杀稻瘟菌素S(灭瘟素) 核苷类抗生素|Blasticidin S|CAS 3513-03-9

杀稻瘟菌素S(灭瘟素) 核苷类抗生素|Blasticidin S|CAS 3513-03-9

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Blasticidin S是一种来自Streptomyces griseochromogenes的核苷类抗生素,通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性地抑制原核和真核生物的蛋白质合成。Blasticidin S用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式,很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。

Cat#60218JP10、60218JP50、60218JP60均以液体形式提供,浓度为10 mg/mL(in HEPJP缓冲液,pH 7.5)。

Cat#60218JP80为粉末形式提供,使用时可用无菌水或者缓冲液配制成5-10 mg/mL的储存液。

 

产品信息

货号

60218JP10 / 60218JP50 / 60218JP60 / 60218JP80

规格

10 mg / 5 X 10 mg / 10 X 10 mg / 1 g

CAS号(CAS NO.)

3513-03-9

分子式(Molecular Fomular)

C17H26N8O5·HCl

分子量(Molecular Weight)

458.9 g/mol

纯度(Purity)

>95%(HPLC)

结构(Structure)

杀稻瘟菌素S(灭瘟素) 核苷类抗生素|Blasticidin S|CAS 3513-03-9

 

组分信息

组分名称

60218JP10

60218JP50

60218JP60

60218JP80

规格

10 mg

5×10 mg

10×10 mg

1 g

外观

液体

液体

液体

粉末

 

储存条件

-25~-15℃保存。粉末有效期3年,液体有效期2年,避免反复冻融。

 

使用说明

1. 应用浓度

1)Escherichia coli

E. coliBlasticidin S的敏感性稍差,但是转化子对Blasticidin S具有耐受性,可以用低盐LB培养基(pH 8)进行筛选,浓度范围为50-100 μg/mL Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。

2)哺乳动物细胞

哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/mL。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。一些哺乳动物细胞的建议工作浓度:

细胞

种属

组织

培养基

Blasticidin S浓度 (μg/mL)

HeLa

Human

Uterus

DMEM

3-10

293

Human

Kidney

DMEM

3-10

B16

Mouse

Melanoma

RPMI

3-10

PC1.0

Hamster

Adenocarcinoma

RPMI

10-30

2. 操作步骤(哺乳动物稳转株筛选)

Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/mL。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中,在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育,用于筛选稳定转染细胞株。

1)转染后48 h,用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高,抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%)。

2)每3-4天去除培养基,加入含抗生素的新鲜培养基。

3)7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率,集落形成可能需要增加一周或更久。

4)转移5-10个耐受克隆到35 mm细胞盘中,加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

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产品名称

产品编号

Carbenicillin, Disodium Salt 羧苄青霉素钠

60202JP

Ampicillin, Sodium Salt 氨苄青霉素钠

60203JP

Doxycycline hyclate 盐酸强力霉素

60204JP

Chloramphenicol, USP Grade 氯霉素,USP级

60205JP

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206JP

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐

60210JP

Tetracyclin HCl 四环素盐酸盐(USP)

60212JP

Vancomycin Hydrochloride 盐酸万古霉素

60213JP

Gentamycin Sulfate Salt    硫酸庆大霉素

60214JP

Spectinomycin Hydrochloride 盐酸壮观霉素

60215JP

盐酸博莱霉素

60216JP

Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素

60217JP

Blasticidin S  杀稻瘟菌素S (灭瘟素)

60218JP

Nystatin 制真菌素

60219JP

G418 Sulfate (Geneticin) 遗传霉素

60220JP

Hygromycin B 潮霉素B

60225JP

Erythromycin 红霉素

60228JP

Timentin 特美汀

60230JP

Aureobasidin A (AbA)金担子素A

60231JP

Polymyxin B Sulfate 多粘菌素B硫酸盐

60242JP

 

Q:与 G418 有何区别?

A:Blasticidin S 用于筛选携带有 bsr 或BSD 耐受基因的转染细胞,G418 用于筛选哺乳动物细胞中含抗性基因neo 和植物细胞中含有nptII 基因。

Q:60218JP80配置方法?

