双链DNA(dsDNA)荧光定量检测试剂盒|dsDNA HS Assay Kit for Qubit®

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双链DNA(dsDNA)荧光定量检测试剂盒|dsDNA HS Assay Kit for Qubit®

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

qubit试剂搭配酶标仪操作流程

 

产品描述

dsDNA HS Assay Kit是一种快速、灵敏、精确的双链DNA（dsDNA）荧光定量检测试剂盒。本试剂盒对dsDNA具有高度选择性，在0.2-100 ng区间具有很好的线性关系。本试剂盒操作简单方便，使用时只需将检测工作液与待测dsDNA样品混合，即可使用Qubit荧光仪或荧光酶标仪进行读数。操作简单，结果可靠，是NGS大规模DNA样品定量（如Input DNA定量、DNA文库定量等）的理想选择。本试剂盒对常规的污染物如蛋白质、盐类等具有较好的耐受性。

 

产品组分

编号

组分名称

浓度

12640ES60

12640ES76

12640-A

dsDNA Reagent

200×concentrate in DMSO

250 μL

1.25 mL

12640-B

dsDNA Buffer

Not applicable

50 mL

250 mL

12640-C

dsDNA Standard 1

0 ng/μL in TE buffer

1 mL

5×1 mL

12640-D

dsDNA Standard 2

10 ng/μL in TE buffer

1 mL

5×1 mL

 

运输和保存

冰袋运输，2-8℃避光保存12个月。

 

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭；

2）对于DNA标准品，每次使用前先上下颠倒数次后瞬时离心数秒（请勿涡旋振荡）；

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅用作科研用途！

 

实验步骤

一、使用Qubit荧光仪进行dsDNA定量检测分析

双链DNA(dsDNA)荧光定量检测试剂盒|dsDNA HS Assay Kit for Qubit®

 

污染物对dsDNA定量检测试剂盒检测结果的影响

污染物

10 µL样品中的浓度

样品检测时浓度

检测结果

Salts

Ammonium acetate

200 mM

10 mM

OK

Sodium acetate

200 mM

10 mM

OK

Sodium chloride

200 mM

10 mM

OK

Magnesium chloride

40 mM

2 mM

OK

Organic Solvents

Phenol

2%

0.1%

OK

Ethanol

20%

1%

OK

Chloroform

4%

0.2%

OK

Detergents

Sodium dodecyl sulfate

0.2%

0.01%

OK

Triton X-100

0.02%

0.001%

OK

Other Compounds

Bovine serum albumin

400 μg/mL

20 μg/mL

OK

RNA

1×*

1×*

OK

dNTPs

2 mM

100 μM

OK

Polyethylene glycol

20%

1%

OK

Agarose

2%

0.1%

OK

*1×：表示含有与dsDNA相同浓度的RNA。                                                             

HB221117

Q: 12640和12642的区别是什么?

A：12640染料和buffer分开的，使用的时候要配工作液。12642为预混液，直接加入样品即可测定浓度，不需要配制染料工作液。

Q：12640-A 组分放在 4 度冻住了？

A: 该现象属于正常现象。12640 包含以下组分，其中 A 组分为荧光染料母液，含有DMSO，DMSO 低温易凝固，使得看上去A 管像被冻住一样，该现象其实并不是常规意义上的“结冰”冻住，所以不会影响其中荧光染料的性能。

