synvolux SP-3004-01使用方法

SAINT – PROTEIN

P R O T E I N D E L I V E R Y S Y S T E M

SAINT蛋白

为使用 SAINT-蛋白（目录号：编号SP-3004-01、SP-3004-02、SP-3004-04）。本方案中的量适用于 24 孔板的单个孔。其他格式请参见本页底部的表 1。P RO TE IN DE LI VE RY SY SS TE M

一般转染方案

1. 准备细胞进行转染。

• 贴壁细胞：转染前 1 天，将细胞接种于 0.5 mL 生长培养基中，使细胞在转染时达到 80% 融合。转染前，立即用不含血清的相同培养基（无血清培养基）替换生长培养基。
• 悬浮细胞：转染当天，在 0.5 mL 无血清培养基中以其大密度的约 80% 铺板细胞。

2. 使 SAINT-蛋白小瓶达到室温。

3. 充分涡旋 SAINT-蛋白约 30 秒。

4. 使用 1:10 的蛋白 (µg) 与 SAINT-蛋白 (µl) 比例制备复合物。对于每份转染样品，按照以下方法制备复合物：

a. 在 50µl PBS 中稀释 2µg 蛋白。

b. 向蛋白/PBS 溶液中加入 20µl SAINT-蛋白，并轻轻重悬。

5. 在室温下孵育混合物 5-10 min（溶液可能出现浑浊）。

6. 向细胞中加入复合物 (70µl)。

7. 在 CO2 培养箱中于 37 ℃ 下孵育 4 小时。

8. 如果需要更长时间的孵育，加入 50µl 血清，将血清浓度调整至 8%。

9. 进行检测。

表 1. 常用多孔板的每孔推荐量

注：SAINT-蛋白试剂在 4 ℃ 下可稳定储存至少 1 年。请勿冷冻！