A:使用1M的HEPJP或者1×PBS配成浓度为10mg/ml的母液。

Q: 60218的液体形式是无菌的吗?

A: 是无菌的,过滤过。

[1] Xiao J, Xiong Y, Yang LT, et al. POST1/C12ORF49 regulates the SREBP pathway by promoting site-1 protease maturation. Protein Cell. 2021;12(4):279-296. doi:10.1007/s13238-020-00753-3(IF:10.164)
[2] Wei W, Li Y, Wang C, et al. Diterpenoid Vinigrol specifically activates ATF4/DDIT3-mediated PERK arm of unfolded protein response to drive non-apoptotic death of breast cancer cells [published online ahead of print, 2022 Jun 1]. Pharmacol Res. 2022;182:106285. doi:10.1016/j.phrs.2022.106285(IF:7.658)
[3] Qian F, Hu Q, Tian Y, et al. ING4 suppresses hepatocellular carcinoma via a NF-κB/miR-155/FOXO3a signaling axis. Int J Biol Sci. 2019;15(2):369-385. Published 2019 Jan 1. doi:10.7150/ijbs.28422(IF:6.582)
[4] Li Q, Yu D, Yu Z, et al. TIPE3 promotes non-small cell lung cancer progression via the protein kinase B/extracellular signal-regulated kinase 1/2-glycogen synthase kinase 3β-β-catenin/Snail axis. Transl Lung Cancer Res. 2021;10(2):936-954. doi:10.21037/tlcr-21-147(IF:6.498)
[5] Li Y, Fu Y, Hu X, et al. The HBx-CTTN interaction promotes cell proliferation and migration of hepatocellular carcinoma via CREB1. Cell Death Dis. 2019;10(6):405. Published 2019 May 28. doi:10.1038/s41419-019-1650-x(IF:5.959)
[6] Li X, Wu A, Han C, et al. Bone marrow-derived mesenchymal stem cells in three-dimensional co-culture attenuate degeneration of nucleus pulposus cells. Aging (Albany NY). 2019;11(20):9167-9187. doi:10.18632/aging.102390(IF:5.515)
[7] Yue C, Jin H, Zhang X, et al. Aucubin prevents steroid-induced osteoblast apoptosis by enhancing autophagy via AMPK activation. J Cell Mol Med. 2021;25(21):10175-10184. doi:10.1111/jcmm.16954(IF:5.310)
[8] Wu J, Lv Q, He J, et al. MicroRNA-188 suppresses G1/S transition by targeting multiple cyclin/CDK complexes. Cell Commun Signal. 2014;12:66. Published 2014 Oct 11. doi:10.1186/s12964-014-0066-6(IF:4.672)
[9] Huang H, Zou X, Zhong L, et al. CRISPR/dCas9-mediated activation of multiple endogenous target genes directly converts human foreskin fibroblasts into Leydig-like cells. J Cell Mol Med. 2019;23(9):6072-6084. doi:10.1111/jcmm.14470(IF:4.658)
[10] Huang H, Zhong L, Zhou J, et al. Leydig-like cells derived from reprogrammed human foreskin fibroblasts by CRISPR/dCas9 increase the level of serum testosterone in castrated male rats. J Cell Mol Med. 2020;24(7):3971-3981. doi:10.1111/jcmm.15018(IF:4.486)
[11] Wang X, Du A, Yu G, Deng Z, He X. Guanidine N-methylation by BlsL Is Dependent on Acylation of Beta-amine Arginine in the Biosynthesis of Blasticidin S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Published 2017 Aug 22. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(IF:4.076)
[12] Zhao Y, Ye X, Chen R, et al. Sirtuin 7 promotes non‑small cell lung cancer progression by facilitating G1/S phase and epithelial‑mesenchymal transition and activating AKT and ERK1/2 signaling. Oncol Rep. 2020;44(3):959-972. doi:10.3892/or.2020.7672(IF:3.906)
[13] Zhang M, Liu X, Wang Q, et al. NDRG2 acts as a PERK co-factor to facilitate PERK branch and ERS-induced cell death. FEBS Lett. 2017;591(21):3670-3681. doi:10.1002/1873-3468.12861(IF:3.623)
[14] Wang XF, Tian Q, Qin WB, et al. Histone H3 methylation orchestrates transcriptional program in mouse spermatogenic cell line. J Reprod Dev. 2020;66(3):223-230. doi:10.1262/jrd.2019-139(IF:1.735)

