Haematologic HCVII-0030说明书

Haematologic HCVII-0030说明书

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCVII-0030说明书

HTI HCVII-0030

Human Coagulation Factor VII

 

人凝血因子VII

 

 

人因子VII
的结构域表示人因子VII的结构域结构,其中:GLA =含有γ-羧基谷氨酸残基的区域,EGF =含有与人表皮生长因子同源的序列的区域,催化域=含有丝氨酸蛋白酶催化三联体的区域。因子Xa切割因子VII以形成因子VIIa的位点用箭头表示。

Human Coagulation Factor VII

  • HCVII-0030 Human Factor VII

本土化

等离子体

血浆浓度

0.5μg/ ml(2) – (基于活动测量)

行动方式

酶原; 丝氨酸蛋白酶因子VIIa的前体

分子量

50,000(2)

消光系数

Ë

1%

1厘米,280纳米

 

= 13.9

 

等电点

4.8-5.1(6) – (基于对牛因子VII的分析)

结构体

单链,NH2-末端gla-结构域,两个EGF结构域

碳水化合物百分比

13%(7) – (基于对牛因子VII的分析)

翻译后修改

一个β-羟基天冬氨酸(8),十个玻璃残留物(9)

  •  

尺寸

20微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

  •  

活动决定

凝血试验

保质期(妥善保存)

12个月

  •  

人因子VII是单链,维生素K依赖性血浆糖蛋白,其在肝脏中合成(1-3)。在分泌到血液中之前,通过维生素K依赖性羧化酶的翻译后修饰产生位于分子的NH 2末端部分的十羧基谷氨酸(gla)残基,其促进细胞膜结合。在凝血过程中,因子VII被蛋白水解活化成丝氨酸蛋白酶VIIa因子。因子VII可以被凝血酶,因子IXa,因子Xa或因子XIIa激活。活化导致精氨酸-152的COOH-末端侧上的单链分子裂解,产生NH2-末端衍生的轻链(Mr = 20,000)和COOH-末端衍生的重链(Mr = 30,000),其保留通过单个二硫键共价结合。轻链区含有gla结构域,以及与人表皮生长因子(EGF)同源的两个生长因子结构域。因子VII中鉴定的单一β-羟基天冬氨酸也位于轻链区。因子VIIa的重链区含有催化结构域。因子VIIa和辅因子组织因子可以以钙依赖性方式结合在带负电荷的细胞表面上,以形成外在因子Xase酶复合物。该酶复合物催化因子IX转化为因子IXa和因子X转化为因子Xa。分离出因子VII的cDNA并测定核苷酸序列(4)。因子VII与其他丝氨酸蛋白酶具有广泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 以及与人表皮生长因子(EGF)同源的两个生长因子结构域。因子VII中鉴定的单一β-羟基天冬氨酸也位于轻链区。因子VIIa的重链区含有催化结构域。因子VIIa和辅因子组织因子可以以钙依赖性方式结合在带负电荷的细胞表面上,以形成外在因子Xase酶复合物。该酶复合物催化因子IX转化为因子IXa和因子X转化为因子Xa。分离出因子VII的cDNA并测定核苷酸序列(4)。因子VII与其他丝氨酸蛋白酶具有广泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 以及与人表皮生长因子(EGF)同源的两个生长因子结构域。因子VII中鉴定的单一β-羟基天冬氨酸也位于轻链区。因子VIIa的重链区含有催化结构域。因子VIIa和辅因子组织因子可以以钙依赖性方式结合在带负电荷的细胞表面上,以形成外在因子Xase酶复合物。该酶复合物催化因子IX转化为因子IXa和因子X转化为因子Xa。分离出因子VII的cDNA并测定核苷酸序列(4)。因子VII与其他丝氨酸蛋白酶具有广泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 因子VII中鉴定的单一β-羟基天冬氨酸也位于轻链区。因子VIIa的重链区含有催化结构域。因子VIIa和辅因子组织因子可以以钙依赖性方式结合在带负电荷的细胞表面上,以形成外在因子Xase酶复合物。该酶复合物催化因子IX转化为因子IXa和因子X转化为因子Xa。分离出因子VII的cDNA并测定核苷酸序列(4)。因子VII与其他丝氨酸蛋白酶具有广泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 因子VII中鉴定的单一β-羟基天冬氨酸也位于轻链区。因子VIIa的重链区含有催化结构域。因子VIIa和辅因子组织因子可以以钙依赖性方式结合在带负电荷的细胞表面上,以形成外在因子Xase酶复合物。该酶复合物催化因子IX转化为因子IXa和因子X转化为因子Xa。分离出因子VII的cDNA并测定核苷酸序列(4)。因子VII与其他丝氨酸蛋白酶具有广泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 可以以钙依赖性方式在带负电的细胞表面上结合以形成外在因子Xase酶复合物。该酶复合物催化因子IX转化为因子IXa和因子X转化为因子Xa。分离出因子VII的cDNA并测定核苷酸序列(4)。因子VII与其他丝氨酸蛋白酶具有广泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C. 可以以钙依赖性方式在带负电的细胞表面上结合以形成外在因子Xase酶复合物。该酶复合物催化因子IX转化为因子IXa和因子X转化为因子Xa。分离出因子VII的cDNA并测定核苷酸序列(4)。因子VII与其他丝氨酸蛋白酶具有广泛的序列同源性,包括因子IX,因子X和蛋白C.

使用常规技术(2)和免疫亲和色谱(5)的组合纯化人因子VII。纯化的蛋白质以50%(vol / vol)甘油/ H2O供应,应储存在-20oC。通过SDS-PAGE分析测定纯度,并在因子VII凝固测定中测量活性。

 

凝胶

Novex 4-12%Bis-Tris

加载

人因子VII,每泳道1μg

缓冲

MOPS

标准

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脱氢酶(51 kDa),酒精脱氢酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等离子体

血浆浓度

0.5μg/ ml(2) – (基于活动测量)

行动方式

酶原; 丝氨酸蛋白酶因子VIIa的前体

分子量

50,000(2)

消光系数

Ë

1%

1厘米,280纳米

 

= 13.9

 

等电点

4.8-5.1(6) – (基于对牛因子VII的分析)

结构体

单链,NH2-末端gla-结构域,两个EGF结构域

碳水化合物百分比

13%(7) – (基于对牛因子VII的分析)

翻译后修改

一个β-羟基天冬氨酸(8),十个玻璃残留物(9)

 

 

 

 

 

 

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