WB外泌体鉴定试剂盒|Exosome identification Kit for Western Blot

WB外泌体鉴定试剂盒|Exosome identification Kit for Western Blot

产品说明书

FAQ

COA

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外泌体鉴定试剂盒是金畔生物针对外泌体标志蛋白 CD63 TSG101 检测而研发的一款高效且方便的外泌体鉴定试剂盒产品。试剂盒中包含以下组分和作用:

  • 外泌体蛋白专用裂解液:其组分经过优化处理,可高效裂解外泌体;
  • CD63&TSG101  蛋白阳性对照品:由血清外泌体裂解制备而成,可用于监测实验 体系;
  • CD63 TSG101 抗体:该抗体经过严格筛选而得,适用于外泌体 CD63 TSG101 蛋白的检测;
  • 该产品适用于人、大鼠、小鼠外泌体的鉴定。

 

产品组分

编号

组分

规格

41203-A

外泌体蛋白专用裂解液

20 mL

41203-B

CD63&TSG101 阳性对照品

50 μL2 μg/μL2

41203-C

Anti-CD63 antibody

10 μL

41203-D

Anti-TSG101 antibody

10 μL

41203-E

Goat anti-Mouse IgG antibody ( HRP )

10 μL

 

抗体信息

抗体名称

抗体属性

适应种属

Anti-CD63 antibody

小鼠单克隆抗体

Human, Mouse, Rat

Anti-TSG101 antibody

小鼠单克隆抗体

Human, Mouse, Rat

 

运输与保存方法

干冰运输。保存条件:-20 ℃保存,一年有效。

 

注意事项

1)避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3)本实验中 BCA WB 实验其他相关试剂需自备。

4)本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1. 实验前先将裂解液融化混匀后置于冰上(如有沉淀析出,可 37 ℃加热至溶解);

2. 将外泌体样本与裂解液按体积比 1:1 的比例添加混匀并置于冰上裂解 10min

3. 按照 4 ℃ 12000g 离心力,离心 5min,取上清,进行 BCA 蛋白浓度测定及 Western Blot 等实验;

4. 进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验时,取 CD63&TSG101 阳性对照品 10-20 μg 与实验样品同时进行(注:初次使用 CD63 & TSG101 阳性对照品上样前需 80℃煮样 5 minBCA Western Blot 实验相关试剂需自备,可根据自身的实验条件, 通过预实验确定合适的上样量以获得更佳的实验结果)。

WB 抗体使用稀释比例及大小

抗体名称

稀释比例

预测大小

Anti-CD63 antibody

1:1000-1:2000

26-50 kd

Anti-TSG101 antibody

1:500-1:1000

43-47kd

Goat anti-Mouse IgG antibody ( HRP )

1:5000-1:10000

—–

 

质检实例

实验方案:

SDS-PAGE 胶:10%分离胶样品上样量:10 μg

一抗:Anti-CD63antibody1:2000 稀释;Anti-TSG101 antibody1:1000 稀释;4 ℃孵育过夜

二抗:Anti-mouse IgGarigo ARG653501:10000 稀释;室温孵育 50 min

曝光时间:5S

实验结果:

WB外泌体鉴定试剂盒|Exosome identification Kit for Western Blot

注:P CD63&TSG101 阳性对照品;S 为外泌体样品

HB221116

Q:染色液 I 和II 有沉淀?

A:常使用透射电镜检测(形态)、粒径检测(大小)、Western blot 检测等方法鉴定提取的外泌体。在进行 Western blot 检测时,通常检测外泌体标志蛋白(CD63、CD9、CD81、TSG101 等,优先推荐  CD63  和  TSG101)。

Q:提取的外泌体进行 Western blot 前是否需要加入 RIPA 试剂裂解?

A:需要,一般按照 1:1 的比例加入 RIPA 试剂,放置在冰上裂解 10-15min,在做 western blot 之前务必做 BCA 蛋白定量。

Q:进行外泌体 Western blot 鉴定时有无内参蛋白可供选择?

