ComplementTech C3b说明书
ComplementTech成立于 2005 年,前身是Advanced Research 技术公司,ART公司成立于1993年,是一家有着20多年补体研发和生产经验的生物制品公司,为用户提供zui高质量的补体类产品及其它生物试剂产品。ComplementTech公司领导均是有数十年在科研机构从事补体领域研究的科学家,确保了公司产品的地位和优越品质。ComplementTech 致力于通过就补体试剂在补体领域以及其他相关科学领域的应用中的使用提供技术建议和专业知识来推进医学研究。
名称: iC3b
规格: 250 µg/vial
浓度: 1.0 mg/mL (实际浓度见分析证书)
类型 冷冻液体
纯度: >90%由SDS-PAGE
缓冲区: 10 mM磷酸钠,145 mM氯化钠,pH 7.2
消缺系数。 A280 nm在1.0 mg/mL时的=为1.03
分子量: 176000Da (3链)
防腐剂: 无,0.22µm过滤
存储: – 7 0oC或以下。避免冻融。
根源 正常人血清 (经认证的HBsAg和HCV、HIV1和HIV-II抗体检测 均为阴性) 。
预防措施 在处理人体血液制品时要采取常规的预防措施。
一般说明
iC3b (灭活的C3b) 来源于C3b。C3b向iC3b的转化几乎破坏了C3b上几乎所有的 功能结合位点。C3b本身是由所有三种补体途径(Law,S。K.A.和里德,K。B.M. (1995 ) ),当天然C3被裂解时,释放C3a。在因子H存在的因子下,因子I对C3b进行裂解制备 iC3b。当C3b在溶液中游离时,H和I的裂解迅速,当它附着在表面时,速度较慢。如果 C3b切割到iC3b,因子I的其他辅助因子也允许切割,这包括两个膜蛋白CR1 (CD35) 和 MCP (CD46) 。因子I可以在alpha链中的两个位置切割C3b,如果两个位点都被切割, 则释放一个小片段 (C3f,2000Da) 。如果C3b前体附着在一个表面上,iC3b就会留在 那个表面上。本公司销售的iC3b由流体相C3b制成,不能附着在表面上。表面结合的 C3b和iC3b通过共价键与目标相连,共价键可以是酯键,也可以是酰胺键。酯键是不稳 定的,导致粒子逐渐释放。在补体激活过程中产生的大多数C3b永远不会附着在表面上 ,因为它的硫酯与形成水的流体相C3b发生反应。表面结合的iC3b及其分解产物C3d被 淋巴细胞和吞噬细胞上的许多受体识别,这些受体利用这些配体刺激吞噬作用和抗原 呈递给适应性免疫系统的细胞。iC3b的受体分别是b细胞上的CR2 (CD21) 和吞噬细胞 上的CR3 (CD11b/CD18) (Dodds,A。W.和Sim,R。B.编辑 (1997) ;莫利,B。J.和沃 尔波特,M。J. (2000)).ic3b-受体相互作用的结果之一是靶标特异性b细胞和t细胞群 体的扩大。
物理特性和结构
分子量:17.6万道尔顿, 由三个二硫键连接链组成。人的iC3b呈糖基化状态 ( ~值为2.8%) 。C3b的阿尔法启动链被因子I切割,产生两个片段 (63000和39000Da) , 它们都与beta链 (75000Da) 相连,但没有变化。根据因子I可能存在一些异质性 (Morley,B。J.和沃尔波特,M。J. (2000) ;法律,S。K.A.和里德,K。B.M. ( 199 5) ;多兹,A。W.和Sim,R。B.
编辑 (1997) ;摩根,B.P。ed. (2000)).如果因子I分裂两次,C3f (2000Da) 被 释放,其链约为61000、39000和75000Da。iC3b的pI约为。5.7.
功能
正如它的名字所暗示的, “灭活的C3b“失去了C3b表达的大部分功能。C3b具 有因子B、因子P、因子H、因子I、C5、DAF (CD55) 、MCP (CD46) 和受体CR1的结合 位点,而iC3b经历了结构变化,破坏了许多这些位点(Gros,P.等。 (2008) ;多兹 ,A。W.和Sim,R。B.编辑 (1997) ;兰布里斯,J。D. (1988)).最关键的是,iC3b 不能结合因子B,因此不能参与补体激活。然而,iC3b仍然可以通过结合C5参与C5转 化酶的活性,它仍然可以结合正确蛋白,它已经获得了与CR3受体相互作用的能力, 这对吞噬和t细胞带t细胞反应的抗原呈递很重要(Ghannam A等。(2008)).
测定
目前还没有针对iC3b的功能检测方法。SDS凝胶用于确定蛋白质的链结构。
在体内
在补体激活过程中,C3b产生于C3的蛋白水解裂解。在侵袭性补体激活过程中 (在脓毒症和感染部位) 可能会形成高浓度的C3b,但大部分是液体期C3b。在血液中 ,因子H和I迅速裂解C3b形成iC3b。虽然iC3b对胰蛋白酶样酶非常敏感,但它在血浆 或血清中的寿命很长 (半衰期数小时) 。由于血浆中含有过量的蛋白酶抑制剂,因此 游离凝血酶、纤溶酶或其他活性蛋白酶很少,iC3b仍然是iC3b。然而,在血液中,人 类红细胞上的CR1受体诱导了因子I的第三次切割,从而从C3dg中释放C3c(Dodds,a。 W.和Sim,R。B.编辑 (1997) )。