内毒素高效去除纯化树脂 高效去除内毒素纯化树脂|Endotoxin Removal Agarose Resin,High Performance

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内毒素高效去除纯化树脂 高效去除内毒素纯化树脂|Endotoxin Removal Agarose Resin,High Performance

产品说明书

FAQ

COA

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产品简介

Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括蛋白、多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上，进行特异性去除内毒素，经纯化可将样品中内毒素降低至0.1 EU/mL，且样品回收率高。

 

产品信息

货号

20518ES10/ 20518ES60/20518ES76

规格

10 mL /100 mL / 500 mL

 

产品性质

基质（Matrix）

4%琼脂糖微球

配体（Ligand）

修饰过的多粘菌素B

粒径（Bead size）

45-165 µm

载量（Capacity）

＞2000000 EU/mL基质

最大压力（PressureMax）

0.1 MPa, 1bar

pH稳定范围（pH range）

5-10

储存缓冲液（Buffer）

20%乙醇

 

储存条件

2~8℃保存，有效期2年。

 

需准备试剂

所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理，防止在使用过程中引入内毒素。

平衡液：20 mM 磷酸盐，150 mM NaCl，pH7.4。

再生液：1% Triton X-114的平衡液

【注】平衡液和洗脱液可根据样品性质进行改变，建议pH7-8, NaCl约150 mM-500 mM。

 

使用说明

【注】a 样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子；

   b 内毒素结合柱子的最佳pH为6-9，因此样品pH最好控制在7-8；

   c 样品最好控制在适当的离子强度，减少非特异吸附，NaCl约150 mM-500 mM。

样品纯化（以1 mL树脂为例）

1）装柱：充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin，用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中，注意避免产生气泡，打开下出口去掉保护液，用3 mL再生液进行清洗，控制流速在0.25 mL/min，或＜10滴/min，温度控制在2~8℃，重复至少2次，确保柱中无内毒素。

2）平衡：用3 mL的平衡液平衡柱管内壁及树脂，流干，流速约0.5 mL/min，温度控制在2~8℃，重复至少两次。

 3）过柱及检测：将样品加到平衡好的树脂中，调节流速在0.25 mL/min，或＜10滴/min，当流出液流出约1 mL 时，开始收集流出液，流干后加入1 mL平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率。

【注】如果样品中内毒素含量仍高于目标值，继续重复1-3。

 

注意事项

1.本品可耐受试剂：20%DMSO,20%乙醇,20%甘油；1 M尿素,300 mM咪唑；0.05% Tween 20,10 mM DTT等。

2.本产品仅作科研用途。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

附表 问题及解决方案

问题

原因分析

推荐解决方案

内毒素去除效率低

样品pH值不在内毒素结合范围内

用0.1 M NaOH或0.1 M HCl调节至pH7-8

样品与树脂接触时间短

减少流速，增加样品接触时间

去除或检测系统被内毒素污染

所有试验用品均需无热源产品

内毒素与目的蛋白结合较强

优化样品pH，使样品与内毒素分离

增加接触时间

样品被污染

树脂纯化过其他样品

不用使用过的树脂去除不同样品内毒素

样品回收率低

样品非特异性吸附在树脂上

增加样品和平衡液的NaCl浓度

目的蛋白与内毒素结合一起被去除

优化样品pH，使样品与内毒素分离

 