A:无,该检测属于定性检测。

WB外泌体鉴定试剂盒|Exosome identification Kit for Western Blot

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外泌体鉴定试剂盒是金畔生物针对外泌体标志蛋白 CD63 TSG101 检测而研发的一款高效且方便的外泌体鉴定试剂盒产品。试剂盒中包含以下组分和作用:

  • 外泌体蛋白专用裂解液:其组分经过优化处理,可高效裂解外泌体;
  • CD63&TSG101  蛋白阳性对照品:由血清外泌体裂解制备而成,可用于监测实验 体系;
  • CD63 TSG101 抗体:该抗体经过严格筛选而得,适用于外泌体 CD63 TSG101 蛋白的检测;
  • 该产品适用于人、大鼠、小鼠外泌体的鉴定。

 

产品组分

编号

组分

规格

41203-A

外泌体蛋白专用裂解液

20 mL

41203-B

CD63&TSG101 阳性对照品

50 μL2 μg/μL2

41203-C

Anti-CD63 antibody

10 μL

41203-D

Anti-TSG101 antibody

10 μL

41203-E

Goat anti-Mouse IgG antibody ( HRP )

10 μL

 

抗体信息

抗体名称

抗体属性

适应种属

Anti-CD63 antibody

小鼠单克隆抗体

Human, Mouse, Rat

Anti-TSG101 antibody

小鼠单克隆抗体

Human, Mouse, Rat

 

运输与保存方法

干冰运输。保存条件:-20 ℃保存,一年有效。

 

注意事项

1)避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3)本实验中 BCA WB 实验其他相关试剂需自备。

4)本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1. 实验前先将裂解液融化混匀后置于冰上(如有沉淀析出,可 37 ℃加热至溶解);

2. 将外泌体样本与裂解液按体积比 1:1 的比例添加混匀并置于冰上裂解 10min

3. 按照 4 ℃ 12000g 离心力,离心 5min,取上清,进行 BCA 蛋白浓度测定及 Western Blot 等实验;

4. 进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验时,取 CD63&TSG101 阳性对照品 10-20 μg 与实验样品同时进行(注:初次使用 CD63 & TSG101 阳性对照品上样前需 80℃煮样 5 minBCA Western Blot 实验相关试剂需自备,可根据自身的实验条件, 通过预实验确定合适的上样量以获得更佳的实验结果)。

WB 抗体使用稀释比例及大小

抗体名称

稀释比例

预测大小

Anti-CD63 antibody

1:1000-1:2000

26-50 kd

Anti-TSG101 antibody

1:500-1:1000

43-47kd

Goat anti-Mouse IgG antibody ( HRP )

1:5000-1:10000

—–

 

质检实例

实验方案:

SDS-PAGE 胶:10%分离胶样品上样量:10 μg

一抗:Anti-CD63antibody1:2000 稀释;Anti-TSG101 antibody1:1000 稀释;4 ℃孵育过夜

二抗:Anti-mouse IgGarigo ARG653501:10000 稀释;室温孵育 50 min

曝光时间:5S

实验结果:

WB外泌体鉴定试剂盒|Exosome identification Kit for Western Blot

注:P CD63&TSG101 阳性对照品;S 为外泌体样品

HB221116

Q:染色液 I 和II 有沉淀?

A:常使用透射电镜检测(形态)、粒径检测(大小)、Western blot 检测等方法鉴定提取的外泌体。在进行 Western blot 检测时,通常检测外泌体标志蛋白(CD63、CD9、CD81、TSG101 等,优先推荐  CD63  和  TSG101)。

Q:提取的外泌体进行 Western blot 前是否需要加入 RIPA 试剂裂解?

A:需要,一般按照 1:1 的比例加入 RIPA 试剂,放置在冰上裂解 10-15min,在做 western blot 之前务必做 BCA 蛋白定量。

Q:进行外泌体 Western blot 鉴定时有无内参蛋白可供选择?

A:无,该检测属于定性检测。

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