FuniCut™ XbaI限制性内切酶,XbaI内切酶,快速内切酶XbaI

FuniCut™ XbaI限制性内切酶,XbaI内切酶,快速内切酶XbaI

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

 

FuniCut® 系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA 等。FuniCut® 系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

 

产品信息

 

货号

15033ES76

规格

500 T

识别位置

5'-T↓CTAGA-3'

3'-AGATC↑T-5'

推荐反应条件

1×FuniCut® 缓冲液;最适37℃孵育

酶活

20 U/μL

失活条件

80°C孵育20 min

 

组分信息

 

组分编号

组分名称

15033ES76

15033-A

FuniCut® XbaI  

500 μL

15033-B

10×FuniCut® Buffer

3×1 mL

15033-C

10×FuniCut® Color Buffer*

3×1 mL

*10×FuniCut® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut® Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

 

储存条件

 

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

注意事项

 

  1. 3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。
  2. Dam甲基化影响,序列可能重叠,剪切阻断。
  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
  4. 本产品仅作科研用途。

 

使用方法

 

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作)

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut® XbaI  

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10×FuniCut® Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验,酶切前需纯化PCR产物。

2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3) 37℃孵育15 min(质粒),或15~30 min(PCR产物),或30~60 min(基因组DNA)。

4) 80°C温育 20 min 即可使酶失活,停止反应(可选)。

5) 如果使用FuniCut® Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可直接上样电泳。

2. 双酶切或多酶切

1) 每种内切酶的用量为1 μL,并根据需要适当扩大反应体系。

2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,以较高的温度进行孵育。

3. 质粒的扩大反应体系

组分

体积(20 μL)

体积(20 μL)

体积(50 μL)*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

FuniCut® XbaI  

1 μL

2 μL

5 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果总反应体系大于20 μL,可使用水浴、金属浴或沙浴,并增加孵育时间。

4. 不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

1

0

0

1

1

0

1

5

5. 甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

序列可能重叠,剪切阻断

无影响

无影响

无影响

无影响

6. 不同反应缓冲液中的活性*

反应缓冲液

FuniCut® Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

50%

100%

100%

*活性数据来自金畔生物限制酶标准反应体系下的检测。

 

Ver.CN20231228

 

FuniCut™ XbaI限制性内切酶,XbaI内切酶,快速内切酶XbaI

暂无内容

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产品简介

 

FuniCut® 系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA 等。FuniCut® 系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

 

产品信息

 

货号

15033ES76

规格

500 T

识别位置

5'-T↓CTAGA-3'

3'-AGATC↑T-5'

推荐反应条件

1×FuniCut® 缓冲液;最适37℃孵育

酶活

20 U/μL

失活条件

80°C孵育20 min

 

组分信息

 

组分编号

组分名称

15033ES76

15033-A

FuniCut® XbaI  

500 μL

15033-B

10×FuniCut® Buffer

3×1 mL

15033-C

10×FuniCut® Color Buffer*

3×1 mL

*10×FuniCut® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut® Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

 

储存条件

 

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

注意事项

 

  1. 3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。
  2. Dam甲基化影响,序列可能重叠,剪切阻断。
  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
  4. 本产品仅作科研用途。

 

使用方法

 

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作)

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut® XbaI  

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10×FuniCut® Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验,酶切前需纯化PCR产物。

2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3) 37℃孵育15 min(质粒),或15~30 min(PCR产物),或30~60 min(基因组DNA)。

4) 80°C温育 20 min 即可使酶失活,停止反应(可选)。

5) 如果使用FuniCut® Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可直接上样电泳。

2. 双酶切或多酶切

1) 每种内切酶的用量为1 μL,并根据需要适当扩大反应体系。

2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,以较高的温度进行孵育。

3. 质粒的扩大反应体系

组分

体积(20 μL)

体积(20 μL)

体积(50 μL)*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

FuniCut® XbaI  

1 μL

2 μL

5 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果总反应体系大于20 μL,可使用水浴、金属浴或沙浴,并增加孵育时间。

4. 不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

1

0

0

1

1

0

1

5

5. 甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

序列可能重叠,剪切阻断

无影响

无影响

无影响

无影响

6. 不同反应缓冲液中的活性*

反应缓冲液

FuniCut® Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

50%

100%

100%

*活性数据来自金畔生物限制酶标准反应体系下的检测。

 

Ver.CN20231228

 

FuniCut™ XbaI限制性内切酶,XbaI内切酶,快速内切酶XbaI

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