慢病毒浓缩试剂盒|Lentivirus Concentration Solution

慢病毒浓缩试剂盒|Lentivirus Concentration Solution

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产品描述

翌圣慢病毒浓缩试剂盒中含有浓缩液,能对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速的浓缩。该试剂盒操作简单,仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育,然后使用普通的离心机离心,即可得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达90%以上,可提高100倍病毒滴度。

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品放到4 ºC保存,有效期6个月。

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

操作步骤

1. 收集慢病毒上清液,0.45 μm滤膜过滤,以除去细胞和碎片。
注:如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。不能用硝酸纤维素膜(NC)。
2. 将慢病毒上清与试剂盒中的浓缩液按照4:1的比例混合(上清液4份,浓缩液1份),4
孵育2 hrs或过夜。刚开始时每隔30min混匀一下,混匀进行3次。
注:延长孵育时间可以提高回收率。慢病毒颗粒在4℃可以稳定保存数天。

3. 于4℃,4000g离心25mins。

4. 小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。

5. 用初始体积(原上清液体积)1/10 – 1/100的DMEM或PBS重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。

6. 测定浓缩慢病毒样品的滴度,50µl/管分装,于-80℃冰箱保存。
注:慢病毒冻存液避免反复冻融,否则会降低病毒滴度。

 

相关产品

产品编号

产品名称

规格

41102ES10

Lentiviral Packaging Kit 慢病毒包装试剂盒

10T

41102ES20

20T

41102ES40

40T

40804ES76

Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/mL)

500μL

40804ES86

5×500μL

 
HB 210426

Q:病毒 4℃孵育过夜离心后,没有看到沉淀,打算继续孵育到晚上,4℃孵育这个时间可以延长多久?现在来不及做可以再放到晚上吗?有没有最适合的孵育时间建议?

A:4℃孵育的时间放可以延长,吸附的病毒量可以增大,不过同时也会增加吸附杂质的比率,孵育时间可以参考说明书的建议范围。

Q:慢病毒浓缩试剂盒,在 4℃混匀孵育每隔 30min 摇晃混匀一次的这一个步骤,是不是放在 4℃混匀仪上摇晃效果更好?

A:一直摇晃混匀会影响吸附效果,这个过程需要静置吸附的时间。

Q:慢病毒试剂盒大概成分是什么?浓缩效率高吗?2个10cm皿包的慢病毒,加这个浓缩液,能看到沉淀吗?

A:成分PEG,可提高100倍病毒滴度。至于沉淀有没有,要根据客户原始的病毒的总量。

Q:慢病毒浓缩试剂盒,能否去除血清中的BSA等杂蛋白?

A:无法去除杂蛋白,该试剂盒属于生物吸附-PEG浓缩,原理是聚合物沉淀法。

Q:Lentivirus Concentration Solution慢病毒浓缩试剂盒原理是什么?

A:含有聚乙二醇,具有高亲水性,在溶液中会吸收大量水分,减少病毒之间的距离,使病毒聚合在一起,提高病毒的相对浓度,达到沉淀浓缩的目的。

Q:我们的慢病毒浓缩液只针对慢病毒吗?是不是其他的逆转录病毒也可以?因为慢病毒本身就是逆转录病毒改造而成的?

A:慢病毒属于逆转录病毒科,其他逆转病毒也可以。

Q:它适用于其他病毒吗?可以作为通用病毒浓缩液吗?

A:虽然它属于逆转录病毒,但是病毒的整个大类其实很多,不能改成通用病毒浓缩液。

Q:产生的沉淀都是病毒码?

A:白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒颗粒外,还有血清蛋白和少量的细胞碎片和基因组DNA等。去除方法,重悬病毒后,4℃ 12,000×g离心3-5min,吸取上清即为浓缩的病毒

[1] He Y, Gallman AE, Xie C, et al. P2RY8 variants in lupus patients uncover a role for the receptor in immunological tolerance. J Exp Med. 2022;219(1):e20211004. doi:10.1084/jem.20211004(IF:14.307)
[2] Peng J, Pan J, Wang H, Mo J, Lan L, Peng Y. Morphine-induced microglial immunosuppression via activation of insufficient mitophagy regulated by NLRX1. J Neuroinflammation. 2022;19(1):87. Published 2022 Apr 12. doi:10.1186/s12974-022-02453-7(IF:8.322)
[3] Guo Y, Zhao J, Huang R, Xu T, Zhou K, Zheng L. Scalable Dual-Fluorescence Assay for Functional Interpretation of HNF-4α Missense Variants. Front Endocrinol (Lausanne). 2022;13:812747. Published 2022 Feb 14. doi:10.3389/fendo.2022.812747(IF:5.555)
[4] Fan J, He Q, Jin Z, Chen W, Huang W. A novel phosphoester-based cationic co-polymer nanocarrier delivers chimeric antigen receptor plasmid and exhibits anti-tumor effect. RSC Adv. 2018;8(27):14975-14982. Published 2018 Apr 19. doi:10.1039/c8ra02133c(IF:2.936)

