PAGE凝胶快速制备试剂盒(10%) PAGE凝胶制备试剂盒
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蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶（PAGE凝胶）来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
本试剂盒适用于Tris-甘氨酸电泳体系，其中包括快速制备PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶设备即可配胶，大大简化了制胶过程，此外，本品还具有以下特点：
1）制胶速度快——最少仅需2 min即可灌制多块凝胶，无需计算所需溶液量，无需稀释；
2）彩色浓缩胶——浓缩胶呈彩色，为点样提供最大便利，所含颜色配方不影响电泳、染色及转膜等后续应用；
3）安全无异味——无需使用TEMED，避免接触过硫酸铵粉末，远离有毒试剂；
4）稳定性高——试剂盒配套提供的硫酸铵催化剂溶液属改良型APS，其稳定性和催化效能都得到大大提升。
5）一步法灌胶——可无需封闭分离胶，直接添加浓缩胶（请熟读配胶步骤）。
本试剂盒所配制凝胶可用于变性PAGE凝胶电泳，也可用于非变性PAGE凝胶电泳。该规格可配制不同厚度的凝胶，配制数量分别为：0.75 mm厚度胶（约125块）、1.00mm厚度胶（约90块）、1.50mm厚度胶（约60块）。
产品信息
|
类别 |
编号 |
组分名称 |
20325JP62（125 mini gels） |
保存方式 |
|
Part Ⅰ |
20325-A |
10%-分离胶缓冲液 |
250 mL |
2~8℃ |
|
20325–B |
10%-分离胶溶液 |
250 mL |
2~8℃ |
|
|
20325–C |
10%-彩色浓缩胶缓冲液 |
80 mL |
2~8℃ |
|
|
20325–D |
10%-浓缩胶溶液 |
80 mL |
2~8℃ |
|
|
20325–E |
制胶杯 |
3个 |
2~8℃ |
|
|
Part Ⅱ |
20325–F |
改良型过硫酸铵溶液 |
8 mL |
-25~-15℃ |
储存条件
2~8℃保存。其中F组分改良型过硫酸铵溶液如果长时间不用，需保存于-25~-15℃。有效期1年。
使用说明：建议配胶时不要一次性配置太多块胶，避免来不及添加上层液（推荐最多2-3块）
1 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】
2 制胶流程（以一块0.75/ 1.0/ 1.5 mm的胶为例）
1）取等体积分离胶缓冲液和分离胶溶液混匀，即取两种溶液各2.0/ 2.7/ 4.0 mL。
2）往步骤1中的混合溶液中加入40/ 55/ 80 μL的改良型过硫酸铵溶液（凝固太快可减半过硫酸铵使用量），充分混匀。
3）将步骤2中的溶液注入制胶玻璃板中。注意加入分离胶后要在2 min内将浓缩胶注入凝胶模具内，且在灌注浓缩胶时要缓慢，防止浓缩胶与分离胶混合在一起。如果个人觉得配置困难，也可改编为自行用乙醇封闭之后再进行配置浓缩胶。
4）浓缩胶的配置：取等体积浓缩胶缓冲液和浓缩胶溶液混匀，即取两种溶液各0.5/ 0.75/ 1.0 mL，然后加入10/ 15/ 20 μL的改良型过硫酸铵溶液，充分混匀。
5）注入制胶玻璃板中，插入梳齿（插胶梳时切勿用力过猛，轻轻插入）。
6）待15 min浓缩胶凝固后，拔去梳齿即可用于电泳。注：请尽量使用新鲜配置的电泳缓冲液。
注意事项
1. 建议电泳时电压在100-120V之间，如需要加快电泳速度，可增加至150V。
2. 灌胶前，务必将凝胶溶液及缓冲液平衡到室温（如室温放置几分钟），可有效避免凝胶中气泡的形成。
3. 过硫酸铵溶液（改良型）的使用量仅作参考，实际用量可根据个人实验习惯和经验增加或减少。加入较多量的过硫酸铵可加快凝胶速度，反之亦然。PAGE凝胶的凝聚速度与温度和过硫酸铵的用量密切相关。
4. 本产品已加入适量TEMED的替代品，如需进一步加快凝胶速度，临配胶前可按需补充适量TEMED。
5. 胶的凝固与温度有显著的正相关性。同等条件下，温度越高，凝固速度越快。
6. 彩色浓缩胶在储存过程中可能会产生少量沉淀，属正常现象，请放心使用。使用前请轻柔混匀。
7. 改良型过硫酸铵溶液保存于-25~-15℃。为方便吸取使用，建议分装保存，已开盖使用中的过硫酸铵溶液可置于2~8℃保存。
8. 本产品仅作科研用途！
9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶参考分离范围
|
SDS-PAGE分离胶浓度 |
最佳分离范围（kDa） |
|
8%凝胶 |
30-200 |
|
10%凝胶 |
20-80 |
|
12.5%凝胶 |
15-60 |
|
15%凝胶 |
10-45 |
Ver.CN20230620
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶（PAGE凝胶）来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
本试剂盒适用于Tris-甘氨酸电泳体系，其中包括快速制备PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶设备即可配胶，大大简化了制胶过程，此外，本品还具有以下特点：
1）制胶速度快——最少仅需2 min即可灌制多块凝胶，无需计算所需溶液量，无需稀释；
2）彩色浓缩胶——浓缩胶呈彩色，为点样提供最大便利，所含颜色配方不影响电泳、染色及转膜等后续应用；
3）安全无异味——无需使用TEMED，避免接触过硫酸铵粉末，远离有毒试剂；
4）稳定性高——试剂盒配套提供的硫酸铵催化剂溶液属改良型APS，其稳定性和催化效能都得到大大提升。
5）一步法灌胶——可无需封闭分离胶，直接添加浓缩胶（请熟读配胶步骤）。
本试剂盒所配制凝胶可用于变性PAGE凝胶电泳，也可用于非变性PAGE凝胶电泳。该规格可配制不同厚度的凝胶，配制数量分别为：0.75 mm厚度胶（约125块）、1.00mm厚度胶（约90块）、1.50mm厚度胶（约60块）。
产品信息
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类别 |
编号 |
组分名称 |
20325JP62（125 mini gels） |
保存方式 |
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Part Ⅰ |
20325-A |
10%-分离胶缓冲液 |
