血清/血浆外泌体快速提取分离试剂盒|Quick exosome isolation kit(forSerum/Plasma)
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构,存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
本试剂盒采用独特的分离技术,可以快速从血清/血浆中获得大量完整的外泌体颗粒,适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量(qPCR)和高通量测序等应用。
产品组分
编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
41206ES30 |
||
41206-A |
Exosome isolation solution(Serum/Plasma) |
30 mL |
41206-B |
Exosome Purification Column |
30个 |
运输和保存方法
室温运输,本试剂盒可于室温稳定保存24个月。
注意事项
使用前请将外泌体抽提试剂(41206-A)充分混匀。
2、产品只针对血清/血浆样本,不适用其它体液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提;如果需要进行细胞上清外泌体分离,
请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。
3、如果想要进一步纯化外泌体,可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、本产品仅作科研用途!
操作方法
样品预处理:
收集新鲜的样品,置于冰上待用;若为冻存的样品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解冻,待完全融化后置于冰上待用。
取1 mL血清/血液样品转移至离心管中,4℃,3000×g离心10 min,弃沉淀,并将上清转移至新的离心管中。
3、将转移的上清,4℃,10,000×g离心20 min,弃沉淀,将上清液转移至新的离心管中。
外泌体分离:
1、向预处理后的样品中,加入4倍体积的1×PBS充分混匀。
Serum/Plasma+PBS |
41206-A试剂用量 |
200 μL+800 μL |
200 μL |
1.0 mL+4.0 mL |
1.0 mL |
2、在PBS稀释后的样品中,继续加入相应量的41206-A试剂;盖紧离心管盖,涡旋振荡1 min,放置于4℃冰箱静置2 h。
3、取出装有混合液的离心管,4℃,10,000×g离心60 min,弃上清(尽可能吸净上清液),收集富含外泌体的沉淀。
4、吸取一定量体积的1×PBS溶液均匀吹打离心沉淀物,待其充分悬浮于PBS后,将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。
【注】加入PBS的量,建议根据初始样本的体积决定,初始样本体积:1×PBS体积=2.5:1。
5、将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃,12,000×g离心2 min,弃沉淀,保留上清液,该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。
【注】此时如果依然可以看到明显的沉淀,建议重复步骤4,重新进行洗涤和沉淀。
外泌体纯化
1)纯化外泌体:将收获的外泌体颗粒粗制品转入Exosome Purification Column (EP柱)上管中,于4℃,3000g离心10 min,收集管底的液体,即为纯化后的外泌体颗粒。
2)外泌体的保存:纯化后的外泌体可于4℃保存3天,分装后于-80℃ 长期保存,避免反复冻融。
外泌体除菌(可选):
获得的外泌体后期需要与细胞共培养,可以使用0.22 μm的滤器进行过滤除菌。初次尝试时,外泌体浓度在10-100 μg/mL内做梯度摸索,选择一个较为合适的条件。
HB220107
Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构,存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
本试剂盒采用独特的分离技术,可以快速从血清/血浆中获得大量完整的外泌体颗粒,适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量(qPCR)和高通量测序等应用。
产品组分
编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
41206ES30 |
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41206-A |
Exosome isolation solution(Serum/Plasma) |
30 mL |
41206-B |
Exosome Purification Column |
30个 |
运输和保存方法
室温运输,本试剂盒可于室温稳定保存24个月。
注意事项
使用前请将外泌体抽提试剂(41206-A)充分混匀。
2、产品只针对血清/血浆样本,不适用其它体液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提;如果需要进行细胞上清外泌体分离,
请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。
3、如果想要进一步纯化外泌体,可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、本产品仅作科研用途!
操作方法
样品预处理:
收集新鲜的样品,置于冰上待用;若为冻存的样品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解冻,待完全融化后置于冰上待用。
取1 mL血清/血液样品转移至离心管中,4℃,3000×g离心10 min,弃沉淀,并将上清转移至新的离心管中。
3、将转移的上清,4℃,10,000×g离心20 min,弃沉淀,将上清液转移至新的离心管中。
外泌体分离:
1、向预处理后的样品中,加入4倍体积的1×PBS充分混匀。
Serum/Plasma+PBS |
41206-A试剂用量 |
200 μL+800 μL |
200 μL |
1.0 mL+4.0 mL |
1.0 mL |
2、在PBS稀释后的样品中,继续加入相应量的41206-A试剂;盖紧离心管盖,涡旋振荡1 min,放置于4℃冰箱静置2 h。
3、取出装有混合液的离心管,4℃,10,000×g离心60 min,弃上清(尽可能吸净上清液),收集富含外泌体的沉淀。
4、吸取一定量体积的1×PBS溶液均匀吹打离心沉淀物,待其充分悬浮于PBS后,将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。
【注】加入PBS的量,建议根据初始样本的体积决定,初始样本体积:1×PBS体积=2.5:1。
5、将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃,12,000×g离心2 min,弃沉淀,保留上清液,该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。
【注】此时如果依然可以看到明显的沉淀,建议重复步骤4,重新进行洗涤和沉淀。
外泌体纯化
1)纯化外泌体:将收获的外泌体颗粒粗制品转入Exosome Purification Column (EP柱)上管中,于4℃,3000g离心10 min,收集管底的液体,即为纯化后的外泌体颗粒。
2)外泌体的保存:纯化后的外泌体可于4℃保存3天,分装后于-80℃ 长期保存,避免反复冻融。
外泌体除菌(可选):
获得的外泌体后期需要与细胞共培养,可以使用0.22 μm的滤器进行过滤除菌。初次尝试时,外泌体浓度在10-100 μg/mL内做梯度摸索,选择一个较为合适的条件。
HB220107
Q: 41216和41206有什么区别?
A: 41206是旧版,41216是新版。新版多加了除杂蛋白的试剂solution P2,除杂蛋白的效果会好很多。结果上来说,同样的样品新版提取的蛋白浓度会低一些,但是纯度会高一些。老客户一直在用41206就继续推荐41206,新客户推荐41216。两款试剂盒都是共沉淀法,做蛋白质组学推荐41216新款试剂盒。新款试剂盒对杂蛋白的效果更好,对下游实验的影响也小。
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