产品简介

 

Cas9 Nuclease来源于野生型酿脓链球菌S. pyogenes，是依赖RNA介导的内切核酸酶，可以特异地切割双链DNA（在DNA PAM存在的情况下，也可以切割单链DNA或单链RNA）。Cas9切割位点位于目标序列（target sequence）内，离PAM（NGG）区3个碱基。本产品经过密码子优化及核定位信号（NLS）设计，由大肠杆菌重组表达而来，编辑效率高，可用于细胞（造血干细胞、T细胞等）的基因修饰，也可用于分子诊断，检测病原体等。

 

产品信息

 

货号	14701ES60 / 14701ES76 / 14701ES03
规格	100 μg / 500 μg / 1 mg
来源	大肠杆菌重组表达来源于Streptococcus pyogenes的Cas9基因
酶保存液	30 mM Tris-HCl, 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.4
浓度	10 mg/mL
纯度	≥95%
标签	His

 

组分信息

 

组分名称	14701ES60	14701ES76	14701ES03
Cas9 Nuclease（10 mg/mL）	10 μL	50 μL	100 μL

 

产品应用

 

基于CRISPR/Cas9技术的基因组编辑；

细胞与基因治疗药物（造血干细胞、T细胞等）的基因修饰；

体外筛选有效sgRNA；

体外剪切靶DNA。

 

储存条件

 

-25~-15℃储存，有效期1年。

 

使用说明

 

RNP制备：

1. 用1×TE Buffer（pH 7.5）溶解sgRNA粉末至终浓度为100 μM，充分震荡混匀。

2. 配制以下体系并充分混匀：

组分	体积（μL）
Cas9 Nuclease (10 mg/mL)	1.28
sgRNA (100 μM)	2.34
PBS	1.38
Total	5

注：Cas9 Nuclease与sgRNA的摩尔比约为1：3。

3. 室温孵育20min。

 

注意事项

 

1. 为防止RNase污染，请保持实验区干净整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。

2. 避免反复冻融。首次溶解之后，建议按照使用量分装保存。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途。

Ver.CN20240222