无血清细胞冻存液说明书

产品详情

产品描述

细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术，是细胞长期保存的重要手段。细胞冻存液通过冷冻保护剂在冻存过程中对细胞进行保护，以减少或防止冷冻冰晶对细胞造成的损伤。

Jinpan 无血清细胞冻存液（药用级）是一款采用医用原料无血清、无需程序降温的细胞冻存液，广泛适用于多种哺乳动物细胞（肿瘤细胞和常规细胞）的冻存。该冻存液特别优化的配方含有双重保护细胞的成份，从细胞内和细胞外同时保护细胞免受冻存时冰晶的损伤，大大提高了细胞的复苏率和活力，可用于细胞长期保存。该产品配方成分明确，不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌、病毒和支原体等污染，保证冻存细胞的安全。

与传统冻存液相比，本产品不仅可以避免使用血清，降低血清中未知成分和病毒等感染物质给冻存带来的影响与风险，同时，可省去繁琐费时的程序降温过程，细胞可重悬于本产品后直接置于-80℃冰箱长期保存，或次日转移到液氮完成整个冻存过程。

产品性质

该产品已通过严格的内毒素、渗透压、pH 测试和无菌检测（细菌、真菌和支原体检测）。成分明确，极大降低批次间差异

产品特点

1、即用型细胞冻存液——优化的营养成分配方，不需要逐次用多种试剂自行配制冻存液

2、直接冻存于-80℃冰箱，长期保存（>5 年），不需要程序性降温

3、高安全性，病毒、病菌和支原体等污染可能性低——不含动物来源性蛋白，不含血清，可减少各类细菌病毒和支原体等污染

使用方法

使用方法

一 冻存细胞复苏步骤

1. 选择处于指数生长期的细胞，按照常规方法收集贴壁细胞或悬浮细胞于离心管中。

2. 1000 rpm-2000 rpm，离心 5 分钟，收集培养细胞沉淀，弃上清液。

3. 加入适量 4℃预冷的 Jinpan 无血清细胞冻存液重悬细胞，制成细胞悬液。 （按照细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存液的量，推荐冻存密度：1×10⁶ 至 5×10⁶cells/mL。）

4. 将细胞悬液分装至已标记的冻存管中，建议每管 1mL 或 1.5mL。

直接将细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中，可长期冷冻保存。如果想放入液氮中长期保存，需先放入-80℃冰箱至少 12 小时，方可移至液氮罐中长期保存。

二  冻存细胞复苏步骤

1. 在 15 mL 离心管中加入 5-10 mL 平衡至室温的培养基。

2. 从-80℃冰箱/液氮中取出冻存的细胞，立即放入 37℃水浴锅或其他细胞复苏设备中，迅速解冻。

3. 将冻存管中的细胞悬液逐滴转移至预先准备好的含培养基的离心管中，1000 rpm-1500 rpm，离心 5 分钟，收集细胞沉淀，弃上清（操作时小心，切勿将细胞沉淀移去）。

4. 加入适量平衡至室温的培养基重悬细胞，接种到事先准备好的培养容器中，轻轻摇晃培养容器，使细胞分布均匀。

5. 镜检细胞后，可根据各自研究的需要和方法进行细胞常规培养。培养 5-24h 后，观察细胞状态，可视情况更换鲜细胞培养液。

实验案例分析

1.选择处于对数生长期的四种细胞，按照常规方法收集细胞于离心管中。

2.1000 rpm，离心 5 分钟，收集培养细胞沉淀，弃上清液。

3.加入适量 4℃预冷的 Jinpan 无血清细胞冻存液、T 公司冻存液、X 公司冻存液分别重悬细胞，制成细胞悬液。冻存密度为 1×106 cells/mL。

4.将细胞悬液分装至已标记的冻存管中，每管 1mL，放入-80℃冰箱中，冷冻保存。

5.冻存 6 个月后，进行细胞复苏，对复苏后的细胞进行台盼蓝染色，统计细胞存活率。

细胞冻存 6 个月后复苏，对复苏后的细胞进行台盼蓝染色，统计细胞存活率

细胞冻存流程分解图：

注意事项

1. 本产品可-30℃至-10℃保存，若长期不用，再次使用时，请在 2-8℃或室温（22-25℃，不超过 4小时）融化 ；

2. 避免反复冻融；

3. 使用此无血清细胞冻存液冻存细胞后，应尽量减少冻存细胞在外存放时间，尽快移入-80℃超低温冰箱长期保存；

4. Jinpan 无血清细胞冻存液（药用级）含有 DMSO，部分对 DMSO 敏感的细胞、淋巴细胞或干细胞冻存，建议使用本产品对其进行试验性冻存、复苏、培养，确认性能后再进行冻存；

5. 该产品在室温条件下放置的时间不宜过长，以免影响冻存效率；

    免责声明: 本公司将不为任何不正当使用此产品所发生的意外负责；为了您的健康安全，请规范操作，穿戴实验服与手套开展实验；

    本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及治疗

运输及保存方法

保存：短期：2-8℃ 6 个月；长期-20℃保存，24 个月。

运输：冰袋运输。