DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶|Taq DNA Polymerase

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DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶|Taq DNA Polymerase

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产品描述

 
Hieff® Taq DNA Polymerase是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶，分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性，无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3’-dA，可直接用于TA克隆。

 

产品组分

 

编号

组分

产品编号/规格

10101ES80（1,000 U）

10101ES92（10,000 U）

10101-A

10×Taq Buffer (Mg2+ Free)

4×1   mL

4×10   mL

10101-B

25   mM MgCl2

2×1 mL

2×10 mL

10101-C

Hieff® Taq DNA Polymerase   (5 U/μL)

200 μL

2×1 mL

 

产品应用

 

基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR。

 

活性定义

 

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

 

质量控制

 

核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

切口酶残留检测：10 U本品和0.5 μg IL23R质粒，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测：10 U本品和0.5 μg 293T细胞总RNA，37℃下孵育1 h，RNA的电泳谱带无变化。

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。

 

注意事项

 

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

 

PCR反应体系（冰上配制）

 

组分

体积（μL）                    

终浓度

ddH2O

to 50  

–

10×Taq   Buffer (Mg2+ Free)

5

1×

25   mM MgCl2

3

1.5   mM

dNTP   Mix (10 mM each)

1 μL

0.2   mM

模板DNA

optional

–

引物1(10   μM)

2 μL

0.4   μM

引物2(10 μM)

2 μL

0.4   μM

Hieff®   Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.4 μL

0.04   U/μL

【注】:1）Mg2+ 终浓度：Mg2+最佳浓度为1.5-2 mM，如有需要，可0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。
2）聚合酶添加：室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性，为了防止非特异性扩增，建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
3）聚合酶浓度：推荐使用0.04 U/μL。可以在0.025-0.04 U/ μL之间进行优化。
4）不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）：

模板种类

扩增片段

基因组DNA

50   ng-100 ng

质粒DNA

10   pg-20 ng

cDNA

1-5   μL（不超过反应体系的1/10）

 

PCR扩增程序

 

循环步骤

温度（ºC）

时间

循环数

预变性

94

30 sec-5 min

1

变性

94

30 sec

  

退火

50-60

30 sec

35

延伸

72

60 sec/kb

  

终延伸

72

10 min

1

【注】: 1）预变性温度和时间：推荐使用94℃。预变性推荐时间：质粒DNA等简单模板为30 sec；cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min；高GC含量模板为5-10 min。
2）退火温度和时间：推荐使用60℃，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。 
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。

 

HB220701

 

DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶|Taq DNA Polymerase

暂无内容

[1] Lu Z, Yang S, Yuan X, et al. CRISPR-assisted multi-dimensional regulation for fine-tuning gene expression in Bacillus subtilis. Nucleic Acids Res. 2019;47(7):e40. doi:10.1093/nar/gkz072(IF:11.147)
[2] Chen X, Liang H, Xi Z, et al. BM-MSC Transplantation Alleviates Intracerebral Hemorrhage-Induced Brain Injury, Promotes Astrocytes Vimentin Expression, and Enhances Astrocytes Antioxidation via the Cx43/Nrf2/HO-1 Axis. Front Cell Dev Biol. 2020;8:302. Published 2020 May 8. doi:10.3389/fcell.2020.00302(IF:5.186)
[3] Fu C, Xu J, Jia Z, Yao K, Chen X. Cataract-causing mutations L45P and Y46D promote γC-crystallin aggregation by disturbing hydrogen bonds network in the second Greek key motif. Int J Biol Macromol. 2021;167:470-478. doi:10.1016/j.ijbiomac.2020.11.158(IF:5.162)
[4] Chen X, Xu CX, Liang H, et al. Bone marrow mesenchymal stem cells transplantation alleviates brain injury after intracerebral hemorrhage in mice through the Hippo signaling pathway. Aging (Albany NY). 2020;12(7):6306-6323. doi:10.18632/aging.103025(IF:4.831)
[5] Fu C, Xu J, Yang X, Chen X, Yao K. Cataract-causing mutations L45P and Y46D impair the thermal stability of γC-crystallin. Biochem Biophys Res Commun. 2021;539:70-76. doi:10.1016/j.bbrc.2020.12.096(IF:3.575)
[6] Fei ZY, Wang WS, Li SF, et al. High expression of the TEFM gene predicts poor prognosis in hepatocellular carcinoma. J Gastrointest Oncol. 2020;11(6):1291-1304. doi:10.21037/jgo-20-120(IF:2.536)
[7] Zhang L, Li Y, Bao H, et al. Population structure and antimicrobial profile of Staphylococcus aureus strains associated with bovine mastitis in China. Microb Pathog. 2016;97:103-109. doi:10.1016/j.micpath.2016.06.005(IF:1.888)

