磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒FA(预封装,尖底板)
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
MolPure® Mag32 Residual DNA Sample Preparation Kit FA (Prepackaged, Pointed Bottom Plate)适用于生物制品样本中残留DNA检测的前处理。采用独特的磁珠和精心优化的缓冲体系，可最大限度的分离纯化样本中的微量宿主DNA。配合磁珠法自动化提取仪器和移液法自动化仪器使用，可实现核酸的高通量提取。
该前处理试剂盒可与本公司的多种宿主细胞DNA残留（qPCR法）检测试剂盒配合使用，包括CHO宿主细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41301ES）、HEK293宿主细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41302ES）、Vero宿主细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41303ES）和E.coli残留DNA检测试剂盒（Cat#41304ES）。
产品组分
|
类别 |
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
18463ES32（2×16 T） |
18463ES59（6 ×16 T） |
|||
|
Part I |
18463-A |
蛋白酶K（20 mg/mL） |
700 μL/支×1 |
1 mL/支×2 |
|
Part Ⅱ |
18463-B |
96孔预装板 |
1块×2 |
1块×6 |
|
18463-C |
8联磁棒套 |
2条/包×2 |
2条/包×6 |
|
|
18463–D |
裂解液 |
4 mL |
12 mL |
|
|
Part Ⅲ |
18463–E |
糖原 |
300 μL |
900 μL |
|
18463–F |
Poly A钾盐 |
200 μL |
600 μL |
|
【注】：适用机型为杭州奥盛Auto-Pure32A自动化核酸提取仪及同类型仪器（加热槽位为1、6、7、12）。
运输和保存方法
1. Part I组分冰袋运输，4℃可保存1年，长期保存于-20℃。
2. Part II组分室温运输，室温保存，有效期1年。
3. Part Ⅲ组分干冰运输，-20℃保存1年。
4. 收到货后，请检查Part I、Part II和Part Ⅲ共3个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。
注意事项
1. 使用前请详细阅读使用说明书，严格按照使用说明书操作，样本处理建议在超净台或生物安全柜中进行。
2. 配合全自动核酸提取仪使用前，需对全自动核酸提取仪进行紫外消毒。使用完毕后，用75%酒精擦拭提取仪内部并进行紫外消毒30 min。
3. 注意观察常温保存溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季室温为低温环境时），可37℃水浴至溶液澄清，避免影响使用效果。
4. 洗脱时可能存在磁珠残留，吸取样本时应尽量避免吸入磁珠。
5. 处理样本及加样时，勤换枪头，避免交叉污染。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
7. 本产品仅作科研用途。
实验前准备
1. 自备设备：漩涡振荡器、水浴锅或金属浴、杭州奥盛Auto-Pure32A自动化核酸提取仪或其他品牌全自动化核酸提取仪。
2. 自备耗材：10μL-1000μL不等的低吸附带滤芯枪头、1.5 mL低吸附离心管。
3. 自备试剂：1×PBS缓冲液（pH 7.4，无 Mg 和 Ca 离子）、超纯水。
【注】：推荐您购买本公司的超纯水（Cat#10116ES）。
使用方法
配套自动化仪器使用，以杭州奥盛Auto-Pure32A自动化核酸提取仪为例（如要配套其他主流品牌自动化仪器使用，程序可向上海金畔生物科技有限公司获取）：
一、预封装试剂准备
1. 从试剂盒中取出预装板，颠倒混匀数次使磁珠重悬，轻甩孔板，使试剂及磁珠都集中到孔板底部。小心撕去预装板封膜，避免振动，防止液体溅出。
2. 根据处理样本数量，向预装板样品处理孔（第1、7列）加入9 μL糖原和6 μL Poly A钾盐。
二、 样本处理
1. 待测样本为疫苗等本身含有较高的DNA含量的样本，可用1×PBS（pH7.4，无Ca和Mg）对样本进行适当比例稀释后提取（对样本进行稀释是为了保证检测的准确性，使样本的检测值在标准曲线线性范围之内，通常可考虑进行100倍稀释）。
