破膜剂 渗透洗涤缓冲液|Permeabilization Wash Buffer

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破膜剂 渗透洗涤缓冲液|Permeabilization Wash Buffer

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产品描述

固定剂、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定剂起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用；破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时，对待测细胞进行固定、破膜处理后，加入相应抗体或检测试剂，孵育一定时间即可上机分析。

产品组分

0.1%皂素、0.1%叠氮钠、1％胎牛血清、HEPES、PBS

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。4℃保存，避免强光直射，勿冰冻。有效期一年。

注意事项

1）破膜剂中含有剧毒物质叠氮钠，使用时避免与皮肤、眼睛及黏膜接触。
2）本产品仅作科研用途！

应用实例

1. 收获待测细胞，1000 rpm离心10 分钟，弃上清。

2. 加入 500 uL预冷(4℃)固定剂。

3. 室温孵育10 分钟。

4. 1000 rpm离心10 分钟。

5. 弃上清，加入PBS洗一次，1000 rpm离心10 分钟。

6. 弃上清，加入1.5 mL破膜剂。

7. 室温孵育10-15 分钟。

8. 1000 rpm离心5 分钟。

9. 弃上清，加入适量破膜剂重悬细胞。

10. 加入检测抗体进行染色后，用流式细胞仪进行分析。

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Permeabilization Wash Buffer 破膜剂

150 mL

 

HB210526

 

Q:做核内因子的流式分析，这个破膜剂能破核膜吗？

A:不能，皂素是相对理想的细胞破膜剂，但无法破核膜，若需破核膜还是要用 Triton-X 和Tween-20。

Q:破膜剂能不能先染膜抗体，然后破膜后再染细胞里面的，还是说需要破膜之后一起染？

A:先固定，再破膜，再染色，需要破膜之后一起染。

[1] Wang Y, Chen B, He Z, et al. Nanotherapeutic macrophage-based immunotherapy for the peritoneal carcinomatosis of lung cancer. Nanoscale. 2022;14(6):2304-2315. Published 2022 Feb 10. doi:10.1039/d1nr06518a(IF:7.790)
[2] Xue M, Liang H, Ji X, et al. Effects of fucoidan on gut flora and tumor prevention in 1,2-dimethylhydrazine-induced colorectal carcinogenesis. J Nutr Biochem. 2020;82:108396. doi:10.1016/j.jnutbio.2020.108396(IF:6.048)
[3] Xiong C, Mao Y, Wu T, et al. Optimized Expression and Characterization of a Novel Fully Human Bispecific Single-Chain Diabody Targeting Vascular Endothelial Growth Factor165 and Programmed Death-1 in Pichia pastoris and Evaluation of Antitumor Activity In Vivo. Int J Mol Sci. 2018;19(10):2900. Published 2018 Sep 25. doi:10.3390/ijms19102900(IF:3.687)
[4] Ding D, Yang X, Luan HQ, Wu XT, Sun LW, Fan YB. The microgravity induces the ciliary shortening and an increased ratio of anterograde/retrograde intraflagellar transport of osteocytes. Biochem Biophys Res Commun. 2020;530(1):167-172. doi:10.1016/j.bbrc.2020.06.119(IF:3.575)
[5] Hao W, Shi S, Zhou S, Wang X, Nie S. Aspirin inhibits growth and enhances cardiomyocyte differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells. Eur J Pharmacol. 2018;827:198-207. doi:10.1016/j.ejphar.2018.03.016(IF:3.040)
[6] Shi S, Wu X, Wang X, et al. Differentiation of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells to Cardiomyocyte-Like Cells Is Regulated by the Combined Low Dose Treatment of Transforming Growth Factor-β1 and 5-Azacytidine. Stem Cells Int. 2016;2016:3816256. doi:10.1155/2016/3816256(IF:2.813)
[7] Xue M, Liang H, Tang Q, et al. The Protective and Immunomodulatory Effects of Fucoidan Against 7,12-Dimethyl benz[a]anthracene-Induced Experimental Mammary Carcinogenesis Through the PD1/PDL1 Signaling Pathway in Rats. Nutr Cancer. 2017;69(8):1234-1244. doi:10.1080/01635581.2017.1362446(IF:2.447)

