快速末端修复/A尾添加模块 NGS建库模块|Endprep Mix
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
Hieff NGS® Ultima® Endprep Mix是针对Illumina®与MGI®高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块，具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容500 pg-1 μg片段化Input DNA，可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5'端磷酸化和3'端加A尾反应，得到5'末端含磷酸基团且3'末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化，即可使用Hieff NGS® Ultima® DNA Ligation Module（Cat#12604）进行文库构建接头连接反应。
本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
24 T |
96 T |
1000T |
|
12605 |
Endprep Mix |
240 μL |
960 μL |
10 mL |
测序验证
本品与Hieff NGS® Ultima® DNA Ligation Module（Cat#12604），2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12621）共同用于DNA文库构建，已通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。
本产品与Hieff NGS® Ultima® DNA Ligation Module（Cat#12604），2× Ultima HF Amplification Mix for MGI® （Cat#13344）共同用于DNA文库构建，通过MGI®高通量平台测序验证其有效性。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途！
使用方法
1. 将表1中试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1 末端修复/dA尾添加PCR反应体系
|
名称 |
体积（μL） |
|
Fragmented DNA |
x |
|
Endprep Mix |
10 |
|
ddH2O |
Up to 60 μL |
3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。
4. 将上述PCR管置于PCR仪，设置表2所示反应程序，进行末端修复/dA尾添加反应。
表2 末端修复/dA尾添加PCR反应程序
|
温度 |
时间 |
|
热盖105°C |
On |
|
30°C |
20 min |
|
72°C |
20 min |
|
4°C |
Hold |
5. 产物如需纯化，可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效产品。也可以直接驳接Hieff NGS® Ultima® DNA Ligation Module（Cat#12604）试剂盒，进行接头连接实验。
HB220118
Hieff NGS® Ultima® Endprep Mix是针对Illumina®与MGI®高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块，具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容500 pg-1 μg片段化Input DNA，可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5'端磷酸化和3'端加A尾反应，得到5'末端含磷酸基团且3'末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化，即可使用Hieff NGS® Ultima® DNA Ligation Module（Cat#12604）进行文库构建接头连接反应。
本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
24 T |
96 T |
1000T |
|
12605 |
Endprep Mix |
240 μL |
960 μL |
10 mL |
测序验证
本品与Hieff NGS® Ultima® DNA Ligation Module（Cat#12604），2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12621）共同用于DNA文库构建，已通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。
本产品与Hieff NGS® Ultima® DNA Ligation Module（Cat#12604），2× Ultima HF Amplification Mix for MGI® （Cat#13344）共同用于DNA文库构建，通过MGI®高通量平台测序验证其有效性。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途！
使用方法
1. 将表1中试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1 末端修复/dA尾添加PCR反应体系
|
名称 |
体积（μL） |
|
Fragmented DNA |
x |
|
Endprep Mix |
10 |
|
ddH2O |
Up to 60 μL |
3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。
4. 将上述PCR管置于PCR仪，设置表2所示反应程序，进行末端修复/dA尾添加反应。
表2 末端修复/dA尾添加PCR反应程序
|
温度 |
时间 |
|
热盖105°C |
On |
|
30°C |
20 min |
|
72°C |
20 min |
|
4°C |
Hold |
5. 产物如需纯化，可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效产品。也可以直接驳接Hieff NGS® Ultima® DNA Ligation Module（Cat#12604）试剂盒，进行接头连接实验。
HB220118
暂无内容
[1] Xiong J, Wang P, Shao WX, et al. Genome-wide mapping of N4-methylcytosine at single-base resolution by APOBEC3A-mediated deamination sequencing. Chem Sci. 2022;13(34):9960-9972. Published 2022 Aug 11. doi:10.1039/d2sc02446b(IF:9.969)