Heparin Agarose 6FF(肝素亲和纯化介质)

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Heparin Agarose 6FF是一种新型亲和层析介质,是将肝素偶联到交联琼脂糖凝胶过滤层析介质上。肝素是一种含硫酸酯的酸性多糖,能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干扰素、核酸结合蛋白、限制内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物大分子结合,因此本产品可应用于上述产品的分离纯化,同时产品基团脱落少,使用寿命长,操作方便。

 

产品性质

基质

高度交联的琼脂糖凝胶

配基

肝素

配基密度

>5 mg/mL

粒径

45-165 µm

载量

>3 mg抗凝血因子Ⅲ(ATⅢ)/mL基质

耐压流速

250-400 cm/h(在0.1 MPa)

热性

121℃,0.02 M NaH2PO4 pH7.5,30 min,5次

PH稳定性

4~10(长期);3~13(短期,CIP)

化学稳定性

在常用水相溶液中稳定:0.1M氢氧化钠;0.05M乙酸钠;8M尿素;6M盐酸胍;非离子去污剂;10%丙三醇

储存缓冲液

20%乙醇+0.05 mol/L乙酸钠缓冲液,4~8℃

 

运输和保存方法

1.常温运输避免日晒、雨淋、重压。

2.密封保存在4~8℃(保存溶液为20%乙醇+0.05mol/L乙酸钠缓冲液)干燥、通风、清洁处,不可冷冻。

3.有效期5年。

 

注意事项

1.该介质从冷室或冰箱中取出后最好在室温下恢复到室温,然后缓慢摇匀后装柱,以免产生气泡影响柱效。

2.吸附:20 mmol/L~50 mmol/L,pH7.4~8.0的缓冲液,为避免离子交换的干扰,缓冲液可适当加50 mmol/L~100 mmol/L NaCl,最常用的为Tris-HCl缓冲溶液。

3.上样样品必须与平衡柱子缓冲液的 pH、电导相同。

4.洗脱过程中应严格控制流速,且勿过快。

5.加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。

6.了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 装柱 

装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。

2 平衡

2~5个柱床体积的初始缓冲溶液进行平衡,直至pH和电导率保持不变。常用的缓冲液为pH 7.4~8.0的0.02 mol/L~0.05 mol/L的Tris-HCl或PBS缓冲液。

3 上样

样品的预处理:样品需先用0.45 μm滤膜过滤,然后上样,以免堵塞层析柱。上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可通过线性实验找到最佳上样量。

4 洗脱

可通过改变离子强度来达到洗脱效果,一般可在pH7.4~8.0的缓冲液中加0.2~2 mol/L NaCl 进行,也可改变 pH 值来进行洗脱。一般洗脱方式有恒定洗脱、梯度洗脱、阶跃洗脱,推荐使用梯度洗脱。

5 在位清洗

1)去除因离子交换作用吸附的蛋白:用2 mol/L NaCl溶液反向清洗2~3个柱床体积。

2)去除强疏水性蛋白和脂质等:用70%乙醇或者30%异丙醇反向清洗4个柱床体积。

6 再生

先用0.1 mol/L Tris-HCl pH7.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.1 mol/L NaOH(含2 mol/L NaCl)洗3个柱床体积,最后用20%乙醇溶液洗3个柱床体积。经常用酸碱洗填料会使填料的吸附能力下降,所以清洗要尽量缩短时间。  

                                          HB220606

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Heparin Agarose 6FF是一种新型亲和层析介质,是将肝素偶联到交联琼脂糖凝胶过滤层析介质上。肝素是一种含硫酸酯的酸性多糖,能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干扰素、核酸结合蛋白、限制内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物大分子结合,因此本产品可应用于上述产品的分离纯化,同时产品基团脱落少,使用寿命长,操作方便。

 

产品性质

基质

高度交联的琼脂糖凝胶

配基

肝素

配基密度

>5 mg/mL

粒径

45-165 µm

载量

>3 mg抗凝血因子Ⅲ(ATⅢ)/mL基质

耐压流速

250-400 cm/h(在0.1 MPa)

热性

121℃,0.02 M NaH2PO4 pH7.5,30 min,5次

PH稳定性

4~10(长期);3~13(短期,CIP)

化学稳定性

在常用水相溶液中稳定:0.1M氢氧化钠;0.05M乙酸钠;8M尿素;6M盐酸胍;非离子去污剂;10%丙三醇

储存缓冲液

20%乙醇+0.05 mol/L乙酸钠缓冲液,4~8℃

 

运输和保存方法

1.常温运输避免日晒、雨淋、重压。

2.密封保存在4~8℃(保存溶液为20%乙醇+0.05mol/L乙酸钠缓冲液)干燥、通风、清洁处,不可冷冻。

3.有效期5年。

 

注意事项

1.该介质从冷室或冰箱中取出后最好在室温下恢复到室温,然后缓慢摇匀后装柱,以免产生气泡影响柱效。

2.吸附:20 mmol/L~50 mmol/L,pH7.4~8.0的缓冲液,为避免离子交换的干扰,缓冲液可适当加50 mmol/L~100 mmol/L NaCl,最常用的为Tris-HCl缓冲溶液。

3.上样样品必须与平衡柱子缓冲液的 pH、电导相同。

4.洗脱过程中应严格控制流速,且勿过快。

5.加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。

6.了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 装柱 

装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。

2 平衡

2~5个柱床体积的初始缓冲溶液进行平衡,直至pH和电导率保持不变。常用的缓冲液为pH 7.4~8.0的0.02 mol/L~0.05 mol/L的Tris-HCl或PBS缓冲液。

3 上样

样品的预处理:样品需先用0.45 μm滤膜过滤,然后上样,以免堵塞层析柱。上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可通过线性实验找到最佳上样量。

4 洗脱

可通过改变离子强度来达到洗脱效果,一般可在pH7.4~8.0的缓冲液中加0.2~2 mol/L NaCl 进行,也可改变 pH 值来进行洗脱。一般洗脱方式有恒定洗脱、梯度洗脱、阶跃洗脱,推荐使用梯度洗脱。

5 在位清洗

1)去除因离子交换作用吸附的蛋白:用2 mol/L NaCl溶液反向清洗2~3个柱床体积。

2)去除强疏水性蛋白和脂质等:用70%乙醇或者30%异丙醇反向清洗4个柱床体积。

6 再生

先用0.1 mol/L Tris-HCl pH7.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.1 mol/L NaOH(含2 mol/L NaCl)洗3个柱床体积,最后用20%乙醇溶液洗3个柱床体积。经常用酸碱洗填料会使填料的吸附能力下降,所以清洗要尽量缩短时间。  

                                          HB220606

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