Human Galectin-1 ELISA Kit |Galectin-1体外酶联免疫吸附测定试剂盒

Human Galectin-1 ELISA Kit |Galectin-1体外酶联免疫吸附测定试剂盒

产品说明书

FAQ

COA

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产品简介

Galectin-1,半乳糖凝集素家族成员之一。半乳糖凝集素在细胞内和分泌后的许多系统中发挥作用,含有一个或两个碳水化合物识别结构域(CRR),其介导对含N-乙酰氨基半乳糖的糖蛋白的识别。Galectin-1可正向或负向调节细胞生长和增殖,通过诱导Th2型细胞因子和抑制促炎细胞因子的产生来调节细胞因子的分泌。Galectin-1还可以调节细胞-细胞以及细胞-基质的相互作用,促进细胞附着或分离。此外,Galectin-1在免疫抑制和抗炎特性中也发挥重要作用。

翌圣Human Galectin-1 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的Galectin-1。特异性抗Galectin-1抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的Galectin-1与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中Galectin-1的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 – 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

97020ES48 / 97020ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

0.31-20 ng/mL

检测方法

双抗夹心法

检测时长

4.5小时

灵敏度

0.08 ng/mL

稀释线性

76 – 120%

回收率

84 – 123%

板内差

5.7%

板间差

8.1%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析

 

标准曲线

浓度(ng/mL)

显色值

平均值

校准值

20

2.726

2.682

2.704

2.709

10

2.082

1.916

1.999

1.981

5

1.327

1.202

1.264

1.291

2.5

0.824

0.742

0.783

0.766

1.25

0.438

0.404

0.421

0.427

0.63

0.240

0.243

0.241

0.234

0.31

0.123

0.125

0.124

0.127

0

0.015

0.016

0.016

/

Human Galectin-1 ELISA Kit |Galectin-1体外酶联免疫吸附测定试剂盒

 
  1. 灵敏度检测

Galectin-1的最低检测限为0.08 ng/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定6次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测22次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

6

6

6

22

22

22

平均值

9.00

2.22

0.64

9.03

2.29

0.65

标准差

0.58

0.11

0.04

0.90

0.16

0.05

变异系数%

6.48

4.92

5.66

10.00

6.91

7.50

  1. 回收率检测

 通过不同水平的Galectin-1添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

101.3

89.4-123.2

血浆

101.0

84.0-118.9

细胞培养上清

100.6

95.2-110.8

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

94.0

84.1-107.8

1:04

107.2

98.2-115.9

1:08

104.4

98.1-115.9

1:16

109.1

98.9-119.9

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

92.2

76.4-100.6

1:04

99.2

98.0-99.8

1:08

101.3

100.5-101.9

1:16

107.7

92.2-118.1

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

84.7

78.9-88.8

1:04

95.5

88.6-102.3

1:08

99.5

98.5-100.6

1:16

100.2

94.1-106.9

 

 

 
  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(ng/mL)

样本值(ng/mL)

血清

8

0.36

n.d-2.08

血浆

6

0.51

n.d-1.28

细胞培养上清

4

0.35

n.d-0.7

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得0.31 ng/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组Galectin-1,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Galectin-2

Galectin-3

Galectin-4

Galectin-7

Galectin-8

Fibronectin

 

检测简图

Human Galectin-1 ELISA Kit |Galectin-1体外酶联免疫吸附测定试剂盒

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

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产品简介

Galectin-1,半乳糖凝集素家族成员之一。半乳糖凝集素在细胞内和分泌后的许多系统中发挥作用,含有一个或两个碳水化合物识别结构域(CRR),其介导对含N-乙酰氨基半乳糖的糖蛋白的识别。Galectin-1可正向或负向调节细胞生长和增殖,通过诱导Th2型细胞因子和抑制促炎细胞因子的产生来调节细胞因子的分泌。Galectin-1还可以调节细胞-细胞以及细胞-基质的相互作用,促进细胞附着或分离。此外,Galectin-1在免疫抑制和抗炎特性中也发挥重要作用。

翌圣Human Galectin-1 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清中的Galectin-1。特异性抗Galectin-1抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的Galectin-1与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中Galectin-1的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 – 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

97020ES48 / 97020ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

0.31-20 ng/mL

检测方法

双抗夹心法

检测时长

4.5小时

灵敏度

0.08 ng/mL

稀释线性

76 – 120%

回收率

84 – 123%

板内差

5.7%

板间差

8.1%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析

 

标准曲线

浓度(ng/mL)

显色值

平均值

校准值

20

2.726

2.682

2.704

2.709

10

2.082

1.916

1.999

1.981

5

1.327

1.202

1.264

1.291

2.5

0.824

0.742

0.783

0.766

1.25

0.438

0.404

0.421

0.427

0.63

0.240

0.243

0.241

0.234

0.31

0.123

0.125

0.124

0.127

0

0.015

0.016

0.016

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  1. 灵敏度检测

Galectin-1的最低检测限为0.08 ng/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定6次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测22次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

6

6

6

22

22

22

平均值

9.00

2.22

0.64

9.03

2.29

0.65

标准差

0.58

0.11

0.04

0.90

0.16

0.05

变异系数%

6.48

4.92

5.66

10.00

6.91

7.50

  1. 回收率检测

 通过不同水平的Galectin-1添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

101.3

89.4-123.2

血浆

101.0

84.0-118.9

细胞培养上清

100.6

95.2-110.8

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

94.0

84.1-107.8

1:04

107.2

98.2-115.9

1:08

104.4

98.1-115.9

1:16

109.1

98.9-119.9

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

92.2

76.4-100.6

1:04

99.2

98.0-99.8

1:08

101.3

100.5-101.9

1:16

107.7

92.2-118.1

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

84.7

78.9-88.8

1:04

95.5

88.6-102.3

1:08

99.5

98.5-100.6

1:16

100.2

94.1-106.9

 

 

 
  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(ng/mL)

样本值(ng/mL)

血清

8

0.36

n.d-2.08

血浆

6

0.51

n.d-1.28

细胞培养上清

4

0.35

n.d-0.7

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得0.31 ng/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组Galectin-1,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Galectin-2

Galectin-3

Galectin-4

Galectin-7

Galectin-8

Fibronectin

 

检测简图

Human Galectin-1 ELISA Kit |Galectin-1体外酶联免疫吸附测定试剂盒

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

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