WB外泌体鉴定试剂盒|Exosome identification Kit for Western Blot
产品说明书
FAQ
COA
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外泌体鉴定试剂盒是金畔生物针对外泌体标志蛋白 CD63 和 TSG101 检测而研发的一款高效且方便的外泌体鉴定试剂盒产品。试剂盒中包含以下组分和作用:
- 外泌体蛋白专用裂解液:其组分经过优化处理,可高效裂解外泌体;
- CD63&TSG101 蛋白阳性对照品:由血清外泌体裂解制备而成,可用于监测实验 体系;
- CD63 和 TSG101 抗体:该抗体经过严格筛选而得,适用于外泌体 CD63 和 TSG101 蛋白的检测;
- 该产品适用于人、大鼠、小鼠外泌体的鉴定。
产品组分
编号 |
组分 |
规格 |
41203-A |
外泌体蛋白专用裂解液 |
20 mL |
41203-B |
CD63&TSG101 阳性对照品 |
50 μL(2 μg/μL) 2 支 |
41203-C |
Anti-CD63 antibody |
10 μL |
41203-D |
Anti-TSG101 antibody |
10 μL |
41203-E |
Goat anti-Mouse IgG antibody ( HRP ) |
10 μL |
抗体信息
抗体名称 |
抗体属性 |
适应种属 |
Anti-CD63 antibody |
小鼠单克隆抗体 |
Human, Mouse, Rat |
Anti-TSG101 antibody |
小鼠单克隆抗体 |
Human, Mouse, Rat |
运输与保存方法
干冰运输。保存条件:-20 ℃保存,一年有效。
注意事项
1)避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)本实验中 BCA 及 WB 实验其他相关试剂需自备。
4)本产品仅作科研用途!
使用方法
1. 实验前先将裂解液融化混匀后置于冰上(如有沉淀析出,可 37 ℃加热至溶解);
2. 将外泌体样本与裂解液按体积比 1:1 的比例添加混匀并置于冰上裂解 10min;
3. 按照 4 ℃ 12000g 离心力,离心 5min,取上清,进行 BCA 蛋白浓度测定及 Western Blot 等实验;
4. 进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验时,取 CD63&TSG101 阳性对照品 10-20 μg 与实验样品同时进行(注:初次使用 CD63 & TSG101 阳性对照品上样前需 80℃煮样 5 min,BCA 及 Western Blot 实验相关试剂需自备,可根据自身的实验条件, 通过预实验确定合适的上样量以获得更佳的实验结果)。
WB 抗体使用稀释比例及大小 |
||
抗体名称 |
稀释比例 |
预测大小 |
Anti-CD63 antibody |
1:1000-1:2000 |
26-50 kd |
Anti-TSG101 antibody |
1:500-1:1000 |
43-47kd |
Goat anti-Mouse IgG antibody ( HRP ) |
1:5000-1:10000 |
—– |
质检实例
实验方案:
SDS-PAGE 胶:10%分离胶样品上样量:10 μg
一抗:Anti-CD63antibody,1:2000 稀释;Anti-TSG101 antibody,1:1000 稀释;4 ℃孵育过夜
二抗:Anti-mouse IgG,arigo ARG65350,1:10000 稀释;室温孵育 50 min;
曝光时间:5S
实验结果:
注:P 为 CD63&TSG101 阳性对照品;S 为外泌体样品
HB221116
外泌体鉴定试剂盒是金畔生物针对外泌体标志蛋白 CD63 和 TSG101 检测而研发的一款高效且方便的外泌体鉴定试剂盒产品。试剂盒中包含以下组分和作用:
- 外泌体蛋白专用裂解液:其组分经过优化处理,可高效裂解外泌体;
- CD63&TSG101 蛋白阳性对照品:由血清外泌体裂解制备而成,可用于监测实验 体系;
- CD63 和 TSG101 抗体:该抗体经过严格筛选而得,适用于外泌体 CD63 和 TSG101 蛋白的检测;
- 该产品适用于人、大鼠、小鼠外泌体的鉴定。
产品组分
编号 |
组分 |
规格 |
41203-A |
外泌体蛋白专用裂解液 |
20 mL |
41203-B |
CD63&TSG101 阳性对照品 |
50 μL(2 μg/μL) 2 支 |
41203-C |
Anti-CD63 antibody |
10 μL |
41203-D |
Anti-TSG101 antibody |
10 μL |
41203-E |
Goat anti-Mouse IgG antibody ( HRP ) |
10 μL |
抗体信息
抗体名称 |
抗体属性 |
适应种属 |
Anti-CD63 antibody |
小鼠单克隆抗体 |
Human, Mouse, Rat |
Anti-TSG101 antibody |
小鼠单克隆抗体 |
Human, Mouse, Rat |
运输与保存方法
干冰运输。保存条件:-20 ℃保存,一年有效。
注意事项
1)避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)本实验中 BCA 及 WB 实验其他相关试剂需自备。
4)本产品仅作科研用途!
使用方法
1. 实验前先将裂解液融化混匀后置于冰上(如有沉淀析出,可 37 ℃加热至溶解);
2. 将外泌体样本与裂解液按体积比 1:1 的比例添加混匀并置于冰上裂解 10min;
3. 按照 4 ℃ 12000g 离心力,离心 5min,取上清,进行 BCA 蛋白浓度测定及 Western Blot 等实验;
4. 进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验时,取 CD63&TSG101 阳性对照品 10-20 μg 与实验样品同时进行(注:初次使用 CD63 & TSG101 阳性对照品上样前需 80℃煮样 5 min,BCA 及 Western Blot 实验相关试剂需自备,可根据自身的实验条件, 通过预实验确定合适的上样量以获得更佳的实验结果)。
WB 抗体使用稀释比例及大小 |
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抗体名称 |
稀释比例 |
预测大小 |
Anti-CD63 antibody |
1:1000-1:2000 |
26-50 kd |
Anti-TSG101 antibody |
1:500-1:1000 |
43-47kd |
Goat anti-Mouse IgG antibody ( HRP ) |
1:5000-1:10000 |
—– |
质检实例
实验方案:
SDS-PAGE 胶:10%分离胶样品上样量:10 μg
一抗:Anti-CD63antibody,1:2000 稀释;Anti-TSG101 antibody,1:1000 稀释;4 ℃孵育过夜
二抗:Anti-mouse IgG,arigo ARG65350,1:10000 稀释;室温孵育 50 min;
曝光时间:5S
实验结果:
注:P 为 CD63&TSG101 阳性对照品;S 为外泌体样品
HB221116
Q:染色液 I 和II 有沉淀?
A:常使用透射电镜检测(形态)、粒径检测(大小)、Western blot 检测等方法鉴定提取的外泌体。在进行 Western blot 检测时,通常检测外泌体标志蛋白(CD63、CD9、CD81、TSG101 等,优先推荐 CD63 和 TSG101)。
Q:提取的外泌体进行 Western blot 前是否需要加入 RIPA 试剂裂解?
A:需要,一般按照 1:1 的比例加入 RIPA 试剂,放置在冰上裂解 10-15min,在做 western blot 之前务必做 BCA 蛋白定量。
Q:进行外泌体 Western blot 鉴定时有无内参蛋白可供选择?
A:无,该检测属于定性检测。
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