Multi-CUT&Tag实验文库构建试剂盒(Multi-CUT&Tag Library Prep Kit)
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Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台研发的用于Multi-CUT&Tag实验的文库构建试剂盒，适用于100-100,000个细胞起始量的样本建库。Multi-CUT&Tag是研究蛋白与DNA互作的技术，相较于传统的CUT&Tag，该技术使用nanobody-Tn5（Anti-mouse Tn5和Anti-rabbit Tn5），可实现一份细胞，两种靶标的研究，同时，该技术实验中无需再添加二抗。该技术具有一抗抗体投入量更少、无需二抗、文库产量更高等优点。经过细胞捕获、一抗孵育、转座酶孵育、转座酶激活、掺入DNA标准品、细胞裂解、磁珠回收gDNA、文库扩增和磁珠分选等步骤，靶蛋白结合的DNA片段最终转化为适用于Illumina®平台测序的文库。
本试剂盒包含两个独立模块：BOX-I和BOX-II。BOX-I的核心为结合细胞的ConA磁珠和回收DNA的磁珠，BOX-II包含细胞透化剂、蛋白酶抑制剂、抗体结合buffer、转座酶结合buffer、蛋白酶K以及后续文库扩增所需的所有试剂。此外，本试剂盒已在不同种类细胞（如293T、K562、CHO、ESC细胞等）和动物组织（脑组织、肝脏、脾等）中进行了验证，均具有良好的建库效率和建库产量。本试剂盒提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证了文库的稳定性和重复性。
组分信息
|
组分编号 |
组分名称 |
12592ES04 |
12592ES12 |
12592ES48 |
|
|
BOX-I |
12592-A |
ConA Beads |
40 μL |
120 μL |
480 μL |
|
12592-B |
DNA Selection Beads |
840 μL |
2.52 mL |
10.08 mL |
|
|
12592-C |
Cell wash buffer |
3.6 mL |
10.8 mL |
43.2 mL |
|
|
12592-D |
ConA bind buffer |
400 μL |
1.2 mL |
4.8 mL |
|
|
BOX-II |
12592-E |
Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-free) |
40 μL |
120 μL |
480 μL |
|
12592-F |
5% Digitonin |
8 μL |
24 μL |
96 μL |
|
|
12592-G |
3 M NaCl |
120 μL |
360 μL |
1440 μL |
|
|
12592-H |
50x Protein blocker |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
|
|
12592-I |
Anti-mouse Tn5 |
8 μL |
24 μL |
96 μL |
|
|
12592-J |
Anti-rabbit Tn5 |
8 μL |
24 μL |
96 μL |
|
|
12592-K |
30x Activating buffer |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
|
|
12592-L |
15x Terminate Solution |
8 μL |
24 μL |
96 μL |
|
|
12592-M |
DNA Spike-in mix V2 (5 pg/uL) |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
|
|
12592-N |
30x Proteinase K |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
|
|
12592-O |
2×Ultima Amplification Mix |
100 μL |
300 μL |
1.2 mL |
|
|
12592-P |
i5 Universal Primer |
8 μL |
* |
* |
|
|
12592-Q |
i7 Index Primer (T701) |
8 μL |
* |
* |
|
【注】：*12592ES12/48试剂盒不含Index Primer，需搭配Cat#12417进行完整建库；
*12592ES04中，index信息为i5 index GCCTTATG（对应mouse来源抗体数据）、AGGATATG（对应rabbit来源抗体数据）、i7 index TAAGGCGA（不同测序平台，i5端对应的序列可能需要反向，具体见参考第六部分：文库结构）。
储存条件
BOX-I：2~8℃保存，BOX-II：-25~-15℃保存，有效期1年。
Ver. CN20231208
Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台研发的用于Multi-CUT&Tag实验的文库构建试剂盒，适用于100-100,000个细胞起始量的样本建库。Multi-CUT&Tag是研究蛋白与DNA互作的技术，相较于传统的CUT&Tag，该技术使用nanobody-Tn5（Anti-mouse Tn5和Anti-rabbit Tn5），可实现一份细胞，两种靶标的研究，同时，该技术实验中无需再添加二抗。该技术具有一抗抗体投入量更少、无需二抗、文库产量更高等优点。经过细胞捕获、一抗孵育、转座酶孵育、转座酶激活、掺入DNA标准品、细胞裂解、磁珠回收gDNA、文库扩增和磁珠分选等步骤，靶蛋白结合的DNA片段最终转化为适用于Illumina®平台测序的文库。
本试剂盒包含两个独立模块：BOX-I和BOX-II。BOX-I的核心为结合细胞的ConA磁珠和回收DNA的磁珠，BOX-II包含细胞透化剂、蛋白酶抑制剂、抗体结合buffer、转座酶结合buffer、蛋白酶K以及后续文库扩增所需的所有试剂。此外，本试剂盒已在不同种类细胞（如293T、K562、CHO、ESC细胞等）和动物组织（脑组织、肝脏、脾等）中进行了验证，均具有良好的建库效率和建库产量。本试剂盒提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证了文库的稳定性和重复性。
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
12592ES04 |
12592ES12 |
12592ES48 |
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BOX-I |
12592-A |
ConA Beads |
40 μL |
120 μL |
480 μL |
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12592-B |
DNA Selection Beads |
840 μL |
2.52 mL |
10.08 mL |
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12592-C |
Cell wash buffer |
3.6 mL |
10.8 mL |
43.2 mL |
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12592-D |
ConA bind buffer |
400 μL |
1.2 mL |
4.8 mL |
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BOX-II |
12592-E |
Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-free) |
40 μL |
120 μL |
480 μL |
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12592-F |
5% Digitonin |
8 μL |
24 μL |
96 μL |
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12592-G |
3 M NaCl |
120 μL |
360 μL |
1440 μL |
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12592-H |
50x Protein blocker |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
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12592-I |
Anti-mouse Tn5 |
8 μL |
24 μL |
96 μL |
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12592-J |
Anti-rabbit Tn5 |
8 μL |
24 μL |
96 μL |
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12592-K |
30x Activating buffer |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
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12592-L |
15x Terminate Solution |
8 μL |
24 μL |
96 μL |
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12592-M |
DNA Spike-in mix V2 (5 pg/uL) |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
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12592-N |
30x Proteinase K |
4 μL |
12 μL |
48 μL |
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12592-O |
2×Ultima Amplification Mix |
100 μL |
300 μL |
1.2 mL |
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12592-P |
i5 Universal Primer |
8 μL |
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12592-Q |
i7 Index Primer (T701) |
8 μL |
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【注】：*12592ES12/48试剂盒不含Index Primer，需搭配Cat#12417进行完整建库；
*12592ES04中，index信息为i5 index GCCTTATG（对应mouse来源抗体数据）、AGGATATG（对应rabbit来源抗体数据）、i7 index TAAGGCGA（不同测序平台，i5端对应的序列可能需要反向，具体见参考第六部分：文库结构）。
储存条件
BOX-I：2~8℃保存，BOX-II：-25~-15℃保存，有效期1年。
Ver. CN20231208
暂无内容
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