NGS一链合成试剂盒 1st Strand Synthesis Kit
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FAQ
COA
已发表文献
Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Kit可用于全长一链cDNA的合成。其产物可以经过二链cDNA的合成后，直接进行测序接头的连接，构建测序文库。
产品组分
| 组分编号和名称 | 12249ES08 | 12249ES24 | 12249ES96 | |||
|
12249-A |
 |
Random Primer |
16 μL |
48 μL |
192 μL |
|
|
12249-B |
|
1st Strand Enzyme Mix |
16 μL |
48 μL |
192 μL |
|
|
12249–C |
|
10×1st Reaction Buffer |
16 μL |
48 μL |
192 μL |
|
运输与保存方法
干冰运输，-20°C存放。效期1年。
注意事项
1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZapTM 高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。
2. 建库需要的其他试剂需自备或另外购买。
3.本产品仅用作科研用途！
使用方法
Step 1 RNA变性
1. 将 Random Primer 室温解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。按照表1配置反应液：
表1 RNA预变性反应体系
|
名称 |
体积（μL） |
|
Random Primer |
2 |
|
RNA |
14 |
|
Total |
16 |
2. 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。于PCR仪上进行如下反应：（热盖80℃）70℃，5 min；立即置于冰上3 min。
Step 2 第一链cDNA的合成（1st Strand Synthesis）
1. 将第一链合成试剂从-20°C取出，室温解冻，颠倒混匀后瞬离。按表2所示，配制第一链cDNA合成的反应液。
表2 第一链cDNA合成反应体系
|
名称 |
体积（μL） |
|
变性的RNA |
16 |
|
10×1st Reaction Buffer |
2 |
|
1st Strand Enzyme Mix |
2 |
|
Total |
20 |
2.使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。于PCR仪上进行如下反应：（热盖105℃）25℃，5 min；37℃，45 min；85℃，5 s；4℃，hold。
3. 产物可直接用于二链cDNA的合成或于-80℃暂存。
HB220401
Hieff NGS® 1st cDNA Synthesis Kit可用于全长一链cDNA的合成。其产物可以经过二链cDNA的合成后，直接进行测序接头的连接，构建测序文库。
产品组分
| 组分编号和名称 | 12249ES08 | 12249ES24 | 12249ES96 | |||
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12249-A |
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Random Primer |
16 μL |
48 μL |
192 μL |
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12249-B |
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1st Strand Enzyme Mix |
16 μL |
48 μL |
192 μL |
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12249–C |
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10×1st Reaction Buffer |
16 μL |
48 μL |
192 μL |
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运输与保存方法
干冰运输，-20°C存放。效期1年。
注意事项
1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZapTM 高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。
2. 建库需要的其他试剂需自备或另外购买。
3.本产品仅用作科研用途！
使用方法
Step 1 RNA变性
1. 将 Random Primer 室温解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。按照表1配置反应液：
表1 RNA预变性反应体系
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名称 |
体积（μL） |
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Random Primer |
2 |
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RNA |
14 |
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Total |
16 |
2. 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。于PCR仪上进行如下反应：（热盖80℃）70℃，5 min；立即置于冰上3 min。
Step 2 第一链cDNA的合成（1st Strand Synthesis）
1. 将第一链合成试剂从-20°C取出，室温解冻，颠倒混匀后瞬离。按表2所示，配制第一链cDNA合成的反应液。
表2 第一链cDNA合成反应体系
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名称 |
体积（μL） |
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变性的RNA |
16 |
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10×1st Reaction Buffer |
2 |
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1st Strand Enzyme Mix |
2 |
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Total |
20 |
2.使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。于PCR仪上进行如下反应：（热盖105℃）25℃，5 min；37℃，45 min；85℃，5 s；4℃，hold。
3. 产物可直接用于二链cDNA的合成或于-80℃暂存。
HB220401
暂无内容
[1] Cheng GF, Kong WG, Zhai X, et al. Molecular cloning and expression analysis of CD79a and CD79b in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) after bacterial, parasitic, and viral infection. Fish Shellfish Immunol. 2021;118:385-395. doi:10.1016/j.fsi.2021.09.022(IF:4.581)