迷你型蛋白酶抑制剂片剂(不含EDTA) 蛋白酶抑制剂|InStab™ Protease Cocktail(EDTA-free/mini/tablet-form)

迷你型蛋白酶抑制剂片剂(不含EDTA) 蛋白酶抑制剂|InStab™ Protease Cocktail(EDTA-free/mini/tablet-form)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

细胞裂解后的蛋白粗提物中含有大量的内源性蛋白酶,这些酶可以降解细胞提取物中的蛋白。因此为了防止蛋白纯化过程中目的蛋白不受蛋白酶的破坏,需要加入蛋白酶抑制剂对其进行活性抑制。

本品是多种常见蛋白酶抑制剂的混合物,包含AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、Pepstatin A多种成分,广谱抑制来源于动植物、细菌、酵母等组织或细胞内的多种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、氨肽酶、酸性蛋白酶等。另外,本品不含EDTA(一种金属蛋白酶抑制剂),特别适用于活性中心为金属离子依赖的蛋白。兼容于后续的固定化金属离子亲和层析(Immobilized metal-chelate affinity chromatography, IMAC)、2D凝胶电泳以及天然凝胶电泳等蛋白分析实验。

本品以片剂形式装于玻璃瓶内,单片可用于10 mL的细胞或组织裂解液

使用方法

1)取单片蛋白酶抑制剂片剂于10 mL溶液中;

2)溶解1 min,漩涡混匀即可。【注】:充分溶解后的溶液可能呈现微弱的浑浊,此现象正常。

运输和保存方法

室温运输。4℃保存,至少1年有效。其蛋白酶抑制溶液可于4℃稳定保存至少2周。

注意事项

1)本品具有广谱的蛋白酶抑制活性,但是不具有磷酸酶抑制剂活性。若进行磷酸化蛋白的研究,可使用我司的磷酸酶抑制剂混合物(100×)(货号:20110JP03)。

2)该蛋白酶抑制剂片剂在室温放置过久可能会引起变色。

3)本品可制备10 mL 1×蛋白酶抑制剂,对某些含有特别高浓度蛋白酶的样本可能需提高终浓度到2×或3×。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!

可能遇到的问题

问题

可能的原因

解决方案

抑制效果不佳

样品含有较高的蛋白酶

溶解该蛋白酶抑制剂片剂时提高其浓度

该片剂对特定的蛋白酶家族没有较好的抑制效果

该片剂中不包含该家族蛋白酶抑制剂组分

向蛋白体系中加入抑制该家族蛋白酶的抑制剂

起到抑制该家族的蛋白酶抑制剂组分浓度较低

溶解该蛋白酶抑制剂片剂时提高其浓度

Q:蛋白酶/磷酸酶混合物里面的组分有哪些?

A:该产品为片剂,是多种常见蛋白酶抑制剂的混合物,包含 AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、PepstatinA 多种成分,广谱抑制来源于动植物、细菌、酵母等组织或细胞内的多种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、氨肽酶、酸性蛋白酶等。

Q:什么时候应该选取混合型的蛋白酶抑制剂?

A:单一蛋白酶抑制剂的作用始终是受限制的,多数情况下未必能完全保证目的蛋白活性不受影响,尤其在需要检测同一样品内的多个蛋白时。“Cocktail”-蛋白酶/磷酸酶混合物此时就是最佳的选择。

Q:怎么使用,和罗氏一样吗?

A:使用方法建议参考说明书。简便程度与罗氏相同,效果与罗氏无差别。已经有超过400 家实验室在使用。

Q:该产品的特点及应用是什么?

A:该产品可同时持续抑制丝氨酸蛋白酶,半胱氨酸蛋白酶及金属蛋白酶等在内的多种蛋白酶;可应用几乎所有的组织及细胞提取物,包括动物,植物,酵母,细菌和真菌样品;1 片可应用于 10ml 裂解液;EDTA-Free 确保金属依赖性蛋白的有效纯化以及蛋白活性不受影响。

