Ceturegel^® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出来的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等组成，还包含生长因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、组织纤溶酶原激活物和EHS肿瘤自身含有的其他生长因子。在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵袭和基因表达等的研究。

Ceturegel^® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free基质胶为无菌制品，经过类器官培养验证，满足类器官构建所需。

产品组分

运输与保存方法

干冰运输。-20℃保存，有效期两年。

产品应用

1. Ceturegel^®基质胶的融化与保存

【注】：Ceturegel^®基质胶对温度非常敏感，不可多次重复冻融。Ceturegel^®基质胶的分装以及凝胶前的准备过程中必须在冰上（4℃）操作，因为温度稍微提高，很可能出现成胶现象，从而导致基质胶不均匀或者影响后续凝胶，所使用耗材都必须进行预冷。

a）收到产品后，如果暂时不使用，请整瓶或分装为500 μL/支直接放到-20℃冻存（不要放在无霜冰箱内）。

b）第一次使用，将整瓶Ceturegel^®基质胶放入冰盒内再放到4℃过夜，使其充分融解。

c）Ceturegel^®基质胶的使用特别注意，基质胶在22-35℃能够快速成胶。可用无血清培养基来稀释基质胶，稀释后需要立即使用。

d）基质胶使用过程中如有气泡产生，可4℃瞬离15-30s。

2. 类器官培养过程（以24孔板为例，仅供参考）

1）解冻后的Ceturegel^®基质胶用类器官专用培养基进行混合，将混合液与细胞或组织进行混合，尽快操作以避免基质胶形成凝胶。

【注】：基质胶稀释比例≥50%以保证培养过程中Ceturegel^®基质胶结构的稳定性。

2）将类器官混合悬液种植于24孔板底部正中央，每孔20-30 μL左右，轻微平铺胶滴，使胶滴厚度在2 mm左右即可，但避免悬液接触孔板侧壁，并将种植后的培养板至于37℃二氧化碳恒温培养箱中，孵育20-30 min左右待基质胶凝固。

3）待Ceturegel^®基质胶完全凝固后，沿壁缓慢加入已配制好的类器官培养基，按照700-800 μL/孔。

4）将 24 孔板置于37℃二氧化碳培养箱中培养，定期更换新鲜类器官培养基并监测类器官生长状态。（培养类器官常用的是24孔板培养，按30 μL/孔形成胶滴，再加入500-800 μL类器官培养基覆盖胶滴；96孔板按10 μL/孔形成胶滴，再加入200 μL类器官培养基覆盖胶滴；6孔板每孔可以种植多个40 μL胶滴，加入2-3 mL类器官培养基覆盖胶滴）

产品特性

Ceturegel^®基质胶冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Ceturegel^®基质胶分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Ceturegel^®基质胶呈匀浆状。

【注】：可将融化后的Ceturegel^®分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。

Ceturegel^®在22-35℃温度环境下快速成胶，因此融化时在4℃冰上过夜解冻（4℃时会随着温度的上升部分成胶）。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作Ceturegel^®基质胶。成胶后的Ceturegel^®基质胶可以在4℃ 24-48小时后重新呈液态。

注意事项

1. 产品的分装、使用等操作需在无菌环境下进行，与产品接触的实验器材（如：枪头等）使用前需预冷。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅供科研使用，禁止用于人体。

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