Blasticidin S是一种来自Streptomyces griseochromogenes的核苷类抗生素,通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性地抑制原核和真核生物的蛋白质合成。Blasticidin S用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式,很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。

Cat#60218JP10、60218JP50、60218JP60均以液体形式提供,浓度为10 mg/mL(in HEPJP缓冲液,pH 7.5)。

Cat#60218JP80为粉末形式提供,使用时可用无菌水或者缓冲液配制成5-10 mg/mL的储存液。

 

产品信息

货号

60218JP10 / 60218JP50 / 60218JP60 / 60218JP80

规格

10 mg / 5 X 10 mg / 10 X 10 mg / 1 g

CAS号(CAS NO.)

3513-03-9

分子式(Molecular Fomular)

C17H26N8O5·HCl

分子量(Molecular Weight)

458.9 g/mol

纯度(Purity)

>95%(HPLC)

结构(Structure)

杀稻瘟菌素S(灭瘟素) 核苷类抗生素|Blasticidin S|CAS 3513-03-9

 

组分信息

组分名称

60218JP10

60218JP50

60218JP60

60218JP80

规格

10 mg

5×10 mg

10×10 mg

1 g

外观

液体

液体

液体

粉末

 

储存条件

-25~-15℃保存。粉末有效期3年,液体有效期2年,避免反复冻融。

 

使用说明

1. 应用浓度

1)Escherichia coli

E. coliBlasticidin S的敏感性稍差,但是转化子对Blasticidin S具有耐受性,可以用低盐LB培养基(pH 8)进行筛选,浓度范围为50-100 μg/mL Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。

2)哺乳动物细胞

哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/mL。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。一些哺乳动物细胞的建议工作浓度:

细胞

种属

组织

培养基

Blasticidin S浓度 (μg/mL)

HeLa

Human

Uterus

DMEM

3-10

293

Human

Kidney

DMEM

3-10

B16

Mouse

Melanoma

RPMI

3-10

PC1.0

Hamster

Adenocarcinoma

RPMI

10-30

2. 操作步骤(哺乳动物稳转株筛选)

Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/mL。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中,在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育,用于筛选稳定转染细胞株。

1)转染后48 h,用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高,抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%)。

2)每3-4天去除培养基,加入含抗生素的新鲜培养基。

3)7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率,集落形成可能需要增加一周或更久。

4)转移5-10个耐受克隆到35 mm细胞盘中,加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

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60202JP

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60204JP

Chloramphenicol, USP Grade 氯霉素,USP级

60205JP

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60206JP

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60210JP

Tetracyclin HCl 四环素盐酸盐(USP)

60212JP

Vancomycin Hydrochloride 盐酸万古霉素

60213JP

Gentamycin Sulfate Salt    硫酸庆大霉素

60214JP

Spectinomycin Hydrochloride 盐酸壮观霉素

60215JP

盐酸博莱霉素

60216JP

Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素

60217JP

Blasticidin S  杀稻瘟菌素S (灭瘟素)

60218JP

Nystatin 制真菌素

60219JP

G418 Sulfate (Geneticin) 遗传霉素

60220JP

Hygromycin B 潮霉素B

60225JP

Erythromycin 红霉素

60228JP

Timentin 特美汀

60230JP

Aureobasidin A (AbA)金担子素A

60231JP

Polymyxin B Sulfate 多粘菌素B硫酸盐

60242JP

 

Q:与 G418 有何区别?

A:Blasticidin S 用于筛选携带有 bsr 或BSD 耐受基因的转染细胞,G418 用于筛选哺乳动物细胞中含抗性基因neo 和植物细胞中含有nptII 基因。

Q:60218JP80配置方法?

A:使用1M的HEPJP或者1×PBS配成浓度为10mg/ml的母液。

Q: 60218的液体形式是无菌的吗?