Ver.CN20230719

Q：为什么内毒素去除效率低？

A：可能是样品pH 值不在内毒素结合范围内；建议用 0.1MNaOH 或 0.1M HCl 调节至 pH7-8。

Q：为什么样品被污染？

A：树脂纯化过其他样品；不用使用过的树脂去除不同样品内毒素。

Q：为什么样品回收率低？

A：可能是样品非特异性吸附在树脂上；建议增加样品和平衡液的NaCl 浓度。

Q：本品可耐受哪些试剂？

A：20%DMSO，20%乙醇，20%甘油；1M 尿素，300mM 咪唑；0.05% Tween 20， 10mM DTT 等。

Q：如何确定需要使用的填料体积？

A：可根据填料的内毒素载量，可检测自己样品中的内毒素含量确定；如果实在无条件检测自己样品中的内毒素的含量，初次实验可按照填料：样品体积比=1：1或1：2上样。

[1] Xia B, Shen X, He Y, et al. SARS-CoV-2 envelope protein causes acute respiratory distress syndrome (ARDS)-like pathological damages and constitutes an antiviral target. Cell Res. 2021;31(8):847-860. doi:10.1038/s41422-021-00519-4(IF:25.617)
[2] Li J, Qin X, Shi J, et al. A systematic CRISPR screen reveals an IL-20/IL20RA-mediated immune crosstalk to prevent the ovarian cancer metastasis. Elife. 2021;10:e66222. Published 2021 Jun 11. doi:10.7554/eLife.66222(IF:8.146)
[3] Wu J, Yang H, Xu JC, et al. Mycobacterium tuberculosis Rv3628 isan effective adjuvant via activationof dendritic cells for cancer immunotherapy. Mol Ther Oncolytics. 2021;23:288-302. Published 2021 Oct 20. doi:10.1016/j.omto.2021.10.003(IF:7.200)
[4] Hassan Z, Wang J, Qin Y, et al. Functional characterization of an interleukin 20 like homologue in grass carp Ctenopharyngodon idella. Fish Shellfish Immunol. 2021;115:43-57. doi:10.1016/j.fsi.2021.05.009(IF:4.581)
[5] Zhang A, Jian X, Wang D, Ren J, Wang X, Zhou H. Characterization and bioactivity of grass carp (Ctenopharyngodon idella) interleukin-21: Inducible production and involvement in inflammatory regulation. Fish Shellfish Immunol. 2020;99:19-26. doi:10.1016/j.fsi.2020.01.059(IF:4.581)
[6] Qiu X, Wang D, Lv M, et al. Identification and functional characterization of interleukin-12 receptor beta 1 and 2 in grass carp (Ctenopharyngodon idella). Mol Immunol. 2022;143:58-67. doi:10.1016/j.molimm.2022.01.007(IF:4.407)
[7] Yin L, Ren J, Wang D, et al. Functional characterization of three fish-specific interleukin-23 isoforms as regulators of Th17 signature cytokine expression in grass carp head kidney leukocytes. Fish Shellfish Immunol. 2019;92:315-321. doi:10.1016/j.fsi.2019.06.028(IF:3.298)
[8] Zang L, Wang J, Ren Y, et al. Activated toll-like receptor 4 is involved in oridonin-induced phagocytosis via promotion of migration and autophagy-lysosome pathway in RAW264.7 macrophages. Int Immunopharmacol. 2019;66:99-108. doi:10.1016/j.intimp.2018.11.014(IF:3.118)

产品简介

Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括蛋白、多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上，进行特异性去除内毒素，经纯化可将样品中内毒素降低至0.1 EU/mL，且样品回收率高。

 

产品信息

货号

20518ES10/ 20518ES60/20518ES76

规格

10 mL /100 mL / 500 mL

 

产品性质

基质（Matrix）

4%琼脂糖微球

配体（Ligand）

修饰过的多粘菌素B

粒径（Bead size）

45-165 µm

载量（Capacity）

＞2000000 EU/mL基质

最大压力（PressureMax）

0.1 MPa, 1bar

pH稳定范围（pH range）

5-10

储存缓冲液（Buffer）

20%乙醇

 

储存条件

2~8℃保存，有效期2年。

 

需准备试剂

所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理，防止在使用过程中引入内毒素。

平衡液：20 mM 磷酸盐，150 mM NaCl，pH7.4。

再生液：1% Triton X-114的平衡液

【注】平衡液和洗脱液可根据样品性质进行改变，建议pH7-8, NaCl约150 mM-500 mM。

 

使用说明

【注】a 样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子；

   b 内毒素结合柱子的最佳pH为6-9，因此样品pH最好控制在7-8；

   c 样品最好控制在适当的离子强度，减少非特异吸附，NaCl约150 mM-500 mM。

样品纯化（以1 mL树脂为例）

1）装柱：充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin，用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中，注意避免产生气泡，打开下出口去掉保护液，用3 mL再生液进行清洗，控制流速在0.25 mL/min，或＜10滴/min，温度控制在2~8℃，重复至少2次，确保柱中无内毒素。

2）平衡：用3 mL的平衡液平衡柱管内壁及树脂，流干，流速约0.5 mL/min，温度控制在2~8℃，重复至少两次。

 3）过柱及检测：将样品加到平衡好的树脂中，调节流速在0.25 mL/min，或＜10滴/min，当流出液流出约1 mL 时，开始收集流出液，流干后加入1 mL平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率。

【注】如果样品中内毒素含量仍高于目标值，继续重复1-3。

 