2. 待测样本为干粉的，可用超纯水将样本稀释成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。
3. 待测样本为复杂背景基质的，可根据需要进行加标回收实验，以确定合适的样本稀释倍数。
4. 取100 μL样本装于1.5 mL离心管中，加入100 μL裂解液和10 μL蛋白酶K，涡旋混匀10 sec。
【注】：样本蛋白浓度0-100 mg/mL，蛋白酶K用量为10 μL；样本蛋白浓度100-200 mg/mL，蛋白酶K用量为20 μL。
5. 60℃孵育20 min，即为预处理样本，待用。
三、自动化提取
1. 将预处理样本加入样品处理孔（第1、7列）。
2. 按照提取仪的位置，正确安放上述96孔预装板，并放置96深孔磁棒套。
3. 运行如下程序，程序结束后，将洗脱板转移至新的离心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃长期保存。
奥盛Auto-Pure32A的提取仪器的提取程序
|
步骤 |
孔位 |
混合时间(min) |
吸磁时间(sec) |
等待时间(min) |
容积(μL) |
混合速度(1-10) |
温度(℃) |
混合位置(0-100%) |
混合幅度(1-100%) |
吸磁位置(0-100%) |
吸磁速度(1-10) |
|
移磁珠 |
3 |
0.2 |
60 |
0 |
500 |
5 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
结合 |
1 |
15 |
90 |
0 |
600 |
5 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
清洗1 |
2 |
1 |
60 |
0 |
500 |
8 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
清洗2 |
3 |
1 |
60 |
4 |
500 |
8 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
洗脱 |
6 |
8 |
90 |
0 |
100 |
10 |
65 |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
弃磁珠 |
3 |
0.2 |
0 |
0 |
500 |
5 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
HB220818
MolPure® Mag32 Residual DNA Sample Preparation Kit FA (Prepackaged, Pointed Bottom Plate)适用于生物制品样本中残留DNA检测的前处理。采用独特的磁珠和精心优化的缓冲体系，可最大限度的分离纯化样本中的微量宿主DNA。配合磁珠法自动化提取仪器和移液法自动化仪器使用，可实现核酸的高通量提取。
该前处理试剂盒可与本公司的多种宿主细胞DNA残留（qPCR法）检测试剂盒配合使用，包括CHO宿主细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41301ES）、HEK293宿主细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41302ES）、Vero宿主细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41303ES）和E.coli残留DNA检测试剂盒（Cat#41304ES）。
产品组分
|
类别 |
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
18463ES32（2×16 T） |
18463ES59（6 ×16 T） |
|||
|
Part I |
18463-A |
蛋白酶K（20 mg/mL） |
700 μL/支×1 |
1 mL/支×2 |
|
Part Ⅱ |
18463-B |
96孔预装板 |
1块×2 |
1块×6 |
|
18463-C |
8联磁棒套 |
2条/包×2 |
2条/包×6 |
|
|
18463–D |
裂解液 |
4 mL |
12 mL |
|
|
Part Ⅲ |
18463–E |
糖原 |
300 μL |
900 μL |
|
18463–F |
Poly A钾盐 |
200 μL |
600 μL |
|
【注】：适用机型为杭州奥盛Auto-Pure32A自动化核酸提取仪及同类型仪器（加热槽位为1、6、7、12）。
运输和保存方法