产品描述

翌圣慢病毒浓缩试剂盒中含有浓缩液,能对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速的浓缩。该试剂盒操作简单,仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育,然后使用普通的离心机离心,即可得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达90%以上,可提高100倍病毒滴度。

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品放到4 ºC保存,有效期6个月。

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

操作步骤

1. 收集慢病毒上清液,0.45 μm滤膜过滤,以除去细胞和碎片。
注:如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。不能用硝酸纤维素膜(NC)。
2. 将慢病毒上清与试剂盒中的浓缩液按照4:1的比例混合(上清液4份,浓缩液1份),4
孵育2 hrs或过夜。刚开始时每隔30min混匀一下,混匀进行3次。
注:延长孵育时间可以提高回收率。慢病毒颗粒在4℃可以稳定保存数天。

3. 于4℃,4000g离心25mins。

4. 小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。

5. 用初始体积(原上清液体积)1/10 – 1/100的DMEM或PBS重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。

6. 测定浓缩慢病毒样品的滴度,50µl/管分装,于-80℃冰箱保存。
注:慢病毒冻存液避免反复冻融,否则会降低病毒滴度。

 

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规格

41102ES10

Lentiviral Packaging Kit 慢病毒包装试剂盒

10T

41102ES20

20T

41102ES40

40T

40804ES76

Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/mL)

500μL

40804ES86

5×500μL

 
HB 210426

Q:病毒 4℃孵育过夜离心后,没有看到沉淀,打算继续孵育到晚上,4℃孵育这个时间可以延长多久?现在来不及做可以再放到晚上吗?有没有最适合的孵育时间建议?

A:4℃孵育的时间放可以延长,吸附的病毒量可以增大,不过同时也会增加吸附杂质的比率,孵育时间可以参考说明书的建议范围。

Q:慢病毒浓缩试剂盒,在 4℃混匀孵育每隔 30min 摇晃混匀一次的这一个步骤,是不是放在 4℃混匀仪上摇晃效果更好?

A:一直摇晃混匀会影响吸附效果,这个过程需要静置吸附的时间。

Q:慢病毒试剂盒大概成分是什么?浓缩效率高吗?2个10cm皿包的慢病毒,加这个浓缩液,能看到沉淀吗?

A:成分PEG,可提高100倍病毒滴度。至于沉淀有没有,要根据客户原始的病毒的总量。

Q:慢病毒浓缩试剂盒,能否去除血清中的BSA等杂蛋白?

A:无法去除杂蛋白,该试剂盒属于生物吸附-PEG浓缩,原理是聚合物沉淀法。

Q:Lentivirus Concentration Solution慢病毒浓缩试剂盒原理是什么?

A:含有聚乙二醇,具有高亲水性,在溶液中会吸收大量水分,减少病毒之间的距离,使病毒聚合在一起,提高病毒的相对浓度,达到沉淀浓缩的目的。

Q:我们的慢病毒浓缩液只针对慢病毒吗?是不是其他的逆转录病毒也可以?因为慢病毒本身就是逆转录病毒改造而成的?

A:慢病毒属于逆转录病毒科,其他逆转病毒也可以。

Q:它适用于其他病毒吗?可以作为通用病毒浓缩液吗?

A:虽然它属于逆转录病毒,但是病毒的整个大类其实很多,不能改成通用病毒浓缩液。

Q:产生的沉淀都是病毒码?

A:白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒颗粒外,还有血清蛋白和少量的细胞碎片和基因组DNA等。去除方法,重悬病毒后,4℃ 12,000×g离心3-5min,吸取上清即为浓缩的病毒

[1] He Y, Gallman AE, Xie C, et al. P2RY8 variants in lupus patients uncover a role for the receptor in immunological tolerance. J Exp Med. 2022;219(1):e20211004. doi:10.1084/jem.20211004(IF:14.307)
[2] Peng J, Pan J, Wang H, Mo J, Lan L, Peng Y. Morphine-induced microglial immunosuppression via activation of insufficient mitophagy regulated by NLRX1. J Neuroinflammation. 2022;19(1):87. Published 2022 Apr 12. doi:10.1186/s12974-022-02453-7(IF:8.322)
[3] Guo Y, Zhao J, Huang R, Xu T, Zhou K, Zheng L. Scalable Dual-Fluorescence Assay for Functional Interpretation of HNF-4α Missense Variants. Front Endocrinol (Lausanne). 2022;13:812747. Published 2022 Feb 14. doi:10.3389/fendo.2022.812747(IF:5.555)
[4] Fan J, He Q, Jin Z, Chen W, Huang W. A novel phosphoester-based cationic co-polymer nanocarrier delivers chimeric antigen receptor plasmid and exhibits anti-tumor effect. RSC Adv. 2018;8(27):14975-14982. Published 2018 Apr 19. doi:10.1039/c8ra02133c(IF:2.936)