注意事项

1.本品可耐受试剂：20%DMSO,20%乙醇,20%甘油；1 M尿素,300 mM咪唑；0.05% Tween 20,10 mM DTT等。

2.本产品仅作科研用途。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

附表 问题及解决方案

问题

原因分析

推荐解决方案

内毒素去除效率低

样品pH值不在内毒素结合范围内

用0.1 M NaOH或0.1 M HCl调节至pH7-8

样品与树脂接触时间短

减少流速，增加样品接触时间

去除或检测系统被内毒素污染

所有试验用品均需无热源产品

内毒素与目的蛋白结合较强

优化样品pH，使样品与内毒素分离

增加接触时间

样品被污染

树脂纯化过其他样品

不用使用过的树脂去除不同样品内毒素

样品回收率低

样品非特异性吸附在树脂上

增加样品和平衡液的NaCl浓度

目的蛋白与内毒素结合一起被去除

优化样品pH，使样品与内毒素分离

 

Ver.CN20230719

Q：为什么内毒素去除效率低？

A：可能是样品pH 值不在内毒素结合范围内；建议用 0.1MNaOH 或 0.1M HCl 调节至 pH7-8。

Q：为什么样品被污染？

A：树脂纯化过其他样品；不用使用过的树脂去除不同样品内毒素。

Q：为什么样品回收率低？

A：可能是样品非特异性吸附在树脂上；建议增加样品和平衡液的NaCl 浓度。

Q：本品可耐受哪些试剂？

A：20%DMSO，20%乙醇，20%甘油；1M 尿素，300mM 咪唑；0.05% Tween 20， 10mM DTT 等。

Q：如何确定需要使用的填料体积？

A：可根据填料的内毒素载量，可检测自己样品中的内毒素含量确定；如果实在无条件检测自己样品中的内毒素的含量，初次实验可按照填料：样品体积比=1：1或1：2上样。

[1] Xia B, Shen X, He Y, et al. SARS-CoV-2 envelope protein causes acute respiratory distress syndrome (ARDS)-like pathological damages and constitutes an antiviral target. Cell Res. 2021;31(8):847-860. doi:10.1038/s41422-021-00519-4(IF:25.617)
[2] Li J, Qin X, Shi J, et al. A systematic CRISPR screen reveals an IL-20/IL20RA-mediated immune crosstalk to prevent the ovarian cancer metastasis. Elife. 2021;10:e66222. Published 2021 Jun 11. doi:10.7554/eLife.66222(IF:8.146)
[3] Wu J, Yang H, Xu JC, et al. Mycobacterium tuberculosis Rv3628 isan effective adjuvant via activationof dendritic cells for cancer immunotherapy. Mol Ther Oncolytics. 2021;23:288-302. Published 2021 Oct 20. doi:10.1016/j.omto.2021.10.003(IF:7.200)
[4] Hassan Z, Wang J, Qin Y, et al. Functional characterization of an interleukin 20 like homologue in grass carp Ctenopharyngodon idella. Fish Shellfish Immunol. 2021;115:43-57. doi:10.1016/j.fsi.2021.05.009(IF:4.581)
[5] Zhang A, Jian X, Wang D, Ren J, Wang X, Zhou H. Characterization and bioactivity of grass carp (Ctenopharyngodon idella) interleukin-21: Inducible production and involvement in inflammatory regulation. Fish Shellfish Immunol. 2020;99:19-26. doi:10.1016/j.fsi.2020.01.059(IF:4.581)
[6] Qiu X, Wang D, Lv M, et al. Identification and functional characterization of interleukin-12 receptor beta 1 and 2 in grass carp (Ctenopharyngodon idella). Mol Immunol. 2022;143:58-67. doi:10.1016/j.molimm.2022.01.007(IF:4.407)
[7] Yin L, Ren J, Wang D, et al. Functional characterization of three fish-specific interleukin-23 isoforms as regulators of Th17 signature cytokine expression in grass carp head kidney leukocytes. Fish Shellfish Immunol. 2019;92:315-321. doi:10.1016/j.fsi.2019.06.028(IF:3.298)
[8] Zang L, Wang J, Ren Y, et al. Activated toll-like receptor 4 is involved in oridonin-induced phagocytosis via promotion of migration and autophagy-lysosome pathway in RAW264.7 macrophages. Int Immunopharmacol. 2019;66:99-108. doi:10.1016/j.intimp.2018.11.014(IF:3.118)