耐高盐全能核酸酶(Salt Active UltraNuclease)同Benzonase Nuclease
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FAQ
COA
已发表文献
Salt Active UltraNuclease GMP-grade(耐高盐全能核酸酶)是一种来源于海洋微生物的重组非特异性核酸内切酶,与UltraNuclease相比在0.5M NaCl条件下具有最佳活性,广泛应用于生产工艺流程中,有效去除核酸污染。
本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(25 mM Tris-HCl,5 mM MgCl2,500 mM NaCl,50% Glycerol,pH 7.5)中,无色透明液体。
产品性质
来源 |
E. coli |
分子量(Molecular Weight) |
24.7 kDa |
等电点 |
9.61 |
纯度(Purity) |
≥ 99% |
酶活(Enzyme Activity) |
250-300 U/μL |
温度(Optimum Temperature) |
37℃(工作范围0-42℃) |
辅助因子(Cofactor) |
1-10 mM Mg2+ |
储存缓冲液(Storage Buffer) |
25 mM Tris-HCl,5 mM MgCl2,500 mM NaCl,50% Glycerol,pH 7.5 |
活性单位定义(Unit Definition) |
一定条件下,在底物过量时 37℃ ,30 min 内 260 nm 处吸光值变化 1.0 所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。 |
运输和保存方法
干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存,有效期2年。若是打开包装后并4℃放置超过一周,建议过滤除菌防止微生物污染。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1、样本准备
贴壁细胞:去除培养基,用PBS清洗细胞,去除上清。
悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。
大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)。
3、酶的添加
1. 添加适量MgCl2将反应体系中的Mg2+ 浓度调整在1-5 mM范围内,将pH调整成7.5-9。
2.按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加Salt Active UltraNuclease,37℃孵育30min以上。也可以自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。
【注】耐高盐全能核酸酶的酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响,初次使用时建议摸索最适浓度。
4、上清获取
以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。
【注】若溶液偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
HB220922
Salt Active UltraNuclease GMP-grade(耐高盐全能核酸酶)是一种来源于海洋微生物的重组非特异性核酸内切酶,与UltraNuclease相比在0.5M NaCl条件下具有最佳活性,广泛应用于生产工艺流程中,有效去除核酸污染。
本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(25 mM Tris-HCl,5 mM MgCl2,500 mM NaCl,50% Glycerol,pH 7.5)中,无色透明液体。
产品性质
来源 |
E. coli |
分子量(Molecular Weight) |
24.7 kDa |
等电点 |
9.61 |
纯度(Purity) |
≥ 99% |
酶活(Enzyme Activity) |
250-300 U/μL |
温度(Optimum Temperature) |
37℃(工作范围0-42℃) |
辅助因子(Cofactor) |
1-10 mM Mg2+ |
储存缓冲液(Storage Buffer) |
25 mM Tris-HCl,5 mM MgCl2,500 mM NaCl,50% Glycerol,pH 7.5 |
活性单位定义(Unit Definition) |
一定条件下,在底物过量时 37℃ ,30 min 内 260 nm 处吸光值变化 1.0 所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。 |
运输和保存方法
干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存,有效期2年。若是打开包装后并4℃放置超过一周,建议过滤除菌防止微生物污染。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1、样本准备
贴壁细胞:去除培养基,用PBS清洗细胞,去除上清。
悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。
大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)。
3、酶的添加
1. 添加适量MgCl2将反应体系中的Mg2+ 浓度调整在1-5 mM范围内,将pH调整成7.5-9。
2.按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加Salt Active UltraNuclease,37℃孵育30min以上。也可以自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。
【注】耐高盐全能核酸酶的酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响,初次使用时建议摸索最适浓度。
4、上清获取
以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。
【注】若溶液偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
HB220922
Q:你们有FDA的备案吗?(你们能提供备案凭证吗?提供申报材料?)
A:我们有DMF的备案证,如果后面后申报需求,我们可以提供全套的申报材料也可以协助申报。
Q:全能核酸酶残留检测的检测下限是多少?
A:检测下限 23 pg/mL,采用的是ELISA的方式,标曲范围:0.047~3 ng/mL。
Q:这个酶的稳定性怎么样?
A:酶稳定性这块我们做过温度、ph、磷酸根离子、sds、反复冻融,运输等测试,均有不错的结果,具体实验数据老师如果有需要我们可以提供。
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