酵母重组表达N-糖苷酶 F(PNGase F,Recombinant)

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产品简介

 

        N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。翌圣酵母重组表达N-糖苷酶 F比活性:750000 U/mL可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

  另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶 F(Cat#20407JP比活性:100000 U/mL糖苷内切酶HCat#20414JP)糖苷内切酶S(Cat#20413JP)

 

产品信息

 

编号

组分名称

20415JP01

20415JP02

20415-A

PNGase F

15 KU

75 KU

20415-B1

Buffer 110×)

150 μL

750 μL

20415B2

Buffer 210×)

300 μL

1500 μL

20415B3

10% NP-40

300 μL

1500 μL

 

产品性质

 

中文别名(Chinese synonym)

N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F

英文别名(English synonym)

PNGase F

来源(Source)

酵母重组表达

分子量(Molecular weight)

36 kDa

比活性(Specific activity)

750000 U/mL

缓冲液组分(Buffer)

20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50% Glycerol

酶活定义(Unit Definition)

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

储存条件

 

-15~-25℃保存,有效期1年。

 

使用说明

 

  1. 变性条件下蛋白质去糖基化

1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;

2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;

3)加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10%NP-40、6 μL去离子水,总反应体积20 μL

4)加入0.2~0.5 μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。

  1. 非变性条件下蛋白质去糖基化

1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。

2)加入 0.5~1 μL 的PNGase F, 轻轻混匀。

3)37°C 孵育 4-24 h。

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20230205

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产品简介

 

        N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。翌圣酵母重组表达N-糖苷酶 F比活性:750000 U/mL可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

  另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶 F(Cat#20407JP比活性:100000 U/mL糖苷内切酶HCat#20414JP)糖苷内切酶S(Cat#20413JP)

 

产品信息

 

编号

组分名称

20415JP01

20415JP02

20415-A

PNGase F

15 KU

75 KU

20415-B1

Buffer 110×)

150 μL

750 μL

20415B2

Buffer 210×)

300 μL

1500 μL

20415B3

10% NP-40

300 μL

1500 μL

 

产品性质

 

中文别名(Chinese synonym)

N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F

英文别名(English synonym)

PNGase F

来源(Source)

酵母重组表达

分子量(Molecular weight)

36 kDa

比活性(Specific activity)

750000 U/mL

缓冲液组分(Buffer)

20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50% Glycerol

酶活定义(Unit Definition)

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

储存条件

 

-15~-25℃保存,有效期1年。

 

使用说明

 

  1. 变性条件下蛋白质去糖基化

1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;

2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;

3)加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10%NP-40、6 μL去离子水,总反应体积20 μL

4)加入0.2~0.5 μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。

  1. 非变性条件下蛋白质去糖基化

1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。

2)加入 0.5~1 μL 的PNGase F, 轻轻混匀。

3)37°C 孵育 4-24 h。

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20230205

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