[1] Li YY, Cai RJ, Yang JY, Hendrickson TL, Xiang Y, Javid B. Clinically Relevant Mutations of Mycobacterial GatCAB Inform Regulation of Translational Fidelity. mBio. 2021;12(4):e0110021. doi:10.1128/mBio.01100-21(IF:7.867)
[2] Lin Z, Wang J, Zhu W, et al. Chicken DDX1 Acts as an RNA Sensor to Mediate IFN-β Signaling Pathway Activation in Antiviral Innate Immunity. Front Immunol. 2021;12:742074. Published 2021 Sep 23. doi:10.3389/fimmu.2021.742074(IF:7.561)
[3] Zhu C, Wang X, Li P, et al. Developing a Peptide That Inhibits DNA Repair by Blocking the Binding of Artemis and DNA Ligase IV to Enhance Tumor Radiosensitivity. Int J Radiat Oncol Biol Phys. 2021;111(2):515-527. doi:10.1016/j.ijrobp.2021.05.120(IF:7.038)
[4] Zhu Y, Song D, Zhang R, et al. A xylem-produced peptide PtrCLE20 inhibits vascular cambium activity in Populus. Plant Biotechnol J. 2020;18(1):195-206. doi:10.1111/pbi.13187(IF:6.840)
[5] Li D, Ding J, Liu TL, et al. SARS-CoV-2 receptor binding domain radio-probe: a non-invasive approach for angiotensin-converting enzyme 2 mapping in mice [published correction appears in Acta Pharmacol Sin. 2022 Feb 3;:]. Acta Pharmacol Sin. 2022;43(7):1749-1757. doi:10.1038/s41401-021-00809-y(IF:6.150)
[6] Jiang M, Xie H, Zhang C, et al. Enhancing fractalkine/CX3CR1 signalling pathway can reduce neuroinflammation by attenuating microglia activation in experimental diabetic retinopathy. J Cell Mol Med. 2022;26(4):1229-1244. doi:10.1111/jcmm.17179(IF:5.310)
[7] He L, Gao K, Liu H, Wang J, Li X, He C. Smooth muscle cell-specific knockout of interferon gamma (IFN-γ) receptor attenuates intimal hyperplasia via STAT1-KLF4 activation [published online ahead of print, 2021 May 25]. Life Sci. 2021;119651. doi:10.1016/j.lfs.2021.119651(IF:5.037)
[8] Niu Q, Cheng Y, Wang H, Yan Y, Sun J. Chicken DDX3X Activates IFN-β via the chSTING-chIRF7-IFN-β Signaling Axis. Front Immunol. 2019;10:822. Published 2019 Apr 17. doi:10.3389/fimmu.2019.00822(IF:4.716)
[9] Li D, Qiu X, Yang J, Liu T, Luo Y, Lu Y. Generation of Human Lens Epithelial-Like Cells From Patient-Specific Induced Pluripotent Stem Cells. J Cell Physiol. 2016;231(12):2555-2562. doi:10.1002/jcp.25374(IF:4.155)
[10] Li D, Wan Z, Li X, et al. Alternatively spliced down syndrome cell adhesion molecule (Dscam) controls innate immunity in crab. J Biol Chem. 2019;294(44):16440-16450. doi:10.1074/jbc.RA119.010247(IF:4.106)
[11] Lin Z, Wang J, Zhang N, et al. Functional characterization of goose IRF1 in IFN induction and anti-NDV infection. Vet Res. 2022;53(1):29. Published 2022 Apr 4. doi:10.1186/s13567-022-01046-9(IF:3.699)
[12] Cheng Y, Ma J, Liu Y, et al. Chicken TBK1 interacts with STING and is involved in IFN-β signaling regulation. Dev Comp Immunol. 2017;77:200-209. doi:10.1016/j.dci.2017.08.011(IF:3.218)
[13] Cheng Y, Liu Y, Wang Y, et al. Chicken DNA virus sensor DDX41 activates IFN-β signaling pathway dependent on STING. Dev Comp Immunol. 2017;76:334-342. doi:10.1016/j.dci.2017.07.001(IF:3.218)
[14] Zhu M, Yan X, Zhao Y, et al. lncRNA LINC00284 promotes nucleus pulposus cell proliferation and ECM synthesis via regulation of the miR‑205‑3p/Wnt/β‑catenin axis. Mol Med Rep. 2022;25(5):179. doi:10.3892/mmr.2022.12695(IF:2.952)
[15] Liu Y, Cheng Y, Shan W, et al. Chicken interferon regulatory factor 1 (IRF1) involved in antiviral innate immunity via regulating IFN-β production. Dev Comp Immunol. 2018;88:77-82. doi:10.1016/j.dci.2018.07.003(IF:2.913)

