蛋白酶 K 是一种广谱丝氨酸蛋白酶，在分子生物学中广泛用于核酸的分离。 它于 1974 年被发现并从真菌 Tritirachium album 中提取。“蛋白酶 K”这个名字来源于酶消化头发或角蛋白的能力。该酶被钙激活，优先消化与脂肪族和芳香族氨基酸的羧基相邻的蛋白质。虽然钙不是维持酶活性所必需的，但它们确实有助于酶的稳定性。去除钙离子后，酶的稳定性降低，蛋白水解活性部分丧失。蛋白酶 K 有两个 Ca2+ 结合位点，位于活性中心附近，但不直接参与催化机制。该酶在 7.5 – 12 的广泛 pH 范围内稳定，最适 pH 值为 8.0。该酶在 37°C 时具有活性，并且活性随温度升高至 60°C 而增加。如果孵育时间延长并且蛋白酶浓度非常高，蛋白质将被*消化。因此，找到特定于每种样品类型的最佳孵育时间非常重要。