Bst Plus DNA聚合酶(40 U/μL)|Bst Plus DNA Polymerase

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff® Bst Plus DNA Polymerase来源于Thermophilic Geobacillus sp DNA Polymerase I,经基因工程改造去除了其5’-3’核酸外切酶活性。本产品具有强5’-3’ DNA聚合酶活性、链置换活性及dUTP耐受性,更适合于防污染的等温扩增反应,如LAMPCPA等。

 

产品组分

编号

组分名称

产品编号/规格

14402ES92 (8,000 U)

14402ES97 (40,000 U)

14402-A

Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

200 μL

1 mL

14402-B

10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer

1 mL

3 × 1 mL

14402-C

100 mM MgSO4

1 mL

3 × 1 mL

 

产品应用

本产品适用于LAMPCPARCA等多种等温扩增反应。

 

单位定义

1 U65℃条件下反应30 min,能使10 nmoldNTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。

 

酶保存液成分

10 mM Tris-HCl50 mM KCl0.1 mM EDTA1 mM DTT0.1% Triton X-10050%甘油pH 7.5 @ 25℃

 

热失活

85℃5 min

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

2. 本产品仅做科研用途;

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

LAMP实验案例

1、反应体系配制

组分

体积 (μL)

终浓度

10×Reaction Buffer

2.5

100 mM MgSO4

0.75

3 mM+2 mM in buffer=5 mM

dNTP Mix (25 mM each)

1.4

1.4 mM each

dUTP (25 mM) 选加

1.4

1.4 mM

UDGase (1 U/μL) 选加

1

0.04 U

模板DNA

10 ng~1 μg

10×Primers 

2.5

Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

1*

1.6 U/μL

ddH2O

to 25

【注】1. *:根据不同实验,Hieff® Bst Plus DNA Polymerase添加量可进行调整优化;

2. 10×Reaction Buffer200 mM Tris-HCl500 mM KCl100 mM (NH4)2S0420 mM MgS041% Tween-20pH 8.8 @ 25℃ 

3. 根据不同的实验,Mg2+浓度可在4–10 mM之间调整。

4. 10× Primers16 µM FIP/BIP2 µM F3/B34 µM Loop F/B each

5. 本公司dNTPCat#10124dUTPCat#10128)和UDGaseCat#10303)可以与本品配套使用。

2、反应条件

温度

时间

作用

25~37°C

5~10 min

降解含U模板(选做)

65°C

30~60 min

反应

85℃

5 min

失活

HB220923

 

Bst  Plus DNA聚合酶(40 U/μL)|Bst Plus DNA Polymerase

暂无内容

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Hieff® Bst Plus DNA Polymerase来源于Thermophilic Geobacillus sp DNA Polymerase I,经基因工程改造去除了其5’-3’核酸外切酶活性。本产品具有强5’-3’ DNA聚合酶活性、链置换活性及dUTP耐受性,更适合于防污染的等温扩增反应,如LAMPCPA等。

 

产品组分

编号

组分名称

产品编号/规格

14402ES92 (8,000 U)

14402ES97 (40,000 U)

14402-A

Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

200 μL

1 mL

14402-B

10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer

1 mL

3 × 1 mL

14402-C

100 mM MgSO4

1 mL

3 × 1 mL

 

产品应用

本产品适用于LAMPCPARCA等多种等温扩增反应。

 

单位定义

1 U65℃条件下反应30 min,能使10 nmoldNTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。

 

酶保存液成分

10 mM Tris-HCl50 mM KCl0.1 mM EDTA1 mM DTT0.1% Triton X-10050%甘油pH 7.5 @ 25℃

 

热失活

85℃5 min

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

2. 本产品仅做科研用途;

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

LAMP实验案例

1、反应体系配制

组分

体积 (μL)

终浓度

10×Reaction Buffer

2.5

100 mM MgSO4

0.75

3 mM+2 mM in buffer=5 mM

dNTP Mix (25 mM each)

1.4

1.4 mM each

dUTP (25 mM) 选加

1.4

1.4 mM

UDGase (1 U/μL) 选加

1

0.04 U

模板DNA

10 ng~1 μg

10×Primers 

2.5

Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

1*

1.6 U/μL

ddH2O

to 25

【注】1. *:根据不同实验,Hieff® Bst Plus DNA Polymerase添加量可进行调整优化;

2. 10×Reaction Buffer200 mM Tris-HCl500 mM KCl100 mM (NH4)2S0420 mM MgS041% Tween-20pH 8.8 @ 25℃ 

3. 根据不同的实验,Mg2+浓度可在4–10 mM之间调整。

4. 10× Primers16 µM FIP/BIP2 µM F3/B34 µM Loop F/B each

5. 本公司dNTPCat#10124dUTPCat#10128)和UDGaseCat#10303)可以与本品配套使用。

2、反应条件

温度

时间

作用

25~37°C

5~10 min

降解含U模板(选做)

65°C

30~60 min

反应

85℃

5 min

失活

HB220923

 

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