无内毒素质粒小量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit适用于从1-10 mL大肠杆菌LB培养液中快速提取20-50 µg纯净的质粒DNA，具有高效、快速、方便等特点。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度DNA。提取的DNA纯度高，内毒素残留极低(<0.1 EU/μg DNA)，细胞转染效果极佳，也可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
试剂盒组分
|
类别 |
编号 |
组分名称 |
19021ES50 (50 T) |
19021ES70 (200 T) |
|
Part I |
19021-A |
RNase A (10 mg/mL) |
125 µL |
500 µL |
|
19021-B |
去内毒素溶液ER (ER Solution E2) |
5 mL |
20 mL |
|
|
Part II |
19021-C |
缓冲液RS* (RS Buffer E2*) |
12.5 mL |
50 mL |
|
Part III |
19021-D |
缓冲液AC (AC Buffer E2) |
5 mL |
20 mL |
|
19021-E |
DNA吸附柱E2 (MolPure® DNA Column E2) |
50个 |
200个 |
|
|
19021-F |
2 mL收集管 (2 mL Collection Tube E2) |
50个 |
200个 |
|
|
19021-G |
裂解液LB (LB Buffer E2) |
12.5 mL |
50 mL |
|
|
19021-H |
结合液BD (BD Buffer E2) |
12.5 mL |
50 mL |
|
|
19021-I |
去蛋白液PL* (PL Buffer E2*) |
16 mL |
63 mL |
|
|
19021-J |
漂洗液W* (Wash Buffer*) |
13 mL |
50 mL |
|
|
19021-K |
洗脱液 (Elution Buffer) |
10 mL |
20 mL |
运输与保存方法
Part I组分冰袋运输，-20℃保存；Part II组分冰袋运输，4℃保存；Part III组分常温运输，室温保存。
产品有效期12个月。
相关产品
液体样本、TRIzol+离心柱式提取产品，适用样本多样、提取操作简单、快速，全国多个仓库，大量现货！
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
MolPure® Plasmid Mini Kit 质粒小量提取试剂盒HOT |
19001ES50/70 |
50 T/200 T |
|
TOP10 Chemically Competent Cell Top10化学感受态细胞HOT |
11801ES80/92 |
100×100μL |
|
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞HOT |
11802ES80/92 |
100×100μL |
|
Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒HOT |
10911ES20 |
20 T |
|
Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒HOT |
10912ES10 |
10 T |
|
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂HOT |
40802ES03 |
1 mL |
HB201030
MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit适用于从1-10 mL大肠杆菌LB培养液中快速提取20-50 µg纯净的质粒DNA，具有高效、快速、方便等特点。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度DNA。提取的DNA纯度高，内毒素残留极低(<0.1 EU/μg DNA)，细胞转染效果极佳，也可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
试剂盒组分
|
类别 |
编号 |
组分名称 |
19021ES50 (50 T) |
19021ES70 (200 T) |
|
Part I |
19021-A |
RNase A (10 mg/mL) |
125 µL |
500 µL |
|
19021-B |
去内毒素溶液ER (ER Solution E2) |
5 mL |
20 mL |
|
|
Part II |
19021-C |
缓冲液RS* (RS Buffer E2*) |
12.5 mL |
50 mL |
|
Part III |
19021-D |
缓冲液AC (AC Buffer E2) |
5 mL |
20 mL |
|
19021-E |
DNA吸附柱E2 (MolPure® DNA Column E2) |
50个 |
200个 |
|
|
19021-F |
2 mL收集管 (2 mL Collection Tube E2) |
50个 |
200个 |
|
|
19021-G |
裂解液LB (LB Buffer E2) |
12.5 mL |
50 mL |
|
|
19021-H |
结合液BD (BD Buffer E2) |
12.5 mL |
50 mL |
|
|
19021-I |
去蛋白液PL* (PL Buffer E2*) |
16 mL |
63 mL |
|
|
19021-J |
漂洗液W* (Wash Buffer*) |
13 mL |
50 mL |
|
|
19021-K |
洗脱液 (Elution Buffer) |
10 mL |
20 mL |
运输与保存方法
Part I组分冰袋运输，-20℃保存；Part II组分冰袋运输，4℃保存；Part III组分常温运输，室温保存。
产品有效期12个月。
相关产品
液体样本、TRIzol+离心柱式提取产品，适用样本多样、提取操作简单、快速，全国多个仓库，大量现货！
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
MolPure® Plasmid Mini Kit 质粒小量提取试剂盒HOT |
19001ES50/70 |
50 T/200 T |
|
TOP10 Chemically Competent Cell Top10化学感受态细胞HOT |
11801ES80/92 |
100×100μL |
|
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞HOT |
11802ES80/92 |
100×100μL |
|
Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒HOT |
10911ES20 |
20 T |
|
Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒HOT |
10912ES10 |
10 T |
|
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂HOT |
40802ES03 |
1 mL |
HB201030
Q：加入去内毒素试剂后，溶液没有变得浑浊？
A：可能是本身内毒素低，也可能是加入 ER 溶液后，因为体系的 PH 差异、抑制物等，使得内毒素的凝集状态反应不一样。
Q：无内毒素质粒小提检测浓度很高？
A：客户的菌液量用了 20ml，太多了，导致 RNase 作用不足。
Q: 质粒浓度低
A: （1）拷贝数低或者大于10kb的质粒应加大菌体使用量，并按比例增加后续buffer的用量（2）细菌可能没有充分裂解
Q: 裂解液有沉淀
A: 裂解液中含有NaOH，可能盐离子析出，可 37℃温浴复溶至溶液澄清再使用。
Q：质粒跑胶出现小于100bp小条带
A：可能RNA未去除干净（样本太多或者添加了RNase的缓冲液 RS酶活下降）或者裂解时间太长导致质粒受到破坏。
Q: 内毒素清除离心后分层不彻底
A: 提升离心温度；加大离心转速；增加离心时间。
Q: 提取的产量低
A: 中低拷贝质粒：长片段、表达型载体常以低拷贝为主，建议加大菌体使用量，菌液过夜培养
菌种问题：菌种保存中质粒丢失，养菌前先划线活化，稳定产量
菌体未充分裂解：在buffer种充分重悬，避免成团
试剂准备有误：有沉淀析出的溶液需要加热；加入的乙醇体积不准
洗脱不充分：洗脱液预热，二次洗脱
Q: 有基因组污染
A: 培养时间太长：培养时间建议控制在12-16h；裂解不充分。
Q: 下游结果不理想
A: 盐离子污染；乙醇污染；质粒降解；层析柱膜脱落。
[1] Han P, Cao P, Yue J, et al. Knockdown of hnRNPA1 Promotes NSCLC Metastasis and EMT by Regulating Alternative Splicing of LAS1L exon 9. Front Oncol. 2022;12:837248. Published 2022 Jun 23. doi:10.3389/fonc.2022.837248(IF:5.738)
[2] Zhang J, Wang W, Feng N, Jiang X, Zhu S, Chen YQ. Ndufa6 regulates adipogenic differentiation via Scd1. Adipocyte. 2021;10(1):646-657. doi:10.1080/21623945.2021.2007590(IF:4.534)
[3] Zhu S, Zhang J, Wang W, Jiang X, Chen YQ. Blockage of NDUFB9-SCD1 pathway inhibits adipogenesis : Blockage of NDUFB9-SCD1 pathway inhibits adipogenesis. J Physiol Biochem. 2022;78(2):377-388. doi:10.1007/s13105-022-00876-7(IF:4.158)