TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)
产品说明书
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COA
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产品简介
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (UDG plus)是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多达四重的荧光定量PCR反应。本产品含有基因改造的抗体法热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性。同时，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。本产品含有UDG酶，可有效防止气溶胶污染的风险。
产品信息
|
货号 |
11212ES03/ 11212ES08 / 11212ES10/ 11212ES12 / 11212ES13/ 11212ES60/ 11212ES62 |
|
规格 |
1 mL /5×1 mL /10 mL /12.5 mL /1×12.5 mL /20×5 mL /125 mL |
组分信息
|
组分编号 |
组分名称 |
11212ES03 (1 mL) |
11212ES08 (5×1 mL) |
11212ES10 (10 mL) |
11212ES12 (12.5 mL) |
11212ES13 (1×12.5 mL) |
11212ES60 (20×5 mL) |
11212ES62 (125 mL) |
|
11212 |
2×TaqMan qPCR Mix |
1 mL |
5×1 mL |
10 mL |
12.5 mL |
1×12.5 mL |
20×5 mL |
125 mL |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期18个月。
使用说明
- 反应体系******
|
组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
|
2×TaqMan qPCR Mix |
12.5 |
1× |
|
Primer Mix (10 μM) |
x |
0.1-0.5 μM* |
|
Probe Mix (10 μM) |
x |
50-250 nM** |
|
Rox reference dye*** |
0.5 |
1× |
|
模板**** |
1-10 |
– |
|
ddH2O |
up to 25***** |
– |
*引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.2 μM，也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。
**探针浓度：Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整。
***Rox reference dye：使用在Applied Biosystems 等Real Time PCR 扩增仪上，用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差；本产品不含Rox reference dye。如需，推荐使用货号10200ES产品。
****模板稀释：qPCR灵敏度极高，建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液，则模板体积不超过总体积的1/10。
*****反应体系：推荐使用25 μL、30 μL或50 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
******体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
- 参考扩增程序
|
步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
|
污染消化 |
25℃ |
10 min |
1 |
|
预变性 |
95℃ |
5 min |
1 |
|
变性 |
95℃ |
|
45 |
|
退火/延伸* |
60℃ |
30 sec** |
*退火/延伸：温度和时间可根据实验要求适当调整。
**荧光信号采集：请按照仪器使用说明书要求进行实验程序设置，几种常见仪器的时间设定如下：
20 sec：Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec：Applied Biosystems 7300
32 sec：Applied Biosystems 7500
- 适用机型
Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
注意事项
- 关于操作
1）请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀，短暂离心收集至管底后，置于冰上备用。
2）为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3）使用过程中避免产品的反复冻融。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 实验方法
1）引物设计
a. 引物必须具有特异性。
b. 引物的Tm值必须在58-60°C，而且各组引物的Tm差异应控制在1-2°C。
c. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。
2）探针设计
a. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10°C（68-70°C）。
b. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。
Ver.CN20240226
产品简介
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (UDG plus)是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多达四重的荧光定量PCR反应。本产品含有基因改造的抗体法热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性。同时，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。本产品含有UDG酶，可有效防止气溶胶污染的风险。
产品信息
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货号 |
11212ES03/ 11212ES08 / 11212ES10/ 11212ES12 / 11212ES13/ 11212ES60/ 11212ES62 |
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规格 |
1 mL /5×1 mL /10 mL /12.5 mL /1×12.5 mL /20×5 mL /125 mL |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
11212ES03 (1 mL) |
11212ES08 (5×1 mL) |
11212ES10 (10 mL) |
11212ES12 (12.5 mL) |
11212ES13 (1×12.5 mL) |
11212ES60 (20×5 mL) |
11212ES62 (125 mL) |
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11212 |
2×TaqMan qPCR Mix |
1 mL |
5×1 mL |
10 mL |
12.5 mL |
1×12.5 mL |
20×5 mL |
125 mL |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期18个月。
使用说明
- 反应体系******
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
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2×TaqMan qPCR Mix |
12.5 |
1× |
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Primer Mix (10 μM) |
x |
0.1-0.5 μM* |
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Probe Mix (10 μM) |
x |
50-250 nM** |
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Rox reference dye*** |
0.5 |
1× |
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模板**** |
1-10 |
– |
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ddH2O |
up to 25***** |
– |
*引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.2 μM，也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。
**探针浓度：Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整。
***Rox reference dye：使用在Applied Biosystems 等Real Time PCR 扩增仪上，用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差；本产品不含Rox reference dye。如需，推荐使用货号10200ES产品。
****模板稀释：qPCR灵敏度极高，建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液，则模板体积不超过总体积的1/10。
*****反应体系：推荐使用25 μL、30 μL或50 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
******体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
- 参考扩增程序
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步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
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污染消化 |
25℃ |
10 min |
1 |
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预变性 |
95℃ |
5 min |
1 |
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变性 |
95℃ |
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45 |
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退火/延伸* |
60℃ |
30 sec** |
*退火/延伸：温度和时间可根据实验要求适当调整。
**荧光信号采集：请按照仪器使用说明书要求进行实验程序设置，几种常见仪器的时间设定如下：
20 sec：Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec：Applied Biosystems 7300
32 sec：Applied Biosystems 7500
- 适用机型
Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
注意事项
- 关于操作
1）请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀，短暂离心收集至管底后，置于冰上备用。
2）为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3）使用过程中避免产品的反复冻融。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 实验方法
1）引物设计
a. 引物必须具有特异性。
b. 引物的Tm值必须在58-60°C，而且各组引物的Tm差异应控制在1-2°C。
c. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。
2）探针设计
a. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10°C（68-70°C）。
b. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。
Ver.CN20240226
暂无内容
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