Dextran G25 M葡聚糖凝胶过滤介质是一种具有三维网状结构的高分子化合物，它是由葡聚糖加入交联剂环氧氯丙烷通过醚键互相交联聚合而成。层析时，大于层析介质孔径的大分子，被阻于凝胶相外，沿着层析介质颗粒之间的间隙走，下移速度最快，故最先洗脱下来，中等大小的分子进入部分层析介质孔中，洗脱速度次之，而小分子因为能够进入全部层析介质孔中，受到阻力最大，故最后被洗脱下来，由此，物质得到分离和纯化。 Dextran G25 M葡聚糖层析介质分离范围为1000~5000，适用于脱盐、肽与其它小分子的分离。

 

产品性质

基质	葡聚糖
分离范围	1000~5000
粒径（干）	75-150 µm
粒径（湿）	85-260 µm
溶胀度	4~6 mL/g干粉
最大耐压	0.3 MPa
最大流速	150 cm/h
PH稳定性	2~13

 

运输和保存方法

1.常温运输，避免日晒、雨淋、重压。

2.干粉保存在 4~30℃，干燥、通风、清洁处；溶胀后的介质保存在 4~8℃，20%乙醇溶液中，避免与氧化剂接触，不可冷冻。

3.有效期4年。

 

注意事项

1.样品必须澄清没有颗粒。

2.样品与层析介质必须彻底平衡后，才能进行柱层析。

3.所装的柱床必须表面平整，无沟流及气泡，否则应重装。

4.洗脱过程中应严格控制流速，且勿过快。

5.加样及整个洗脱过程中，严防柱面变干。

6.本品应避免与氧化剂接触，避免长时间暴露在空气中。

7.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

8.本产品仅作科研用途！

 

使用方法

1 预处理

葡聚糖凝胶过滤层析介质一般是干粉状态，使用前必须在过剩的缓冲溶液中进行溶胀（室温溶胀过夜，或者在沸水中溶胀 1h，避免使用磁力搅拌、药匙或者玻璃棒搅拌造成填料损坏）。溶胀后，使用缓冲液进行调节，形成浓稠的浆液，75%（体积百分比）左右，再进行脱气。

2 装柱

装柱按照标准操作规程操作。装柱前，必须保证每种材料都处于工作温度，缓冲液、填料的温度须一致（室温）。

3 平衡 

使用 2~5 倍柱床体积的上样平衡液平衡柱子，务必使流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。

4 上样

1）介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的，分子量大的先流出来。

2）凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2% 的床体积，视分离情况可以调整；脱盐时建议上样量小于10%的柱体积，最大不超过30%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关。

3）样品中如有杂质或沉淀应该在上样前过滤或离心除去，样品的粘度不能过高，否则影响分离效果。

5 洗脱

可以采用无盐水，也可以采用用平衡缓冲液做洗脱剂进行洗脱。在平衡缓冲液中加入 NaCl等梯度洗脱或者盐梯度洗脱都可以完全分离。

6 在位清洗

凝胶使用10次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。 方法是以40 cm/h用1 M氢氧化钠反向洗4 个柱床体积，再以至少3个柱床体积平衡缓冲液再生。

  

                                          HB220524

 

Q：这个产品的主要应用是什么？

A：脱盐和置换缓冲液。

Q：脱盐对柱效要求是不是不高，自己装柱对高径比有没要求？

A：脱盐对柱效的要求不是很高。高：直径=5：1。

Q：这个产品的用于脱盐蛋白的分子量什么要求？

A：G25如果用于脱盐目的蛋白要大于5KD。

Q：这个产品可以用于分离不同分子量大小的蛋白吗？

A：可以，柱高至少大于50cm。但此填料耐压性能不好，如果要纯化不同分子量蛋白可选择我们的蛋白精细纯化系列Geldex琼脂糖的填料。

Q：G25脱盐柱的脱盐效率是多少？

A：90%以上。

Q：G25脱盐柱可以串联使用吗？

A：可以，不推荐5ml预装柱连接超过3个，多个串联会影响脱盐效果的。

Q：G-25脱盐柱这个产品能否脱SDS？可去除蛋白溶液里的EDTA吗？游离的金属离子可以用脱盐柱去除吗？

A：不能，SDS一般是和蛋白质结合在一起的。可以去除蛋白溶液里的EDTA和游离的金属离子。

Q：脱盐柱G25可以重复使用多少次？

A：与实际样品有关，填料色素沉淀，塌柱，流速慢等问题且用氢氧化钠清洗后无法改善就不能再使用了。一般能重复使用5-10次。