Q: 产品成分只有两个标准品，制作标准曲线的时候需要对 standard 2 进行多梯度稀释吗？

A: 使用Qubit定量的时根据操作步骤两个标准品即可。如果使用酶标仪等，需要多个梯度制作标准曲线，可以使用 1×TE 对standard 2 进行梯度稀释。

Q: 用酶标仪代替Qubit检测，如何选择酶标板？波长如何设定？

A: 选择黑色的酶标板。波长：Ex=480 nm，Em=520 nm。

Q：标准品荧光值与之前使用的有差异？一般标准品的荧光值应该是多少呢？

A：标准品没有一个确定的荧光值，且不同的仪器之间可能都有差异。可多做几个复孔或者多做几个梯度，呈线性关系即可。

[1] Duan XZ, Sun JT, Wang LT, et al. Recent infection by Wolbachia alters microbial communities in wild Laodelphax striatellus populations. Microbiome. 2020;8(1):104. Published 2020 Jul 2. doi:10.1186/s40168-020-00878-x(IF:11.607)
[2] Zhang Y, An C, Zhang Y, et al. Microfluidic-templating alginate microgels crosslinked by different metal ions as engineered microenvironment to regulate stem cell behavior for osteogenesis. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;131:112497. doi:10.1016/j.msec.2021.112497(IF:7.328)
[3] An C, Liu W, Zhang Y, et al. Continuous microfluidic encapsulation of single mesenchymal stem cells using alginate microgels as injectable fillers for bone regeneration. Acta Biomater. 2020;111:181-196. doi:10.1016/j.actbio.2020.05.024(IF:7.242)
[4] An C, Zhang Y, Li H, et al. Thermo-responsive fluorinated surfactant for on-demand demulsification of microfluidic droplets. Lab Chip. 2021;21(18):3412-3419. Published 2021 Sep 14. doi:10.1039/d1lc00450f(IF:6.799)
[5] Gu L, Ren F, Fang X, Yuan L, Liu G, Wang S. Exosomal MicroRNA-181a Derived From Mesenchymal Stem Cells Improves Gut Microbiota Composition, Barrier Function, and Inflammatory Status in an Experimental Colitis Model. Front Med (Lausanne). 2021;8:660614. Published 2021 Jun 24. doi:10.3389/fmed.2021.660614(IF:5.093)
[6] Zhao H, Tang X, Wu M, et al. Transcriptome Characterization of Short Distance Transport Stress in Beef Cattle Blood. Front Genet. 2021;12:616388. Published 2021 Feb 10. doi:10.3389/fgene.2021.616388(IF:4.599)
[7] Gao ZR, Liu Q, Zhao J, et al. A comprehensive analysis of the circRNA-miRNA-mRNA network in osteocyte-like cell associated with Mycobacterium leprae infection. PLoS Negl Trop Dis. 2022;16(5):e0010379. Published 2022 May 2. doi:10.1371/journal.pntd.0010379(IF:4.411)
[8] Li J, Li X, Li M, et al. Differential early diagnosis of benign versus malignant lung cancer using systematic pathway flux analysis of peripheral blood leukocytes. Sci Rep. 2022;12(1):5070. Published 2022 Mar 24. doi:10.1038/s41598-022-08890-x(IF:4.380)
[9] Liang H, Zhang X, Ma Z, et al. Association of CYP3A5 Gene Polymorphisms and Amlodipine-Induced Peripheral Edema in Chinese Han Patients with Essential Hypertension. Pharmgenomics Pers Med. 2021;14:189-197. Published 2021 Feb 2. doi:10.2147/PGPM.S291277(IF:3.912)
[10] Bing XL, Zhao DS, Peng CW, Huang HJ, Hong XY. Similarities and spatial variations of bacterial and fungal communities in field rice planthopper (Hemiptera: Delphacidae) populations. Insect Sci. 2020;27(5):947-963. doi:10.1111/1744-7917.12782(IF:2.791)
[11] Zhang Y, Dai J, Yan L, Sun Y. Intra-articular injection of decellularized extracellular matrices in the treatment of osteoarthritis in rabbits. PeerJ. 2020;8:e8972. Published 2020 Apr 22. doi:10.7717/peerj.8972(IF:2.379)

qubit试剂搭配酶标仪操作流程

 

产品描述

dsDNA HS Assay Kit是一种快速、灵敏、精确的双链DNA（dsDNA）荧光定量检测试剂盒。本试剂盒对dsDNA具有高度选择性，在0.2-100 ng区间具有很好的线性关系。本试剂盒操作简单方便，使用时只需将检测工作液与待测dsDNA样品混合，即可使用Qubit荧光仪或荧光酶标仪进行读数。操作简单，结果可靠，是NGS大规模DNA样品定量（如Input DNA定量、DNA文库定量等）的理想选择。本试剂盒对常规的污染物如蛋白质、盐类等具有较好的耐受性。

 

产品组分

编号

组分名称

浓度

12640ES60

12640ES76

12640-A

dsDNA Reagent

200×concentrate in DMSO

250 μL

1.25 mL

12640-B

dsDNA Buffer

Not applicable

50 mL

250 mL

12640-C

dsDNA Standard 1

0 ng/μL in TE buffer

1 mL

5×1 mL

12640-D

dsDNA Standard 2

10 ng/μL in TE buffer

1 mL

5×1 mL

 

运输和保存

冰袋运输，2-8℃避光保存12个月。

 

注意事项

1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭；

2）对于DNA标准品，每次使用前先上下颠倒数次后瞬时离心数秒（请勿涡旋振荡）；

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅用作科研用途！

 

实验步骤

一、使用Qubit荧光仪进行dsDNA定量检测分析

双链DNA(dsDNA)荧光定量检测试剂盒|dsDNA HS Assay Kit for Qubit®

 

污染物对dsDNA定量检测试剂盒检测结果的影响

污染物

10 µL样品中的浓度

样品检测时浓度

检测结果

Salts

Ammonium acetate

200 mM

10 mM

OK

Sodium acetate

200 mM

10 mM

OK

Sodium chloride

200 mM

10 mM

OK

Magnesium chloride

40 mM

2 mM

OK

Organic Solvents

Phenol

2%

0.1%

OK

Ethanol

20%

1%

OK

Chloroform

4%

0.2%

OK

Detergents

Sodium dodecyl sulfate

0.2%

0.01%

OK

Triton X-100

0.02%

0.001%

OK

Other Compounds

Bovine serum albumin

400 μg/mL

20 μg/mL

OK

RNA

1×*

1×*

OK

dNTPs

2 mM

100 μM

OK

Polyethylene glycol

20%

1%

OK

Agarose

2%

0.1%

OK

*1×：表示含有与dsDNA相同浓度的RNA。                                                             

HB221117

Q: 12640和12642的区别是什么?

