,是低质量的纯化方法,应避免使用。使用0.2 / 0.22 µm过滤器进行过滤是一种灭菌而不是纯化的方法,因此不适用。
5.我的抗体是否在合适的缓冲液中?
有关建议的缓冲条件,请参见下表:
1 请注意,单独显示的浓度不应影响反应。但是,与不建议超过一定浓度的其他化合物结合使用,可能会影响反应。
2 如果打算将此试剂盒用于免疫组织化学,建议不要使用明胶或BSA。
6.如果我的抗体制剂不符合要求怎么办?
如果您的抗体需要纯化或缓冲液与我们的试剂盒不兼容,我们开发了 AbSelect™纯化试剂盒系列 ,可让您快速简单地纯化抗体,并且与Lightning-Link®试剂盒*兼容。
所使用的试剂盒取决于您的特定样品(种类,缓冲液,污染物,体积等)。我们设计了一个方便的流程图来帮助您选择工具包(在此处查看),但是 如果您需要进一步的指导,请查阅各个试剂盒规程,以查看适用于每个试剂盒的抗体量/量。
如果您的抗体已经纯化,但浓度明显低于1mg / ml,则可以使用我们的 抗体浓缩和清洁试剂盒进行浓缩。该试剂盒还可通过与试剂盒提供的缓冲液进行缓冲液交换来去除低分子量污染物,如叠氮化物,三羟甲基氨基甲烷或甘氨酸,该试剂盒与Lightning-Link®*兼容。
如果您的抗体包含BSA,则现在可以 通过几个简单的步骤使用我们的 BSA去除试剂盒来纯化抗体。请注意,该试剂盒还可使您浓缩抗体。
注意:所有AbSelect试剂盒只能与抗体一起使用。他们不会纯化其他分子。仅有的例外是浓缩和清除试剂盒(861-0010),该试剂盒可与大于10kD的其他分子一起使用。
7.是否需要清洗或脱盐步骤?
与传统的标记方法相比,Lightning-Link®技术的优点之一是不需要结合物纯化。Lightning-Link®反应非常高效,并且试剂盒已经过优化,因此,只要遵循操作规程,偶联结束时只剩下很少量的游离标签。试剂盒中提供的Quencher会将该剩余的游离标签带有其反应性“Lightning-Link®”基团,并在应用程序的洗涤步骤中将其洗去。
8.我的新共轭将稳定吗?
将Lightning-Link®混合物与抗体溶液溶解后,混合物中的专有化学物质将被激活。这导致抗体在接近中性的pH值下以柔和受控的方式与标记定向共价键合。缀合物的稳定性取决于您的抗体和选择的标记。
大多数Lightning-Link®共轭物可在4°C下未稀释的情况下多保存18个月。例外的是串联共轭物,其多可稳定3个月。