产品描述

细胞裂解后的蛋白粗提物中含有大量的内源性蛋白酶,这些酶可以降解细胞提取物中的蛋白。因此为了防止蛋白纯化过程中目的蛋白不受蛋白酶的破坏,需要加入蛋白酶抑制剂对其进行活性抑制。

本品是多种常见蛋白酶抑制剂的混合物,包含AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、Pepstatin A多种成分,广谱抑制来源于动植物、细菌、酵母等组织或细胞内的多种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、氨肽酶、酸性蛋白酶等。另外,本品不含EDTA(一种金属蛋白酶抑制剂),特别适用于活性中心为金属离子依赖的蛋白。兼容于后续的固定化金属离子亲和层析(Immobilized metal-chelate affinity chromatography, IMAC)、2D凝胶电泳以及天然凝胶电泳等蛋白分析实验。

本品以片剂形式装于玻璃瓶内,单片可用于10 mL的细胞或组织裂解液

使用方法

1)取单片蛋白酶抑制剂片剂于10 mL溶液中;

2)溶解1 min,漩涡混匀即可。【注】:充分溶解后的溶液可能呈现微弱的浑浊,此现象正常。

运输和保存方法

室温运输。4℃保存,至少1年有效。其蛋白酶抑制溶液可于4℃稳定保存至少2周。

注意事项

1)本品具有广谱的蛋白酶抑制活性,但是不具有磷酸酶抑制剂活性。若进行磷酸化蛋白的研究,可使用我司的磷酸酶抑制剂混合物(100×)(货号:20110JP03)。

2)该蛋白酶抑制剂片剂在室温放置过久可能会引起变色。

3)本品可制备10 mL 1×蛋白酶抑制剂,对某些含有特别高浓度蛋白酶的样本可能需提高终浓度到2×或3×。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!

可能遇到的问题

问题

可能的原因

解决方案

抑制效果不佳

样品含有较高的蛋白酶

溶解该蛋白酶抑制剂片剂时提高其浓度

该片剂对特定的蛋白酶家族没有较好的抑制效果

该片剂中不包含该家族蛋白酶抑制剂组分

向蛋白体系中加入抑制该家族蛋白酶的抑制剂

起到抑制该家族的蛋白酶抑制剂组分浓度较低

溶解该蛋白酶抑制剂片剂时提高其浓度

Q:蛋白酶/磷酸酶混合物里面的组分有哪些?

A:该产品为片剂,是多种常见蛋白酶抑制剂的混合物,包含 AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、PepstatinA 多种成分,广谱抑制来源于动植物、细菌、酵母等组织或细胞内的多种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、氨肽酶、酸性蛋白酶等。

Q:什么时候应该选取混合型的蛋白酶抑制剂?

A:单一蛋白酶抑制剂的作用始终是受限制的,多数情况下未必能完全保证目的蛋白活性不受影响,尤其在需要检测同一样品内的多个蛋白时。“Cocktail”-蛋白酶/磷酸酶混合物此时就是最佳的选择。

Q:怎么使用,和罗氏一样吗?

A:使用方法建议参考说明书。简便程度与罗氏相同,效果与罗氏无差别。已经有超过400 家实验室在使用。

Q:该产品的特点及应用是什么?

A:该产品可同时持续抑制丝氨酸蛋白酶,半胱氨酸蛋白酶及金属蛋白酶等在内的多种蛋白酶;可应用几乎所有的组织及细胞提取物,包括动物,植物,酵母,细菌和真菌样品;1 片可应用于 10ml 裂解液;EDTA-Free 确保金属依赖性蛋白的有效纯化以及蛋白活性不受影响。

