Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)
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COA
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Hieff Trans® mRNA转染试剂是一款针对mRNA细胞转染的阳离子多聚物转染试剂,对常规细胞、原代细胞、神经细胞都具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸–转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!
注意事项
1)转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。
2)制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释mRNA和转染试剂。
3)使用无RNA酶污染的耗材与试剂。
4)2-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。
5)初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。
6)本产品仅作科研用途!
操作流程(以24孔板为例,其他培养板加样体积请参考表一)
注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。
1. 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳。
2. 按照以下体系配制mRNA–转染试剂复合物:
1)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.4 μg mRNA,轻轻混匀。
2)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.8–1.6 μL转染试剂,轻轻混匀,室温孵育5 min。
3)将稀释的mRNA与稀释的转染试剂轻轻混匀。
4)室温静置孵育20 min。
3. 将mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。
4. 37℃,5% CO2培养箱培养24-96 h,直至进行基因表达分析。
不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):
培养容器 |
表面积 |
每孔体积 |
mRNA转染 |
||
培养基体积 |
稀释液体积 |
mRNA |
试剂体积 |
||
96-well |
0.3 cm2 |
100 μL |
2×5 μL |
0.2 μg |
0.2-0.4 μL |
24-well |
2 cm2 |
500 μL |
2×10 μL |
0.4 μg |
0.8-1.6 μL |
12-well |
4 cm2 |
1 mL |
2×20 μL |
0.8 μg |
1.6-3.2 μL |
6-well |
10 cm2 |
2 mL |
2×50 μL |
1 μg |
2-4 μL |
60-mm |
20 cm2 |
5 mL |
2×100 μL |
4 μg |
8-16 μL |
10-cm |
60 cm2 |
15 mL |
2×300 μL |
12 μg |
24-48 μL |
【注】该表使用量仅供参考,mRNA与转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。
HB221102
Hieff Trans® mRNA转染试剂是一款针对mRNA细胞转染的阳离子多聚物转染试剂,对常规细胞、原代细胞、神经细胞都具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸–转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!
注意事项
1)转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。
2)制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释mRNA和转染试剂。
3)使用无RNA酶污染的耗材与试剂。
4)2-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。
5)初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。
6)本产品仅作科研用途!
操作流程(以24孔板为例,其他培养板加样体积请参考表一)
注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。
1. 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳。
2. 按照以下体系配制mRNA–转染试剂复合物:
1)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.4 μg mRNA,轻轻混匀。
2)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.8–1.6 μL转染试剂,轻轻混匀,室温孵育5 min。
3)将稀释的mRNA与稀释的转染试剂轻轻混匀。
4)室温静置孵育20 min。
3. 将mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。
4. 37℃,5% CO2培养箱培养24-96 h,直至进行基因表达分析。
不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):
培养容器 |
表面积 |
每孔体积 |
mRNA转染 |
||
培养基体积 |
稀释液体积 |
mRNA |
试剂体积 |
||
96-well |
0.3 cm2 |
100 μL |
2×5 μL |
0.2 μg |
0.2-0.4 μL |
24-well |
2 cm2 |
500 μL |
2×10 μL |
0.4 μg |
0.8-1.6 μL |
12-well |
4 cm2 |
1 mL |
2×20 μL |
0.8 μg |
1.6-3.2 μL |
6-well |
10 cm2 |
2 mL |
2×50 μL |
1 μg |
2-4 μL |
60-mm |
20 cm2 |
5 mL |
2×100 μL |
4 μg |
8-16 μL |
10-cm |
60 cm2 |
15 mL |
2×300 μL |
12 μg |
24-48 μL |
【注】该表使用量仅供参考,mRNA与转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。
HB221102
Q:40809主要成分是PEI吗?
A:不是,是类似LNP的组分。
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