产品描述

 
Hieff® Taq DNA Polymerase是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶，分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性，无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3’-dA，可直接用于TA克隆。

 

产品组分

 

编号

组分

产品编号/规格

10101ES80（1,000 U）

10101ES92（10,000 U）

10101-A

10×Taq Buffer (Mg2+ Free)

4×1   mL

4×10   mL

10101-B

25   mM MgCl2

2×1 mL

2×10 mL

10101-C

Hieff® Taq DNA Polymerase   (5 U/μL)

200 μL

2×1 mL

 

产品应用

 

基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR。

 

活性定义

 

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

 

质量控制

 

核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

切口酶残留检测：10 U本品和0.5 μg IL23R质粒，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测：10 U本品和0.5 μg 293T细胞总RNA，37℃下孵育1 h，RNA的电泳谱带无变化。

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。

 

注意事项

 

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

 

PCR反应体系（冰上配制）

 

组分

体积（μL）                    

终浓度

ddH2O

to 50  

–

10×Taq   Buffer (Mg2+ Free)

5

1×

25   mM MgCl2

3

1.5   mM

dNTP   Mix (10 mM each)

1 μL

0.2   mM

模板DNA

optional

–

引物1(10   μM)

2 μL

0.4   μM

引物2(10 μM)

2 μL

0.4   μM

Hieff®   Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.4 μL

0.04   U/μL

【注】:1）Mg2+ 终浓度：Mg2+最佳浓度为1.5-2 mM，如有需要，可0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。
2）聚合酶添加：室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性，为了防止非特异性扩增，建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
3）聚合酶浓度：推荐使用0.04 U/μL。可以在0.025-0.04 U/ μL之间进行优化。
4）不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）：

模板种类

扩增片段

基因组DNA

50   ng-100 ng

质粒DNA

10   pg-20 ng

cDNA

1-5   μL（不超过反应体系的1/10）

 

PCR扩增程序

 

循环步骤

温度（ºC）

时间

循环数

预变性

94

30 sec-5 min

1

变性

94

30 sec

  

退火

50-60

30 sec

35

延伸

72

60 sec/kb

  

终延伸

72

10 min

1

【注】: 1）预变性温度和时间：推荐使用94℃。预变性推荐时间：质粒DNA等简单模板为30 sec；cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min；高GC含量模板为5-10 min。
2）退火温度和时间：推荐使用60℃，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。 
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。

 

HB220701

 

DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶|Taq DNA Polymerase

暂无内容

[1] Lu Z, Yang S, Yuan X, et al. CRISPR-assisted multi-dimensional regulation for fine-tuning gene expression in Bacillus subtilis. Nucleic Acids Res. 2019;47(7):e40. doi:10.1093/nar/gkz072(IF:11.147)
[2] Chen X, Liang H, Xi Z, et al. BM-MSC Transplantation Alleviates Intracerebral Hemorrhage-Induced Brain Injury, Promotes Astrocytes Vimentin Expression, and Enhances Astrocytes Antioxidation via the Cx43/Nrf2/HO-1 Axis. Front Cell Dev Biol. 2020;8:302. Published 2020 May 8. doi:10.3389/fcell.2020.00302(IF:5.186)
[3] Fu C, Xu J, Jia Z, Yao K, Chen X. Cataract-causing mutations L45P and Y46D promote γC-crystallin aggregation by disturbing hydrogen bonds network in the second Greek key motif. Int J Biol Macromol. 2021;167:470-478. doi:10.1016/j.ijbiomac.2020.11.158(IF:5.162)
[4] Chen X, Xu CX, Liang H, et al. Bone marrow mesenchymal stem cells transplantation alleviates brain injury after intracerebral hemorrhage in mice through the Hippo signaling pathway. Aging (Albany NY). 2020;12(7):6306-6323. doi:10.18632/aging.103025(IF:4.831)
[5] Fu C, Xu J, Yang X, Chen X, Yao K. Cataract-causing mutations L45P and Y46D impair the thermal stability of γC-crystallin. Biochem Biophys Res Commun. 2021;539:70-76. doi:10.1016/j.bbrc.2020.12.096(IF:3.575)
[6] Fei ZY, Wang WS, Li SF, et al. High expression of the TEFM gene predicts poor prognosis in hepatocellular carcinoma. J Gastrointest Oncol. 2020;11(6):1291-1304. doi:10.21037/jgo-20-120(IF:2.536)
[7] Zhang L, Li Y, Bao H, et al. Population structure and antimicrobial profile of Staphylococcus aureus strains associated with bovine mastitis in China. Microb Pathog. 2016;97:103-109. doi:10.1016/j.micpath.2016.06.005(IF:1.888)