产品描述

固定剂、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定剂起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用；破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时，对待测细胞进行固定、破膜处理后，加入相应抗体或检测试剂，孵育一定时间即可上机分析。

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0.1%皂素、0.1%叠氮钠、1％胎牛血清、HEPES、PBS

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。4℃保存，避免强光直射，勿冰冻。有效期一年。

注意事项

1）破膜剂中含有剧毒物质叠氮钠，使用时避免与皮肤、眼睛及黏膜接触。
2）本产品仅作科研用途！

应用实例

1. 收获待测细胞，1000 rpm离心10 分钟，弃上清。

2. 加入 500 uL预冷(4℃)固定剂。

3. 室温孵育10 分钟。

4. 1000 rpm离心10 分钟。

5. 弃上清，加入PBS洗一次，1000 rpm离心10 分钟。

6. 弃上清，加入1.5 mL破膜剂。

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Q:做核内因子的流式分析，这个破膜剂能破核膜吗？

A:不能，皂素是相对理想的细胞破膜剂，但无法破核膜，若需破核膜还是要用 Triton-X 和Tween-20。

Q:破膜剂能不能先染膜抗体，然后破膜后再染细胞里面的，还是说需要破膜之后一起染？

A:先固定，再破膜，再染色，需要破膜之后一起染。

[1] Wang Y, Chen B, He Z, et al. Nanotherapeutic macrophage-based immunotherapy for the peritoneal carcinomatosis of lung cancer. Nanoscale. 2022;14(6):2304-2315. Published 2022 Feb 10. doi:10.1039/d1nr06518a(IF:7.790)
[2] Xue M, Liang H, Ji X, et al. Effects of fucoidan on gut flora and tumor prevention in 1,2-dimethylhydrazine-induced colorectal carcinogenesis. J Nutr Biochem. 2020;82:108396. doi:10.1016/j.jnutbio.2020.108396(IF:6.048)
[3] Xiong C, Mao Y, Wu T, et al. Optimized Expression and Characterization of a Novel Fully Human Bispecific Single-Chain Diabody Targeting Vascular Endothelial Growth Factor165 and Programmed Death-1 in Pichia pastoris and Evaluation of Antitumor Activity In Vivo. Int J Mol Sci. 2018;19(10):2900. Published 2018 Sep 25. doi:10.3390/ijms19102900(IF:3.687)
[4] Ding D, Yang X, Luan HQ, Wu XT, Sun LW, Fan YB. The microgravity induces the ciliary shortening and an increased ratio of anterograde/retrograde intraflagellar transport of osteocytes. Biochem Biophys Res Commun. 2020;530(1):167-172. doi:10.1016/j.bbrc.2020.06.119(IF:3.575)
[5] Hao W, Shi S, Zhou S, Wang X, Nie S. Aspirin inhibits growth and enhances cardiomyocyte differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells. Eur J Pharmacol. 2018;827:198-207. doi:10.1016/j.ejphar.2018.03.016(IF:3.040)
[6] Shi S, Wu X, Wang X, et al. Differentiation of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells to Cardiomyocyte-Like Cells Is Regulated by the Combined Low Dose Treatment of Transforming Growth Factor-β1 and 5-Azacytidine. Stem Cells Int. 2016;2016:3816256. doi:10.1155/2016/3816256(IF:2.813)
[7] Xue M, Liang H, Tang Q, et al. The Protective and Immunomodulatory Effects of Fucoidan Against 7,12-Dimethyl benz[a]anthracene-Induced Experimental Mammary Carcinogenesis Through the PD1/PDL1 Signaling Pathway in Rats. Nutr Cancer. 2017;69(8):1234-1244. doi:10.1080/01635581.2017.1362446(IF:2.447)