[1] Li YY, Cai RJ, Yang JY, Hendrickson TL, Xiang Y, Javid B. Clinically Relevant Mutations of Mycobacterial GatCAB Inform Regulation of Translational Fidelity. mBio. 2021;12(4):e0110021. doi:10.1128/mBio.01100-21(IF:7.867)
[2] Lin Z, Wang J, Zhu W, et al. Chicken DDX1 Acts as an RNA Sensor to Mediate IFN-β Signaling Pathway Activation in Antiviral Innate Immunity. Front Immunol. 2021;12:742074. Published 2021 Sep 23. doi:10.3389/fimmu.2021.742074(IF:7.561)
[3] Zhu C, Wang X, Li P, et al. Developing a Peptide That Inhibits DNA Repair by Blocking the Binding of Artemis and DNA Ligase IV to Enhance Tumor Radiosensitivity. Int J Radiat Oncol Biol Phys. 2021;111(2):515-527. doi:10.1016/j.ijrobp.2021.05.120(IF:7.038)
[4] Zhu Y, Song D, Zhang R, et al. A xylem-produced peptide PtrCLE20 inhibits vascular cambium activity in Populus. Plant Biotechnol J. 2020;18(1):195-206. doi:10.1111/pbi.13187(IF:6.840)
[5] Li D, Ding J, Liu TL, et al. SARS-CoV-2 receptor binding domain radio-probe: a non-invasive approach for angiotensin-converting enzyme 2 mapping in mice [published correction appears in Acta Pharmacol Sin. 2022 Feb 3;:]. Acta Pharmacol Sin. 2022;43(7):1749-1757. doi:10.1038/s41401-021-00809-y(IF:6.150)
[6] Jiang M, Xie H, Zhang C, et al. Enhancing fractalkine/CX3CR1 signalling pathway can reduce neuroinflammation by attenuating microglia activation in experimental diabetic retinopathy. J Cell Mol Med. 2022;26(4):1229-1244. doi:10.1111/jcmm.17179(IF:5.310)
[7] He L, Gao K, Liu H, Wang J, Li X, He C. Smooth muscle cell-specific knockout of interferon gamma (IFN-γ) receptor attenuates intimal hyperplasia via STAT1-KLF4 activation [published online ahead of print, 2021 May 25]. Life Sci. 2021;119651. doi:10.1016/j.lfs.2021.119651(IF:5.037)
[8] Niu Q, Cheng Y, Wang H, Yan Y, Sun J. Chicken DDX3X Activates IFN-β via the chSTING-chIRF7-IFN-β Signaling Axis. Front Immunol. 2019;10:822. Published 2019 Apr 17. doi:10.3389/fimmu.2019.00822(IF:4.716)
[9] Li D, Qiu X, Yang J, Liu T, Luo Y, Lu Y. Generation of Human Lens Epithelial-Like Cells From Patient-Specific Induced Pluripotent Stem Cells. J Cell Physiol. 2016;231(12):2555-2562. doi:10.1002/jcp.25374(IF:4.155)
[10] Li D, Wan Z, Li X, et al. Alternatively spliced down syndrome cell adhesion molecule (Dscam) controls innate immunity in crab. J Biol Chem. 2019;294(44):16440-16450. doi:10.1074/jbc.RA119.010247(IF:4.106)
[11] Lin Z, Wang J, Zhang N, et al. Functional characterization of goose IRF1 in IFN induction and anti-NDV infection. Vet Res. 2022;53(1):29. Published 2022 Apr 4. doi:10.1186/s13567-022-01046-9(IF:3.699)
[12] Cheng Y, Ma J, Liu Y, et al. Chicken TBK1 interacts with STING and is involved in IFN-β signaling regulation. Dev Comp Immunol. 2017;77:200-209. doi:10.1016/j.dci.2017.08.011(IF:3.218)
[13] Cheng Y, Liu Y, Wang Y, et al. Chicken DNA virus sensor DDX41 activates IFN-β signaling pathway dependent on STING. Dev Comp Immunol. 2017;76:334-342. doi:10.1016/j.dci.2017.07.001(IF:3.218)
[14] Zhu M, Yan X, Zhao Y, et al. lncRNA LINC00284 promotes nucleus pulposus cell proliferation and ECM synthesis via regulation of the miR‑205‑3p/Wnt/β‑catenin axis. Mol Med Rep. 2022;25(5):179. doi:10.3892/mmr.2022.12695(IF:2.952)
[15] Liu Y, Cheng Y, Shan W, et al. Chicken interferon regulatory factor 1 (IRF1) involved in antiviral innate immunity via regulating IFN-β production. Dev Comp Immunol. 2018;88:77-82. doi:10.1016/j.dci.2018.07.003(IF:2.913)