A：12640染料和buffer分开的，使用的时候要配工作液。12642为预混液，直接加入样品即可测定浓度，不需要配制染料工作液。

Q：12640-A 组分放在 4 度冻住了？

A: 该现象属于正常现象。12640 包含以下组分，其中 A 组分为荧光染料母液，含有DMSO，DMSO 低温易凝固，使得看上去A 管像被冻住一样，该现象其实并不是常规意义上的“结冰”冻住，所以不会影响其中荧光染料的性能。

Q: 产品成分只有两个标准品，制作标准曲线的时候需要对 standard 2 进行多梯度稀释吗？

A: 使用Qubit定量的时根据操作步骤两个标准品即可。如果使用酶标仪等，需要多个梯度制作标准曲线，可以使用 1×TE 对standard 2 进行梯度稀释。

Q: 用酶标仪代替Qubit检测，如何选择酶标板？波长如何设定？

A: 选择黑色的酶标板。波长：Ex=480 nm，Em=520 nm。

Q：标准品荧光值与之前使用的有差异？一般标准品的荧光值应该是多少呢？

A：标准品没有一个确定的荧光值，且不同的仪器之间可能都有差异。可多做几个复孔或者多做几个梯度，呈线性关系即可。

[1] Duan XZ, Sun JT, Wang LT, et al. Recent infection by Wolbachia alters microbial communities in wild Laodelphax striatellus populations. Microbiome. 2020;8(1):104. Published 2020 Jul 2. doi:10.1186/s40168-020-00878-x(IF:11.607)
[2] Zhang Y, An C, Zhang Y, et al. Microfluidic-templating alginate microgels crosslinked by different metal ions as engineered microenvironment to regulate stem cell behavior for osteogenesis. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;131:112497. doi:10.1016/j.msec.2021.112497(IF:7.328)
[3] An C, Liu W, Zhang Y, et al. Continuous microfluidic encapsulation of single mesenchymal stem cells using alginate microgels as injectable fillers for bone regeneration. Acta Biomater. 2020;111:181-196. doi:10.1016/j.actbio.2020.05.024(IF:7.242)
[4] An C, Zhang Y, Li H, et al. Thermo-responsive fluorinated surfactant for on-demand demulsification of microfluidic droplets. Lab Chip. 2021;21(18):3412-3419. Published 2021 Sep 14. doi:10.1039/d1lc00450f(IF:6.799)
[5] Gu L, Ren F, Fang X, Yuan L, Liu G, Wang S. Exosomal MicroRNA-181a Derived From Mesenchymal Stem Cells Improves Gut Microbiota Composition, Barrier Function, and Inflammatory Status in an Experimental Colitis Model. Front Med (Lausanne). 2021;8:660614. Published 2021 Jun 24. doi:10.3389/fmed.2021.660614(IF:5.093)
[6] Zhao H, Tang X, Wu M, et al. Transcriptome Characterization of Short Distance Transport Stress in Beef Cattle Blood. Front Genet. 2021;12:616388. Published 2021 Feb 10. doi:10.3389/fgene.2021.616388(IF:4.599)
[7] Gao ZR, Liu Q, Zhao J, et al. A comprehensive analysis of the circRNA-miRNA-mRNA network in osteocyte-like cell associated with Mycobacterium leprae infection. PLoS Negl Trop Dis. 2022;16(5):e0010379. Published 2022 May 2. doi:10.1371/journal.pntd.0010379(IF:4.411)
[8] Li J, Li X, Li M, et al. Differential early diagnosis of benign versus malignant lung cancer using systematic pathway flux analysis of peripheral blood leukocytes. Sci Rep. 2022;12(1):5070. Published 2022 Mar 24. doi:10.1038/s41598-022-08890-x(IF:4.380)
[9] Liang H, Zhang X, Ma Z, et al. Association of CYP3A5 Gene Polymorphisms and Amlodipine-Induced Peripheral Edema in Chinese Han Patients with Essential Hypertension. Pharmgenomics Pers Med. 2021;14:189-197. Published 2021 Feb 2. doi:10.2147/PGPM.S291277(IF:3.912)
[10] Bing XL, Zhao DS, Peng CW, Huang HJ, Hong XY. Similarities and spatial variations of bacterial and fungal communities in field rice planthopper (Hemiptera: Delphacidae) populations. Insect Sci. 2020;27(5):947-963. doi:10.1111/1744-7917.12782(IF:2.791)
[11] Zhang Y, Dai J, Yan L, Sun Y. Intra-articular injection of decellularized extracellular matrices in the treatment of osteoarthritis in rabbits. PeerJ. 2020;8:e8972. Published 2020 Apr 22. doi:10.7717/peerj.8972(IF:2.379)