5'App T4 DNA连接酶 T4 DNA ligase,2000 U/µL
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COA
已发表文献
Hieff® 5'App T4 DNA Ligase可以特异性地将DNA预腺苷酸化的5’末端连接到DNA的3’末端，该酶连接不需要ATP，但是需要预腺苷酸化底物。与常规T4 DNA Ligase不同，5'App T4 DNA Ligase不能将底物的5’端腺苷酸化，因此它不能将磷酸化DNA的5’端连接到DNA的3’末端。该酶非常适用于NGS建库过程中DNA片段和5’预腺苷酰酸化接头的连接，可以显著减少片段自连（嵌合体形成）。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
14960ES60 （100 KU） |
14960ES70 （200 KU） |
||
|
14960-A |
Hieff® 5'App T4 DNA Ligase (2000 U/μL) |
50 μL |
100 μL |
|
14960-B |
5× T4 DNA Ligase Buffer |
200 μL |
500 μL |
运输与保存方法
干冰运输，-25~-15°C保存，有效期1年。
注意事项
1. Buffer在溶解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途!
使用方法
与腺苷酸化接头的连接
1. 将所需试剂解冻后颠倒混匀，瞬时离心收集，置于冰上备用。
2. 在PCR管中配置以下反应体系（确保在冰上操作），使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，瞬时离心收集。
|
名称 |
体积 (μL) |
|
DNA片段 |
20 |
|
5× T4 DNA Ligase Buffer |
6 |
|
App-Adapter |
2 |
|
Hieff® 5'App T4 DNA Ligase (2000 U/μL) |
2 |
|
Total |
30 |
【注】：此体系即适用于平末端片段也适用于粘性末端片段的连接。
3. 将上述PCR管置于PCR仪，按照以下反应程序进行App接头连接
| 温度 | 时间 |
| 热盖105°C | Off |
| 20°C | 15 min |
| 4°C | Hold |
HB23010
Hieff® 5'App T4 DNA Ligase可以特异性地将DNA预腺苷酸化的5’末端连接到DNA的3’末端，该酶连接不需要ATP，但是需要预腺苷酸化底物。与常规T4 DNA Ligase不同，5'App T4 DNA Ligase不能将底物的5’端腺苷酸化，因此它不能将磷酸化DNA的5’端连接到DNA的3’末端。该酶非常适用于NGS建库过程中DNA片段和5’预腺苷酰酸化接头的连接，可以显著减少片段自连（嵌合体形成）。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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14960ES60 （100 KU） |
14960ES70 （200 KU） |
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14960-A |
Hieff® 5'App T4 DNA Ligase (2000 U/μL) |
50 μL |
100 μL |
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14960-B |
5× T4 DNA Ligase Buffer |
200 μL |
500 μL |
运输与保存方法
干冰运输，-25~-15°C保存，有效期1年。
注意事项
1. Buffer在溶解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途!
使用方法
与腺苷酸化接头的连接
1. 将所需试剂解冻后颠倒混匀，瞬时离心收集，置于冰上备用。
2. 在PCR管中配置以下反应体系（确保在冰上操作），使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，瞬时离心收集。
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名称 |
体积 (μL) |
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DNA片段 |
20 |
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5× T4 DNA Ligase Buffer |
6 |
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App-Adapter |
2 |
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Hieff® 5'App T4 DNA Ligase (2000 U/μL) |
2 |
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Total |
30 |
【注】：此体系即适用于平末端片段也适用于粘性末端片段的连接。
3. 将上述PCR管置于PCR仪，按照以下反应程序进行App接头连接
| 温度 | 时间 |
| 热盖105°C | Off |
| 20°C | 15 min |
| 4°C | Hold |
HB23010
暂无内容
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