250 mL |
2~8℃ |
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20325–B |
10%-分离胶溶液 |
250 mL |
2~8℃ |
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20325–C |
10%-彩色浓缩胶缓冲液 |
80 mL |
2~8℃ |
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20325–D |
10%-浓缩胶溶液 |
80 mL |
2~8℃ |
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20325–E |
制胶杯 |
3个 |
2~8℃ |
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Part Ⅱ |
20325–F |
改良型过硫酸铵溶液 |
8 mL |
-25~-15℃ |
储存条件
2~8℃保存。其中F组分改良型过硫酸铵溶液如果长时间不用，需保存于-25~-15℃。有效期1年。
使用说明：建议配胶时不要一次性配置太多块胶，避免来不及添加上层液（推荐最多2-3块）
1 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】
2 制胶流程（以一块0.75/ 1.0/ 1.5 mm的胶为例）
1）取等体积分离胶缓冲液和分离胶溶液混匀，即取两种溶液各2.0/ 2.7/ 4.0 mL。
2）往步骤1中的混合溶液中加入40/ 55/ 80 μL的改良型过硫酸铵溶液（凝固太快可减半过硫酸铵使用量），充分混匀。
3）将步骤2中的溶液注入制胶玻璃板中。注意加入分离胶后要在2 min内将浓缩胶注入凝胶模具内，且在灌注浓缩胶时要缓慢，防止浓缩胶与分离胶混合在一起。如果个人觉得配置困难，也可改编为自行用乙醇封闭之后再进行配置浓缩胶。
4）浓缩胶的配置：取等体积浓缩胶缓冲液和浓缩胶溶液混匀，即取两种溶液各0.5/ 0.75/ 1.0 mL，然后加入10/ 15/ 20 μL的改良型过硫酸铵溶液，充分混匀。
5）注入制胶玻璃板中，插入梳齿（插胶梳时切勿用力过猛，轻轻插入）。
6）待15 min浓缩胶凝固后，拔去梳齿即可用于电泳。注：请尽量使用新鲜配置的电泳缓冲液。
注意事项
1. 建议电泳时电压在100-120V之间，如需要加快电泳速度，可增加至150V。
2. 灌胶前，务必将凝胶溶液及缓冲液平衡到室温（如室温放置几分钟），可有效避免凝胶中气泡的形成。
3. 过硫酸铵溶液（改良型）的使用量仅作参考，实际用量可根据个人实验习惯和经验增加或减少。加入较多量的过硫酸铵可加快凝胶速度，反之亦然。PAGE凝胶的凝聚速度与温度和过硫酸铵的用量密切相关。
4. 本产品已加入适量TEMED的替代品，如需进一步加快凝胶速度，临配胶前可按需补充适量TEMED。
5. 胶的凝固与温度有显著的正相关性。同等条件下，温度越高，凝固速度越快。
6. 彩色浓缩胶在储存过程中可能会产生少量沉淀，属正常现象，请放心使用。使用前请轻柔混匀。
7. 改良型过硫酸铵溶液保存于-25~-15℃。为方便吸取使用，建议分装保存，已开盖使用中的过硫酸铵溶液可置于2~8℃保存。
8. 本产品仅作科研用途！
9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶参考分离范围
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SDS-PAGE分离胶浓度 |
最佳分离范围（kDa） |
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8%凝胶 |
30-200 |
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10%凝胶 |
20-80 |
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12.5%凝胶 |
15-60 |
|
15%凝胶 |
10-45 |
Ver.CN20230620
Q：该产品适用于哪些实验？
A：本试剂盒所配制凝胶可用于变性PAGE 凝胶电泳，也可用于非变性PAGE凝胶电泳。
Q：该产品如何储存？
A：4°保存即可，但改良型过硫酸铵溶液如果长时间不用，需保存于-20℃。
Q：如果想要加快制胶时间，可以怎么操作？
A：可加快电泳速度，增加至 150V。
Q：为什么制胶过程中有气泡？
A：可能是未静置。灌胶前，务必将凝胶溶液平衡到室温（如放置几分钟），可有效避免凝胶中气泡的形成。
[1] Su G, Wang W, Zhao X, et al. Enhancer architecture-dependent multilayered transcriptional regulation orchestrates RA signaling-induced early lineage differentiation of JPCs. Nucleic Acids Res. 2021;49(20):11575-11595. doi:10.1093/nar/gkab1001(IF:16.971)
[2] Zang C, Liu H, Ju C, et al. Gardenia jasminoides J. Ellis extract alleviated white matter damage through promoting the differentiation of oligodendrocyte precursor cells via suppressing neuroinflammation. Food Funct. 2022;13(4):2131-2141. Published 2022 Feb 21. doi:10.1039/d1fo02127c(IF:5.396)
[3] Li Y, Qin G, Du J, Yue P, Zhang Y, Hou N. circRNA LDLRAD3 Enhances the Malignant Behaviors of NSCLC Cells via the miR-20a-5p-SLC7A5 Axis Activating the mTORC1 Signaling Pathway. J Healthc Eng. 2022;2022:2373580. Published 2022 Jan 6. doi:10.1155/2022/2373580(IF:2.682)