A: 是无菌的,过滤过。

[1] Xiao J, Xiong Y, Yang LT, et al. POST1/C12ORF49 regulates the SREBP pathway by promoting site-1 protease maturation. Protein Cell. 2021;12(4):279-296. doi:10.1007/s13238-020-00753-3(IF:10.164)
[2] Wei W, Li Y, Wang C, et al. Diterpenoid Vinigrol specifically activates ATF4/DDIT3-mediated PERK arm of unfolded protein response to drive non-apoptotic death of breast cancer cells [published online ahead of print, 2022 Jun 1]. Pharmacol Res. 2022;182:106285. doi:10.1016/j.phrs.2022.106285(IF:7.658)
[3] Qian F, Hu Q, Tian Y, et al. ING4 suppresses hepatocellular carcinoma via a NF-κB/miR-155/FOXO3a signaling axis. Int J Biol Sci. 2019;15(2):369-385. Published 2019 Jan 1. doi:10.7150/ijbs.28422(IF:6.582)
[4] Li Q, Yu D, Yu Z, et al. TIPE3 promotes non-small cell lung cancer progression via the protein kinase B/extracellular signal-regulated kinase 1/2-glycogen synthase kinase 3β-β-catenin/Snail axis. Transl Lung Cancer Res. 2021;10(2):936-954. doi:10.21037/tlcr-21-147(IF:6.498)
[5] Li Y, Fu Y, Hu X, et al. The HBx-CTTN interaction promotes cell proliferation and migration of hepatocellular carcinoma via CREB1. Cell Death Dis. 2019;10(6):405. Published 2019 May 28. doi:10.1038/s41419-019-1650-x(IF:5.959)
[6] Li X, Wu A, Han C, et al. Bone marrow-derived mesenchymal stem cells in three-dimensional co-culture attenuate degeneration of nucleus pulposus cells. Aging (Albany NY). 2019;11(20):9167-9187. doi:10.18632/aging.102390(IF:5.515)
[7] Yue C, Jin H, Zhang X, et al. Aucubin prevents steroid-induced osteoblast apoptosis by enhancing autophagy via AMPK activation. J Cell Mol Med. 2021;25(21):10175-10184. doi:10.1111/jcmm.16954(IF:5.310)
[8] Wu J, Lv Q, He J, et al. MicroRNA-188 suppresses G1/S transition by targeting multiple cyclin/CDK complexes. Cell Commun Signal. 2014;12:66. Published 2014 Oct 11. doi:10.1186/s12964-014-0066-6(IF:4.672)
[9] Huang H, Zou X, Zhong L, et al. CRISPR/dCas9-mediated activation of multiple endogenous target genes directly converts human foreskin fibroblasts into Leydig-like cells. J Cell Mol Med. 2019;23(9):6072-6084. doi:10.1111/jcmm.14470(IF:4.658)
[10] Huang H, Zhong L, Zhou J, et al. Leydig-like cells derived from reprogrammed human foreskin fibroblasts by CRISPR/dCas9 increase the level of serum testosterone in castrated male rats. J Cell Mol Med. 2020;24(7):3971-3981. doi:10.1111/jcmm.15018(IF:4.486)
[11] Wang X, Du A, Yu G, Deng Z, He X. Guanidine N-methylation by BlsL Is Dependent on Acylation of Beta-amine Arginine in the Biosynthesis of Blasticidin S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Published 2017 Aug 22. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(IF:4.076)
[12] Zhao Y, Ye X, Chen R, et al. Sirtuin 7 promotes non‑small cell lung cancer progression by facilitating G1/S phase and epithelial‑mesenchymal transition and activating AKT and ERK1/2 signaling. Oncol Rep. 2020;44(3):959-972. doi:10.3892/or.2020.7672(IF:3.906)
[13] Zhang M, Liu X, Wang Q, et al. NDRG2 acts as a PERK co-factor to facilitate PERK branch and ERS-induced cell death. FEBS Lett. 2017;591(21):3670-3681. doi:10.1002/1873-3468.12861(IF:3.623)
[14] Wang XF, Tian Q, Qin WB, et al. Histone H3 methylation orchestrates transcriptional program in mouse spermatogenic cell line. J Reprod Dev. 2020;66(3):223-230. doi:10.1262/jrd.2019-139(IF:1.735)