ACCUTASE 细胞消化液 AT104现货
细胞分离会影响体外培养细胞的表面蛋白和细胞表型,所以选择合适的细胞分离方法是至关重要的。我们分离贴壁细胞常用的方法是蛋白酶消化,如胰酶消化,但是在胰酶消化的过程中大部分表面蛋白和细胞外基质成分都会受损,而且过度酶解不仅会影响表面marker的分析,还会降低细胞活力,尤其是干细胞的活力。因此,出现了这款胰酶替代物——Accutase。
Accutase是一种含有蛋白水解和胶原溶解酶的细胞分离溶液,而且这些酶既不是哺乳动物也不是细菌衍生的,因此它是不含任何动物或细菌来源的,是胰蛋白酶-EDTA消化液的替代品,可以应用于多种干细胞的培养及消化传代、海马神经元原代培养、神经干细胞培养等。由于Accutase较为温和,分离后的细胞能保持完好的表面抗原,因此在分离细胞系以进行持续细胞培养、细胞表面标志物分析、病毒生长测定、细胞凋亡、细胞增殖和肿瘤细胞迁移测定方面非常有效。
与胰酶相比,具有以下优势:
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同时具备蛋白酶和溶胶原活性,适合大部分细胞的消化,应用范围更为广泛;
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消化更温和,不会破坏细胞表面抗原,能够维持细胞最大的活力;
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不需清洗或中和反应,加入培养基即可使Accutase酶失活,节省细胞传代时间
产品描述
Accutase是包含有蛋白水解酶和胶原酶活性的一种细胞消化液,是胰酶/EDTA消化液的替换产品,用于从常规组织培养器皿和粘附培养器皿中消化细胞。适用于组织解离和细胞分离,因分离后的细胞能保持完好的表面抗原,且不含任何动物或者细菌来源组分,可满足对后续如细胞表面标记、病毒生长分析、流式细胞分析以及生物反应器相关检测等多种实验的要求。
与传统的胰酶消化液相比,本品具有以下优势:
1)适用于绝大多数原代细胞和哺乳动物细胞系的消化,以及昆虫细胞;
2)温和有效的消化干细胞(hESCs和mESCs),冻存后细胞具更高复苏率;
3)几分钟内实现粘附细胞的分离,不需清洗或中和反应,节省细胞传代时间;
4)对细胞消化较为温和,能增加细胞产量和存活率;增强细胞贴壁效率;改善细胞形态和细胞生长特性等。
本品为即用型的无菌产品,溶于Dulbecco’s PBS(含0.5 mM EDTA和3 mg/L酚红),比活力≥200 u/mL,可直接用于细胞培养相关实验。
运输和保存方法
冰袋运输。收到后请于-20 ℃保存,有效期2年。2~8 ℃保存,有效期2个月。
注意事项
1)Accutase融化后4 ℃保存,至少2个月稳定。不可室温保存。也可分装成单次用量,放到-80℃冻存,至少6个月稳定。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)本产品仅作科研用途!
使用方法
1. 4 ℃或冰浴融解Accutase,之后进行分装保存。
【注】:不可37 ℃融化本品,否则会影响酶活。
2. 使用不含钙、镁的1×Dulbecco's PBS润洗细胞一次;
3. 以无菌操作的方式,按 75 cm2表面积加入10 mL的Accutase覆盖贴壁细胞;
4. 重新放入37 ℃培养箱内,消化5-10 min;
【注】:消化时间可自行调整。大部分细胞处于Accutase中高达1小时,对细胞状态无影响。
5. 消化结束后,轻轻敲击培养皿,使细胞与皿底部脱离,依照常规操作进行细胞计数和传代。
【注】:不需另做清洗和酶活终止步骤。