mRNA Cap2氧甲基转移酶 重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase
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mRNA Cap 2氧甲基转移酶（mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase）是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA，从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率，因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。
产品性质
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英文名（English Name） |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase |
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来源（Source） |
重组E.coli |
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浓度（Concertation） |
50000 Units/mL |
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纯度（Purity） |
≥99%（SDS-PAGE） |
|
比活（Specific Activity） |
≥1.6×105 U/mg |
|
储存缓冲液（Storage Buffer） |
20 mM Tris-HCl pH8.0，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，100 mM NaCl，50%（v/v）甘油，0.1%（v/v）Trion X-100 |
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活性单位定义（Unit Definition） |
一单位（U）定义为：在37℃条件下1 h内甲基化10 pmol的80 nt带帽RNA转录物所需的酶量。 |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。推荐分装冻存，避免反复冻融。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
||
|
10616ES84 |
10616ES92 |
10616ES97 |
||
|
10616-A |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL) |
40 μL |
200 μL |
1 mL |
|
10616-B |
10×Capping Reaction Buffer |
80 μL |
400 μL |
2 mL |
使用方法
1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16 μL；
2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5 min，反应后冰上放置 5 min；
3、按下表（1）配置反应体系（适用于10 μg以内Capped RNA的甲基化反应）；
4、37℃条件下孵育1 h（对与目的片段长度小于200 nt RNA，可将孵育时间增加到2 h）；
表1：20μL反应体系配置
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组分名称 |
体积 |
|
Denatured Capped RNA |
16 μL |
|
10×Capping Reaction Buffer |
2 μL |
|
SAM (4 mM) |
1 μL |
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mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL) |
1 μL |
注意事项
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子；
3、反应之前推荐65℃加热5 min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5´端结构复杂，可将时间延长至10 min；
4、本产品仅作科研用途！
HB220224
mRNA Cap 2氧甲基转移酶（mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase）是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA，从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率，因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。
产品性质
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英文名（English Name） |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase |
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来源（Source） |
重组E.coli |
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浓度（Concertation） |
50000 Units/mL |
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纯度（Purity） |
≥99%（SDS-PAGE） |
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比活（Specific Activity） |
≥1.6×105 U/mg |
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储存缓冲液（Storage Buffer） |
20 mM Tris-HCl pH8.0，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，100 mM NaCl，50%（v/v）甘油，0.1%（v/v）Trion X-100 |
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活性单位定义（Unit Definition） |
一单位（U）定义为：在37℃条件下1 h内甲基化10 pmol的80 nt带帽RNA转录物所需的酶量。 |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。推荐分装冻存，避免反复冻融。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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10616ES84 |
10616ES92 |
10616ES97 |
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10616-A |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL) |
40 μL |
200 μL |
1 mL |
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10616-B |
10×Capping Reaction Buffer |
80 μL |
400 μL |
2 mL |
使用方法
1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16 μL；
2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5 min，反应后冰上放置 5 min；
3、按下表（1）配置反应体系（适用于10 μg以内Capped RNA的甲基化反应）；
4、37℃条件下孵育1 h（对与目的片段长度小于200 nt RNA，可将孵育时间增加到2 h）；
表1：20μL反应体系配置
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组分名称 |
体积 |
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Denatured Capped RNA |
16 μL |
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10×Capping Reaction Buffer |
2 μL |
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SAM (4 mM) |
1 μL |
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mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL) |
1 μL |
注意事项
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子；
3、反应之前推荐65℃加热5 min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5´端结构复杂，可将时间延长至10 min；
4、本产品仅作科研用途！
HB220224
暂无内容
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