Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

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FAQ

COA

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Hieff Trans® mRNA转染试剂是一款针对mRNA细胞转染阳离子多聚物转染试剂,对常规细胞、原代细胞、神经细胞都具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!

 

注意事项

1转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释mRNA和转染试剂。

3使用RNA酶污染的耗材与试剂

42-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。

5初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最的转染效率。

6本产品仅作科研用途!

 

操作流程(以24孔板为例,其他培养板加样体积请参考表一)

注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1. 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳。

2. 按照以下体系配制mRNA转染试剂复合物:

1)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.4 μg mRNA,轻轻混匀。

2)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.81.6 μL转染试剂,轻轻混匀,室温孵育5 min

3)将稀释的mRNA与稀释的转染试剂轻轻混匀。

4)室温静置孵育20 min

3. mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

4. 37℃5% CO2培养箱培养24-96 h,直至进行基因表达分析。

 

不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

培养容器

表面积

每孔体积

mRNA转染

培养基体积

稀释液体积

mRNA

试剂体积

96-well

0.3 cm2

100 μL

2×5 μL

0.2 μg

0.2-0.4 μL

24-well

2 cm2

500 μL

2×10 μL

0.4 μg

0.8-1.6 μL

12-well

4 cm2

1 mL

2×20 μL

0.8 μg

1.6-3.2 μL

6-well

10 cm2

2 mL

2×50 μL

1 μg

2-4 μL

60-mm

20 cm2

5 mL

2×100 μL

4 μg

8-16 μL

10-cm

60 cm2

15 mL

2×300 μL

12 μg

24-48 μL

【注】该表使用量仅供参考,mRNA转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

HB221102

Q:40809主要成分是PEI吗?

A:不是,是类似LNP的组分

Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

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Hieff Trans® mRNA转染试剂是一款针对mRNA细胞转染阳离子多聚物转染试剂,对常规细胞、原代细胞、神经细胞都具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!

 

注意事项

1转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释mRNA和转染试剂。

3使用RNA酶污染的耗材与试剂

42-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。

5初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最的转染效率。

6本产品仅作科研用途!

 

操作流程(以24孔板为例,其他培养板加样体积请参考表一)

注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1. 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳。

2. 按照以下体系配制mRNA转染试剂复合物:

1)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.4 μg mRNA,轻轻混匀。

2)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.81.6 μL转染试剂,轻轻混匀,室温孵育5 min

3)将稀释的mRNA与稀释的转染试剂轻轻混匀。

4)室温静置孵育20 min

3. mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

4. 37℃5% CO2培养箱培养24-96 h,直至进行基因表达分析。

 

不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

培养容器

表面积

每孔体积

mRNA转染

培养基体积

稀释液体积

mRNA

试剂体积

96-well

0.3 cm2

100 μL

2×5 μL

0.2 μg

0.2-0.4 μL

24-well

2 cm2

500 μL

2×10 μL

0.4 μg

0.8-1.6 μL

12-well

4 cm2

1 mL

2×20 μL

0.8 μg

1.6-3.2 μL

6-well

10 cm2

2 mL

2×50 μL

1 μg

2-4 μL

60-mm

20 cm2

5 mL

2×100 μL

4 μg

8-16 μL

10-cm

60 cm2

15 mL

2×300 μL

12 μg

24-48 μL

【注】该表使用量仅供参考,mRNA转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

HB221102

Q:40809主要成分是PEI吗?

A:不是,是类似LNP的组分

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