1. Part I组分冰袋运输，4℃可保存1年，长期保存于-20℃。
2. Part II组分室温运输，室温保存，有效期1年。
3. Part Ⅲ组分干冰运输，-20℃保存1年。
4. 收到货后，请检查Part I、Part II和Part Ⅲ共3个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。
注意事项
1. 使用前请详细阅读使用说明书，严格按照使用说明书操作，样本处理建议在超净台或生物安全柜中进行。
2. 配合全自动核酸提取仪使用前，需对全自动核酸提取仪进行紫外消毒。使用完毕后，用75%酒精擦拭提取仪内部并进行紫外消毒30 min。
3. 注意观察常温保存溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季室温为低温环境时），可37℃水浴至溶液澄清，避免影响使用效果。
4. 洗脱时可能存在磁珠残留，吸取样本时应尽量避免吸入磁珠。
5. 处理样本及加样时，勤换枪头，避免交叉污染。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
7. 本产品仅作科研用途。
实验前准备
1. 自备设备：漩涡振荡器、水浴锅或金属浴、杭州奥盛Auto-Pure32A自动化核酸提取仪或其他品牌全自动化核酸提取仪。
2. 自备耗材：10μL-1000μL不等的低吸附带滤芯枪头、1.5 mL低吸附离心管。
3. 自备试剂：1×PBS缓冲液（pH 7.4，无 Mg 和 Ca 离子）、超纯水。
【注】：推荐您购买本公司的超纯水（Cat#10116ES）。
使用方法
配套自动化仪器使用，以杭州奥盛Auto-Pure32A自动化核酸提取仪为例（如要配套其他主流品牌自动化仪器使用，程序可向上海金畔生物科技有限公司获取）：
一、预封装试剂准备
1. 从试剂盒中取出预装板，颠倒混匀数次使磁珠重悬，轻甩孔板，使试剂及磁珠都集中到孔板底部。小心撕去预装板封膜，避免振动，防止液体溅出。
2. 根据处理样本数量，向预装板样品处理孔（第1、7列）加入9 μL糖原和6 μL Poly A钾盐。
二、 样本处理
1. 待测样本为疫苗等本身含有较高的DNA含量的样本，可用1×PBS（pH7.4，无Ca和Mg）对样本进行适当比例稀释后提取（对样本进行稀释是为了保证检测的准确性，使样本的检测值在标准曲线线性范围之内，通常可考虑进行100倍稀释）。
2. 待测样本为干粉的，可用超纯水将样本稀释成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。
3. 待测样本为复杂背景基质的，可根据需要进行加标回收实验，以确定合适的样本稀释倍数。
4. 取100 μL样本装于1.5 mL离心管中，加入100 μL裂解液和10 μL蛋白酶K，涡旋混匀10 sec。
【注】：样本蛋白浓度0-100 mg/mL，蛋白酶K用量为10 μL；样本蛋白浓度100-200 mg/mL，蛋白酶K用量为20 μL。
5. 60℃孵育20 min，即为预处理样本，待用。
三、自动化提取
1. 将预处理样本加入样品处理孔（第1、7列）。
2. 按照提取仪的位置，正确安放上述96孔预装板，并放置96深孔磁棒套。
3. 运行如下程序，程序结束后，将洗脱板转移至新的离心管中，溶液可置于-20℃短期保存，-80℃长期保存。
奥盛Auto-Pure32A的提取仪器的提取程序
|
步骤 |
孔位 |
混合时间(min) |
吸磁时间(sec) |
等待时间(min) |
容积(μL) |
混合速度(1-10) |
温度(℃) |
混合位置(0-100%) |
混合幅度(1-100%) |
吸磁位置(0-100%) |
吸磁速度(1-10) |
|
移磁珠 |
3 |
0.2 |
60 |
0 |
500 |
5 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
结合 |
1 |
15 |
90 |
0 |
600 |
5 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
清洗1 |
2 |
1 |
60 |
0 |
500 |
8 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
清洗2 |
3 |
1 |
60 |
4 |
500 |
8 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
洗脱 |
6 |
8 |
90 |
0 |
100 |
10 |
65 |
0 |
80 |
0 |
1 |
|
弃磁珠 |
3 |
0.2 |
0 |
0 |
500 |
5 |
/ |
0 |
80 |
0 |
1 |
HB220818
暂无内容
暂无内容