使用方法

1. 反应体系配制：

2. 反应条件：45℃温育15 min。加入终止染液（50%甘油，50 mM EDTA和溴酚兰）终止反应。

HB221128

Hieff^® Taq DNA Ligase是一种突变型的Taq DNA连接酶，具有较高的连接效率，应用于同源重组性能较野生型得到显著提高。同时维持了野生型的基本功能，是一种耐高温连接酶，它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸和3´-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对，且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生，因此，可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA连接酶以NAD⁺为辅酶因子，在45℃-65℃范围内均有活性。

产品组分

来源

重组E. coli 菌株，含有从Thermus aquaticus HB8中克隆的连接酶基因。

产品应用

1）同源重组；

2）用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测；

3）通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变。

单位定义

在50 μL反应体系中，45℃条件下，孵育15 min能使50%的1 μg经BstEII消化的λDNA片段（12 bp粘性末端）发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

运输与保存方法

干冰运输。-20℃保存，有效期2年。长时间（大于30天）保存时，缓冲液应于-80℃保存。

注意事项

1. 10×Taq DNA Ligase Reaction Buffer中含有辅酶因子NAD⁺，为了延长NAD⁺的半衰期，Buffer应于-80℃储存；

2. Taq DNA Ligase不能替代T4 DNA ligase；

3. 本产品仅做科研用途；

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。