encapsula CLD-8927说明书
Fluoroliposome®-DiA
SKU# CLD-8927
SIZE | PRICE |
2-ml | $110.00 |
5-ml | $215.00 |
10-ml | $399.00 |
15-ml | $545.00 |
20-ml | $725.00 |
25-ml | $875.00 |
描述
有五种荧光对照脂质体产品(Fluoroliposome®)用于Clodrosome®(氯膦酸盐脂质体)。所有五种荧光脂质体在其膜内掺入亲脂性染料。它们不溶于水; 然而,当掺入膜中时,它们的荧光很容易检测到。DiI,DiO,DiD,DiR和DiA覆盖范围广泛的激发和发射波长,从300s到900s。DiI和DiO具有约65nm的荧光激发和发射大值,便于双色标记。DiA的发射光谱非常宽,根据所使用的滤光器,可以将其检测为绿色,橙色或甚至红色荧光。DiI,DiO,DiD和DiR属于二烷基羰基青化物类化合物。二烷基羰花青的光谱性质很大程度上与烷基链的长度无关。相反,它们由端子环系统中的杂原子和连接桥的长度决定。它们在脂质环境中具有*的消光系数,中等的荧光量子产率和短的激发态寿命(约1ns)。各染料的荧光光谱如下所示。
您可以根据实验室中使用的荧光设备和过滤器的类型选择Fluoroliposome®。Clodronate脂质体不能简单地制成荧光,因为标记的Clodrosome®可能会产生不准确和/或无法解释的数据。有关更多信息,请参阅技术说明部分。
DiA的荧光激发和发射光谱。
巨噬细胞摄取含有DiA的荧光脂质体。
技术信息
Fluoroliposome®-DIA
脂质成分 | 浓度(mg / ml) | 浓度(mM) | 摩尔比百分比 |
---|---|---|---|
总 | 23毫克/毫升 | 35.1 mM | 100 |
L-α磷脂酰胆碱 | 18.8 | 24.3 | 70 |
胆固醇 | 4.2 | 10.9 | 三十 |
荧光染料 | 激发/发射(nm) | 浓度(mg / ml) | 浓度(mM) |
---|---|---|---|
4-(4-(二十六烷基氨基)苯乙烯基)-N-甲基吡啶碘化物(DiA) | 五百九十〇分之四百五十六 | 0.0625 | 0.0794 |
缓冲液和脂质体大小 | 规格 |
---|---|
缓冲 | 磷酸盐缓冲溶液 |
pH值 | 7.4 |
脂质体大小 | 1.5-2μm |
技术说明
- 荧光Clodrosome®的问题与标记的Clodrosome®产生的不准确和/或无法解释的数据的可能性有关。当Clodrosome®诱导巨噬细胞凋亡时,在吞噬溶酶体中被破坏和代谢的掺入Clodrosome®的荧光脂质将分散在残留的凋亡小体中,随后被其他巨噬细胞吞噬。因此,可以在吞噬细胞中检测到荧光脂质,所述吞噬细胞从未吞噬Clodrosome,特别是当利用FACS或荧光透视检测荧光细胞(FACS)或组织匀浆中的荧光水平(荧光透视)时。另一种潜在的伪影来自于细胞外“垃圾”中残留的荧光脂质,其尚未被其他吞噬细胞清除,产生高背景荧光。然而,经验丰富的共聚焦显微镜可能能够区分由荧光完整脂质体产生的点状荧光与破坏脂质体的更多弥散荧光特征,并且一些已成功使用荧光氯膦酸盐脂质体通过共聚焦显微镜观察这些脂质体的细胞位置体内 [1]。另一个复杂因素是公布的数据在氯膦酸盐脂质体开始在巨噬细胞中诱导细胞凋亡时确切地变化很大。Mönkönnnen 等。表明巨噬细胞死亡在体外对RAW264细胞进行氯膦酸盐脂质体处理后的个小时内是可测量的[2],而许多人报告在体内治疗后数小时内没有出现巨噬细胞凋亡的迹象。数据的可变性可能是由于氯膦酸盐的不同脂质体制剂以及极其不同的实验条件。因此,与大多数生物学研究一样,特别是那些涉及脂质体的研究,需要在每个实验模型中建立用氯膦酸盐脂质体处理动物或细胞与凋亡发生之间的时间量。如果研究的性质要求跟踪Clodrosome®而不是对照,Encapsula可根据要求提供DiI标记的Clodrosome®,并假设Clodrosome®分布可在凋亡发生前明确评估,清晰有效的数据关于荧光Clodrosome®的生物分布应该是可以获得的。但是,对于大多数用途,
- 当在正常动物体内监测单核细胞摄取时,由于脂质体吞噬作用后单核细胞的边缘化,循环的单核细胞可能在注射后的前2小时内“消失”或显示减少的计数。这些细胞将在几小时内重新进入血液循环。Sunderkötter 等人。证明这种现象并详细讨论这种行为。还要考虑循环单核细胞的寿命约为24小时,因为单核细胞老化,标记的单核细胞将不断离开循环,即使在正常动物中也是如此[3] 。
- 当不受干扰超过几个小时时,脂质体可能会沉淀下来。在即将使用之前,为了确保均匀的脂质体悬浮液,将样品瓶缓慢倒转数次,直到通过目视检查使悬浮液看起来均匀。剧烈或不稳定的摇动不会损害脂质体,但可能引起泡沫和气泡形成,使得更难以测量所需剂量。
- 如果进行静脉注射的人员没有经历或熟悉注射大量(约10%动物重量,以ml计),粘性液体或微粒悬浮液的预防措施,考虑在发生严重注射相关不良事件的情况下可以使用额外的动物。剂量控制动物首先熟悉大量注射。
- 当静脉内给药时,使用标准预防措施向动物给药较大剂量,包括以下内容:a)在给药前将产品加热至室温。b)确保在给药前从注射器中除去所有气泡; 静脉注射气泡可能会导致空气栓塞,从而导致动物死亡或严重受伤。c)以不超过1毫升/分钟的缓慢,稳定的速度注入产品; 如果动物表现出任何非典型反应,例如异常激动,则降低输注速度。
- 输注相关的不良反应通常涉及动物喘气以进行空气或其他类似癫痫发作的运动。动物通常在没有明显持久性损伤的情况下恢复,但研究人员必须评估对实验结果的任何潜在影响。
- 脂质体应保持在4°C,切勿冷冻。
出现
Fluoroliposome®-DiA是由大微米尺寸多层脂质体制成的黄色液体悬浮液。由于它们的大尺寸,一些脂质体可能沉淀到小瓶的底部。如果闲置在冰箱中,Fluoroliposome®-DiA将相分离并在小瓶底部形成颗粒,在顶部留下清澈的溶液。因此,应在使用前摇动小瓶以形成均匀的溶液。
储存和保质期
存储
Fluoroliposome®产品应始终在4°C的黑暗中储存,除非在动物给药前短时间内置于室温。不要冻结。ENS不对冷冻产品产生的结果负责。
保质期
Fluoroliposome®产品每天生产。装运的批次是在同一天生产的。建议在生产日期后60天内使用产品。