bioacademia 02-012说明书

Taq-DNA聚合酶经济性（-dNTPs），具有强健的缓冲液
02-012  200件，02-012-5 5件x 200件
储存：储存温度-20˚C。
浓度：5单位/μl
*注：一个单位是指能将10 nmol的总dNTPs并入的酶量
当激活的鲑鱼精子DNA被用作
模板/底漆。
储存缓冲液：20毫米Tris HCl（pH 8.0），100毫米KCl，0.1毫米EDTA，1毫米DTT，50%甘油，0.5%
吐温20，0.5%Igepal CA-630。
提供试剂：10 x强效缓冲液（Taq）
应用：
1） 高通量PCR
2） 菌落PCR
3） dUTP、dITP和荧光标记核苷酸的掺入
4） 底漆延伸
5） 在3’-钝端添加一个单核苷酸（腺苷），用于克隆到TA载体。
背景：水热菌DNA聚合酶（taqdna聚合酶）在大肠杆菌中表达
量大，纯度高。该酶具有耐热DNA聚合酶活性，且
分子量为94 kDa。这种酶适用于PCR反应；能够用不同的
底漆。
质量保证：通过SDS-PAGE（CBB染色）测定纯度大于95%（图1）
证实缺乏核酸内切酶和核酸外切酶。
PCR检测：以DNA为模板进行PCR反应，扩增结果良好，达14个
kB（图2）。
使用强效缓冲液（Taq）的注意事项：强效缓冲液可诱导大限度的酶活性。避免
在凝胶电泳分析中产生不希望出现的条带，宜反应时间为
建议如下：1）模板延伸时间约为5至10秒/kb，模板延伸时间为8kb，以及
大约15秒/kb，多14kb；2）用2步PCR设置大致相同的延长时间
（穿梭PCR）和三步PCR；3）在没有扩增的情况下，通过小步延长延伸时间
看到。采用二步PCR方法可以更快地检测到扩增产物。